广西青年科学基金(0991085)
- 作品数：12 被引量：64H指数：5
- 相关作者：韦江红莫碧文黄剑伟徐青王昌明更多>>
- 相关机构：桂林医学院附属医院美国国立卫生研究院更多>>
- 发文基金：广西青年科学基金国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TLR4／PI3K信号相关分子在气道上皮细胞诱导的哮喘气道平滑肌细胞迁移功能中的作用被引量：7
- 2011年
- 目的 探讨TLR4、PI3K和NF-kB在气道上皮细胞诱导的哮喘气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells,ASMCs）迁移中的作用.方法 细胞消化法培养原代哮喘ASMCs,TNF-α刺激上皮细胞系RTE细胞收集细胞培养上清液,ELISA检测上清液中IL-8和RANTES的含量,以TLR4抗体、渥曼青霉素（Wortmannin）、二硫代氨基吡咯烷（PDTC）作为工具药,改良Boyden趋化小室检测其在上皮细胞诱导的哮喘ASMCs跨膜迁移中的作用.结果 各TNF-α组RTE培养上清液中IL-8和RANTE水平均显著增高（P＜0.01）,20 ng/ml组较其他组显著增高（P＜0.01）.各哮喘组ASMCs的跨膜迁移数较正常组均显著增加（P＜0.01）,各处理组哮喘ASMCs的跨膜迁移数亦较哮喘组明显增加（P＜0.01）,TNF-α＋TLR4抗体组、TNF-α ＋Wortmannin组和TNF-α＋Wortmannin＋PDTC组哮喘ASMCs跨膜迁移数较TNF-α组明显减少（P＜0.01）；TNF-α＋Wortmannin ＋PDTC组ASMCs跨膜迁移数亦低于Wortmannin组（P＜0.05）.结论 TLR4/PI3K信号相关分子参与哮喘气道上皮细胞诱导的ASMCs跨膜迁移,可能是哮喘气道重塑的机制之一.
- 莫碧文苏海英韦江红黄剑伟王昌明曾锦荣徐青林云
- 关键词：气道平滑肌细胞气道重塑
- 地塞米松对支气管哮喘大鼠气道重塑及气道平滑肌中Toll样受体4表达的影响被引量：5
- 2011年
- 气道炎症和气道重塑是支气管哮喘（简称哮喘）发生、发展的重要环节，但其发病机制尚未完全明确[1]。Toll样受体（Toll likereceptor，TLR）是天然免疫和获得性免疫的桥梁[2]，研究结果表明，TLR在哮喘的发生、发展中可能起着较为重要的作用[3]。地塞米松是治疗哮喘的经典药物，对哮喘的气道炎症和气道重塑均有改善作用，但其作用机制不明。
- 韦江红莫碧文陶赞英黄剑伟
- 关键词：TOLL样受体4气道重塑地塞米松气道平滑肌获得性免疫
- TOLL样受体4对被动致敏人气道平滑肌细胞增殖及合成分泌TGF-β1功能的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨TLR4的激活对哮喘血清被动致敏人气道平滑肌细胞(HASMCs)增殖与合成分泌功能的影响。方法:通过培养原代HASMCs,以人哮喘血清致敏细胞,观察HASMCs表面TLR4的表达、细胞增殖反应与转化生子因子-β1(TGF-β1)在哮喘状态下的合成分泌水平。结果:与正常对照组相比,被动致敏组和TNF-α组HASMCsTLR4表达均显著增多(P<0.01),增殖反应显著增强(P<0.01),总蛋白浓度、IgE与TGF-β1的分泌水平均显著增高(P<0.01),并且TNF-α组各项指标均较被动致敏组效果更加显著;抗TLR4抗体组各项指标较被动致敏组、TNF-α组显著减弱或减少(P<0.01)。结论:哮喘血清被动致敏HASMCs表面TLR4的活化可能通过诱导细胞的增殖和TGF-β1的合成分泌,导致哮喘气道微环境的改变,参与哮喘气道重构过程。
- 黄剑伟莫碧文韦江红王昌明曾锦荣徐青
- 关键词：TOLL样受体4人气道平滑肌细胞被动致敏分泌气道重构
- TOLL样受体4对哮喘气道平滑肌细胞分泌IL-5、IL-8的影响被引量：8
- 2011年
- 目的探讨TOLL样受体4(TLR4)在哮喘气道炎症反应中的作用及机制。方法建立哮喘大鼠模型,分离、培养其气道平滑肌细胞(ASMCs),传至6代后随机分为转染组和对照组,转染组应用小分子RNA干扰技术、脂质体转染法进行小干扰RNA(siRNA)-TLR4转染,对照组为空白对照。培养24 h后应用ELISA法检测两组细胞培养上清液中IL-5、IL-8水平,应用RT-PCR和Western-blot法检测细胞中TLR4 mRNA和蛋白表达水平。结果转染组IL-5、IL-8水平及TLR4 mRNA、蛋白表达水平均显著低于对照组(P均<0.01)。结论 TLR4可能通过促进ASMCs合成分泌IL-5、IL-8而加重哮喘气道炎症反应,此为临床靶向治疗提供了理论依据。
- 韦江红莫碧文黄剑伟徐青林武州
- 关键词：TOLL样受体4白细胞介素-5白细胞介素-8
