国际科技合作与交流专项项目(2009DFA32360)
- 作品数：39 被引量：270H指数：10
- 相关作者：何月秋吴毅歆毛自朝何鹏飞王再强更多>>
- 相关机构：云南农业大学河南科技学院玉溪市农业局更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 小麦全蚀病生防芽孢杆菌的筛选与鉴定被引量：1
- 2012年
- 利用菌饼对峙法从云南省的土样中分离出了234株对小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis var.tritici)有拮抗作用的细菌,其中Kc菌株使用浓度为3.3×107cfu/mL的发酵液浸泡小麦种子1 min后,盆栽试验的防效达到56.65%,略高于50%多菌灵WP(1∶100)拌种对照处理的效果。从形态和生理生化特征上可将Kc菌株鉴定为芽孢杆菌属,16S rDNA序列与菌株Bacillus amyloliquefaciens DSM7同源性达99.5%,被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。
- 吴贤兵孙睿揆吴毅歆王志远吴兴兴毛自朝何月秋
- 关键词：小麦全蚀病拮抗细菌RDNA芽孢杆菌生物防治
- 枯草芽孢杆菌XF1菌株中XFsacA基因的克隆及功能验证被引量：3
- 2012年
- 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis XF1是从土壤中分离的一株利用蔗糖快、能高效防治根肿病的专利菌株.为探明其高效的蔗糖代谢机制,用PCR从该菌中扩增到蔗糖代谢关键基因蔗糖-6-磷酸水解酶基因(XFsacA基因),其编码的蛋白质氨基酸序列与枯草芽孢杆菌B168菌株中的XFsacA基因有97%的相似性,且发生了12个氨基酸突变.将该基因中约1.4 kb的编码框序列连接到表达载体pQE30上,构建了重组表达质粒pQE30-XFsacA,该质粒转入到不能利用蔗糖的Escherichia coli BL21中,后者能在以蔗糖为唯一碳源的M9无机离子培养基中正常生长,并表达出了一条约54 000蛋白条带.结果预示XFsacA基因氨基酸序列的替代可能是XF1高效利用蔗糖的基础,同时XFsacA基因的克隆与其在E.coli中的表达研究,为利用蔗糖发酵的工程E.coli构建奠定了基础.
- 贾凡毛自朝王志远赵静吴毅歆何月秋
- 关键词：蔗糖代谢基因克隆
- 烟草内生细菌YN201448的定殖能力研究被引量：9
- 2015年
- 为测定烟草内生细菌YN201448的定殖能力,通过自然转化法将携带绿色荧光蛋白基因的质粒p GFP4412成功导入YN201448细胞中,获得了GFP标记菌株48-p GFP。48-p GFP能稳定表达GFP蛋白,且对5种病原真菌的拮抗能力与野生型YN201448的相同。用48-p GFP菌液浸泡烟草种子和浇灌烟草苗后,在烟草的根、茎、叶等组织中都能检测到标记菌,其定殖数量分布为根﹥茎﹥叶;同时标记菌也能在根际土中稳定地定殖。激光共聚焦显微镜观察发现标记菌株主要聚集在烟草茎组织的表皮、皮层部位及维管组织。因此,YN201448可以在烟草体内外较长期定殖。
- 杨珍福何鹏飞吴毅歆毛自朝何月秋
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌绿色荧光蛋白拮抗作用
- 解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂配方的筛选被引量：8
- 2014年
- 通过对润湿分散剂、黏度调节剂、UV保护剂、防腐剂、抗冻剂和消泡剂的筛选,确定5.0×109cfu/mL解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂的最佳配方:Y2菌粉5.00%,农乳34 2.50%,D-425 2.00%,OP-101.50%,黄原胶0.15%,尿素0.15%,对羟基苯甲酸甲酯0.06%,甘油5.00%,正辛醇0.20%,水83.44%。经过湿法研磨后测定,解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂的悬浮率达92.00%以上,且冷热贮藏稳定。
- 谢兰芬吴毅歆何鹏飞邱昂肖春何月秋
- 关键词：芽孢杆菌悬浮剂
- 枯草芽孢杆菌XF-1防治十字花科根肿病的功能蛋白纯化
- 本文针对该菌株的可溶性蛋白质部分具有很好的抑菌作用，利用葡聚糖凝胶柱分离抑菌蛋白。按照时段收集蛋白组分和紫外吸收峰值的变化，将收集到的组分进行抑菌实验，获得了能够抑菌的、大分子活性的蛋白质。
- 赵静熊国如周惠萍毛自朝吴毅歆何月秋
- 关键词：十字花科根肿病生物防治枯草芽孢杆菌蛋白纯化
- 解淀粉芽孢菌(Bacillus amyloliquefaciens)B9601-Y2的基因组修饰系统的构建