- TOLL样受体4在哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在哮喘状态下气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、凋亡中的作用。方法:建立哮喘大鼠模型,分离、培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞,应用小分子RNA干扰技术、脂质体转染法进行小分子RNA-TLR4的转染、MTT法检测细胞增殖、TUNNEL法检测细胞凋亡情况、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot检测细胞中TLR4的mRNA和蛋白的表达水平。结果:TNF-α组ASMCs增殖反应显著高于对照组s、iRNA-TLR4转染组、TNF-α+siRNA-TLR4转染组,而siRNA-TLR4转染组的ASMCs增殖反应显著低于对照组;siRNA-TLR4转染组和TNF-α+siRNA-TLR4转染组细胞凋亡率显著高于对照组,而TNF-α组ASMCs的凋亡率显著低于对照组s、iRNA-TLR4转染组、TNF-α+siRNA-TLR4转染组;对照组和TNF-α组TLR4的mRNA和蛋白表达水平显著高于siRNA-TLR4转染组、TNF-α+siRNA-TLR4转染组,而TNF-α组TLR4的mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组。结论:TLR4的激活可能促进哮喘气道平滑肌细胞的增殖,抑制凋亡,从而在哮喘气道重构中起重要作用。
- 韦江红莫碧文黄剑伟
- 关键词：TOLL样受体4支气管哮喘增殖凋亡
- Toll样受体与支气管哮喘气道重塑被引量：2
- 2010年
- 气道重塑是除气道慢性炎症以外支气管哮喘的又一重要特征。近年来研究表明,Toll样受体可通过调节多种致气道重塑因子如生长因子、细胞因子、炎性介质、趋化因子等的生成和活化,最终导致气道重塑。
- 韦江红莫碧文
- 关键词：TOLL样受体支气管哮喘气道重塑
- TLR4/NF-κB对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响被引量：9
- 2011年
- 目的探讨Toll样受体4(Toll like receptors 4,TLR 4)/核因子-κB(N uclear Factor Kappa B,N F-κB)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡的影响。方法体外培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞,将细胞分为空白对照组、TN F-α组、(TN F-α+PD TC)组和(TN F-α+TLR 4)抗体组。用四甲基偶氮唑蓝(M TT)微量比色法检测ASM C s增殖反应,用TU N N EL法检测ASM C s凋亡情况,用ELISA检测细胞培养上清液中N F-κB的蛋白含量,用R T-PC R、W estern blot检测各组细胞TLR 4的m R N A和蛋白表达水平。结果TN F-α组ASM C s的增殖反应与对照组相比增加,差异有显著性(P<0.05),(TN F-α+PD TC)组、(TN F-α+TLR 4)抗体组ASM C s增殖反应显著低于TN F-α处理组(P<0.01),(TN F-α+PD TC)组与对照组相比差异无显著性(P>0.05),(TN F-α+TLR 4)抗体组ASM C s增殖反应显著低于对照组(P<0.01);TN F-α处理组细胞凋亡率与对照组相比差异无显著性(P>0.05),(TN F-α+PD TC)组和(TN F-α+TLR 4)抗体组细胞凋亡率显著高于TN F-α处理组(P<0.01)及对照组(P<0.01);TN F-α组N F-κB含量显著高于对照组、(TN F-α+PD TC)组及(TN F-α+TLR 4)抗体组(P<0.01);(TN F-α+PD TC)组与(TN F-α+TLR 4)抗体组之间差异无显著性(P>0.05);TN F-α组TLR 4mRNA表达水平明显高于对照组及(TN F-α+TLR 4)抗体组(P<0.05);(TN F-α+TLR 4)抗体组TLR 4m R N A表达水平与对照组之间差异无显著性(P>0.05);TN F-α组TLR 4蛋白表达水平显著高于对照组及(TN F-α+TLR 4)抗体组(均P<0.01);对照组TLR 4蛋白表达水平显著高于TN F-α+TLR 4抗体组(P<0.01)。结论 TLR 4可能通过N F-κB参与哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖凋亡。
- 韦江红莫碧文黄剑伟
- 关键词：TOLL样受体4核因子-ΚB哮喘大鼠气道平滑肌细胞凋亡
- 大鼠骨髓间充质干细胞体外培养及CM-DiI标记的实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的建立骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离纯化、扩增以及标记的方法,为后期体内实验提供依据。方法采用全骨髓培养和差速贴壁法分离纯化MSCs,培养期间观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期和表面标记物,成脂成骨分化诱导鉴定。MSCs经氯甲基苯甲酰氨荧光染料(CM-DiI)标记后,荧光显微镜观察荧光标记情况,流式细胞仪检测标记率,并通过绘制生长曲线明确CM-DiI对MSCs生长增殖的影响。结果 MSCs接种24～48 h后,贴壁细胞多为圆形、多角形、梭形,传至第3代时形态呈均一的长梭形。第3代MSCs高表达CD44,低表达CD106,不表达CD11b、CD45,85%以上细胞处于G0/G1期;成脂成骨诱导分别经油红O和茜素红染色均呈阳性。CM-DiI标记后荧光显微镜下细胞呈红色荧光,体外培养2周荧光未见明显减弱;流式细胞术检测显示标记率达95%以上,标记后细胞生长增殖不受影响。结论通过全骨髓贴壁法及其扩增后可获得大量纯度较高的间充质干细胞,CM-DiI标记是一种简单、稳定、无毒的细胞标记方法。
- 毛雨红莫碧文李劳冬李洁王孝养韦江红黄剑伟徐青
- 关键词：骨髓间充质干细胞原代培养细胞标记
- Toll样受体4/核因子-κB对哮喘大鼠气道炎症和重构的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:探讨TLR4/NF-κB对哮喘大鼠气道炎症和气道重构的影响。方法:将18只SD大鼠随机分成3组:对照组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组6只。造模成功后,利用HE染色、免疫组织化学方法及病理图像分析系统分析大鼠气道平滑肌的嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况、气道壁厚度以及增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的蛋白表达量。利用RT-PCR和Western blotting检测ASM中TLR4和NF-κB的mRNA及蛋白表达。结果:哮喘4周组和哮喘8周组的气道壁EOS计数、气道壁厚度、气道反应性均较正常对照组显著增加(P<0.01);哮喘4周组和哮喘8周组的TLR4及NF-κB的mRNA水平和蛋白表达与对照组比较均显著增加(P<0.01);TLR4及NF-κB的mRNA水平随哮喘天数的增加而显著增加(P<0.01);哮喘4周组、哮喘8周组PCNA和Bcl-2的蛋白表达量均显著高于正常对照组(P<0.01);哮喘两组间上述指标差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论:TLR4/NF-κB可能参与哮喘大鼠气道炎症和气道重构的调控。
- 韦江红莫碧文黄剑伟
- 关键词：TOLL样受体4哮喘细胞增殖
- TLR4、p-Akt在哮喘大鼠气道平滑肌迁移的作用及小青龙汤对其影响被引量：16
- 2011年
- 目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)及p-Akt在哮喘发病中的作用及小青龙汤对气道平滑肌迁移的影响。方法 SPF级♂大鼠40只随机分为:正常对照组(A)、哮喘4周组(B)、哮喘8周组(C)、小青龙汤4周组(D)和小青龙汤8周组(E),每组8只。以卵清白蛋白(OVA)致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。测定气道阻力;观察气道壁嗜酸性粒细胞侵润情况;图像分析软件测定支气管管壁面积、平滑肌面积和平滑肌至上皮下基底膜距离;免疫组织化学方法检测TLR4、p-Akt蛋白表达。结果 B组、C组、D组和E组大鼠的WAt/Pi、WAm/Pi较正常对照组均增加(P<0.01),间距/Pi减小(P<0.01);B组和C组大鼠的WAt/Pi高于E组,间距/Pi则较两组明显缩短(P<0.05);TLR4在B组和C组气道平滑肌上呈阳性或强阳性表达,表达量高于A组(P<0.01),C组亦高于B组(P<0.05),E组的表达量亦低于C组和D组(P<0.01)。p-Akt在B组、C组及D组的表达均高于A组(P<0.01),D组亦高于B组(P<0.05),E组低于B组和D组,与D组相比亦降低(P<0.05)。结论 TLR4和p-Akt参与哮喘气道平滑肌的迁移,小青龙汤可能通过抑制TLR4和p-Akt的表达在哮喘气道重塑方面发挥一定的作用。
- 莫碧文苏海英韦江红黄剑伟王昌明曾锦荣徐青林云
- 关键词：P-AKT迁移小青龙汤气道重塑