- 为研究其促生长和生防机制，本文应用酵母中定位重组系统和基于PCR扩增的同源重组技术，建立了无抗生素标记的B9601-Y2基因敲出(knock out)和基因替换(gene replacement)操作系统。
- 毛自朝卢灿华贾凡王志远吴兴兴何月秋
- 关键词：抗病机制基因修饰
- 大白菜软腐病拮抗菌的筛选、鉴定及其防效研究被引量：6
- 2019年
- 为筛选对大白菜软腐病具有较好拮抗效果的生防菌株,采用对峙平板法分别从作物根际土、发酵池以及本实验室菌种库得到6株拮抗性较强的菌株ASR-12、ASR-23、ASR-31、ASR-54、ASR-55、ASR-150。在离体叶柄软腐防效试验中,采用注射接种法获得了拮抗性较强的3株拮抗菌ASR-12、ASR-23和ASR-150,48 h的防效分别达到了87.64%、80.90%和70.79%。温室防效试验的结果表明:菌株ASR-12、ASR-23和ASR-150防治效果分别为59.22%、59.21%和55.00%,显著高于72%农用链霉素可湿性粉剂的防效(39.15%),具有很好应用前景。依据形态、生理生化和分子鉴定,菌株ASR-12被鉴定为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens。
- 王彪崔文艳武君洁何朋杰吴毅歆何鹏飞何鹏飞李兴玉王再强
- 关键词：拮抗菌防效
- 解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2抗性基因标记及其在作物根部的定殖能力被引量：25
- 2012年
- 以质粒pMarA转入解淀粉芽孢杆菌植生亚种B9601-Y2菌株,获得了卡那霉素抗性标记遗传稳定的菌株Y2-pMarA。采用浇灌法、拌种法和浸根法接种大白菜,并用浇灌法接种烟草,观察菌株在大白菜和烟草根部的定殖与消长动态。结果表明:通过10μg/mL卡那霉素的LB平板和PCR方法,证明标记菌株Y2-pMarA均能在植株根际、根表和根内定殖。在播种时浇灌大白菜37d后,在自然土处理中根际土、根表土和根内菌量分别为浇灌7d后菌量的94.31%、95.00%和84.75%,在灭菌土中则分别为75.26%、84.92%和177.74%;在拌种处理大白菜时,自然土处理中根际土、根表土和根内菌量分别为拌种7d后菌量的94.44%、95.27%和61.06%,在灭菌土处理中则分别为75.64%、90.91%和69.06%;在浸根10min后移栽,标记菌株能在大白菜根际土壤中扩散和进入根内;至移栽后33d,自然土处理中根际土、根表土和根内菌株定殖密度分别为6.28×105、9.54×105和4.69×103 cfu/g;灭菌土处理中则分别为6.97×105、1.12×106和1.02×104 cfu/g。
- 王志远吴兴兴吴毅歆毛自朝何月秋
- 关键词：穿梭质粒定殖生防菌株
- 解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2对玉米挥发物质的影响
- 2016年
- 为了明确解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(简称Y2)防病机制,利用顶空抽提法收集Y2菌液和喷施Y2后玉米幼苗挥发物,并通过气相色谱-质谱联用仪对其进行分离和鉴定,共收集到18种Y2菌液挥发物和42种玉米活体植株挥发物。玉米释放醛类化合物8种、萜烯类11种,庚醛、十二烷、癸醛和十三烷为菌液和玉米植株共同抽提到的挥发物。不同处理收集的玉米活体植株挥发物组分种类和相对含量存在差异,Y2处理玉米1、3和5 d后,玉米新出现了1-乙基-2-甲基环戊烷、2-辛烯醛、十一烷、十四碳烯和β-愈创木烯5种化合物,α-衣兰烯等11种化合物相对含量极显著地提高,芳樟醇等8种化合物出现振荡,反-罗勒烯等6种化合物消失;喷施菌液7 d后,Y2对玉米活体植株挥发物种类与相对含量都恢复到常态。
- 谢兰芬董文霞何鹏飞吴毅歆肖春何月秋
- 关键词：玉米生防菌
- 一种生物诱抗剂防治玉米圆斑病效果研究被引量：2
- 2013年
- 利用实验室制备的一种生物诱抗剂(Biological resistance inducer,BRI)成功诱导玉米对圆斑病菌(Cochliobolus carbonum)的抗性,BRI对玉米圆斑病菌孢子萌发及菌丝生长无明显影响。温室接种试验结果表明,BRI浓度在10～100μg/mL范围内,随着BRI浓度提高,其诱导玉米抗圆斑病的效果也相应提高。当BRI处理玉米后1 h再接种玉米圆斑病菌,能诱导玉米产生抗性、减轻病害;随着病菌接种时间的推移,其诱导抗性逐渐加强,控病效果逐渐提高;在接种前5 h喷施BRI,其防病效果达峰值(77.46%);接种前6 h喷施BRI,防病效果缓慢下降。当接种孢子在1×103～5×104个/mL时,BRI防病效果达60.95%～71.46%;当接种孢子达1×105个/mL时,防病效果仅达18.08%。
- 薛原吴毅歆毛自朝马丽秦采香何月秋
- 关键词：诱导抗性
