国家科技支撑计划(2006BAK10B06) 作品数:12 被引量:45 H指数:5 相关作者: 黄国明 廖芳 罗加凤 牛春敬 刘跃庭 更多>> 相关机构: 天津出入境检验检疫局 中国检验检疫科学研究院 南开大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家质检总局科技计划项目 天津市科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 环境科学与工程 更多>>
进境有害生物检测关键技术研究 2009年 搭建动植物疫病抗体制备和系列免疫检测试剂开发的技术平台;建立我国尚未发生的植物检疫性有害生物的分子鉴定方法;研究植物检疫性有害生物高特异性和高灵敏性检测方法;建立昆虫基因条码检测体系。全面提升我国防控外来有害生物的能力,有效防御外来生物入侵、疫情疫病传人,保障我国持续增长的超大规模进出境活动畅通。 朱水芳关键词:生物检测 检疫性有害生物 进境 外来有害生物 外来生物入侵 动植物 雀麦上雀麦腥黑粉菌Tilletia bromi的分子检测 被引量:3 2009年 雀麦是重要的牧草,近年来进口量激增。寄生于雀麦上的腥黑粉菌共有4种,即小麦矮腥黑穗菌Tilletia controversa(TCK)、雀麦腥黑粉菌T.bromi、T.bolayi和小麦网腥黑穗菌T.caries(TCT),根据冬孢子形态难以直接区分这些种类。本文在形态、自发荧光和萌发生理三方面的比较研究基础上,依据beta-微管蛋白tub2基因序列设计一套引物,转化为特异SCAR分子标记,建立了雀麦上T.bromi的菌丝基因组DNA的特异PCR检测方法和冬孢子的套式特异PCR检测方法,为病害提供了快速、可靠的检测方法。 廖芳 赵磊 罗加凤 黄国明 刘跃庭 李明刚关键词:SCAR分子标记 套式PCR 分子检测 微波辅助萃取-分光光度法测定细梗胡枝子叶中总黄酮的含量 被引量:3 2009年 目的采用微波辅助萃取法提取,以分光光度法测定细梗胡枝子叶中的总黄酮含量。方法单因素法优化微波提取条件为:使用75%乙醇,在液固比70 ml/g下,加热至75℃后持续辐射15 min。结果与传统的乙醇浸提法和超声法相比,微波法具有操作简便,经济可靠,重现性好等特点。结论微波法适合推广应用于各类中草药中总黄酮含量测定的样品前处理。 张帆 齐小花 邹明强 解瑞丽 李锦丰 杨屹 张宏桂关键词:微波辅助萃取 分光光度法 细梗胡枝子 总黄酮 基于Adh1基因分析高粱属的系统进化关系 被引量:5 2009年 高梁属中有重要的粮食作物和优良牧草,也有农业生产上的重要杂草。文章旨在进一步从分子水平阐明高梁属种间的系统进化关系,为有效利用种质资源进行分子育种改良作物品质提供理论依据,并明确检疫性杂草的分类地位。根据二色高粱(Sorghum bicolor)的Adh1全基因序列(GenBank登录号:AF050456)设计引物,扩增并测定黑高粱(S.almum)、假高粱(S.halepense)、丝克高粱(S.silk)和苏丹草(S.sudanense)共计8个植物材料约2 000 bp的Adh1基因部分序列,结合GenBank中其他24个Sorghum属的同源序列,以Cleistachne sorghoides的对应序列为外群,进行了高梁属的亲缘关系分析,用MP、ML和NJ法分别构建了分子进化树,得到了基本相同的拓扑结构。结果显示:(1)高梁属可明显分为三大支,一支是蒴柄高梁(Chaetosorghum)和异高梁(Heterosorghum)二个亚属,一支是优高梁亚属(Eusorghum),这两个分支包含2n=20、40,染色体较小的种类,另一分支包括拟高梁(Parasorghum)和有柄高梁(Stiposorghum)两个亚属,包含2n=10的种类和它们的多倍体近缘种,染色体相对较大;(2)S.almum的Adh1基因表现出明显的地理分化;(3)Parasorghum亚属的S.pur-pureosericeum和多色高粱(S.versicolor)、光高粱(S.nitidum)和S.leiocladum聚在一起,而该亚属中的S.mata-rankense、S.grande、S.timorense却与亚属Stiposorghum的种聚在一起,表现出更近的亲缘关系;(4)S.mac-rospermum和S.laxiflorum之间具有比其他高梁属种更近的亲缘关系。 廖芳 刘勇 杨秀丽 黄国明 牛春敬关键词:分子进化树 亲缘关系 实时荧光RT-PCR方法检测黄瓜绿斑驳花叶病毒 被引量:10 2009年 根据黄瓜绿斑驳花叶病毒不同分离物外壳蛋白基因(CP)的保守序列,设计合成引物和TaqMan荧光探针,建立了黄瓜绿斑驳花叶病毒的实时荧光RT-PCR(Real time RT-PCR)检测方法。该方法利用TaqMan探针水解产生的荧光信号实时监测目标基因的扩增,实现PCR扩增与检测同步进行。结果表明,实时荧光RT-PCR方法检测灵敏度比普通RT-PCR高约10倍,并且具有快速、简便、准确的优点,适合于CGMMV的快速、高效检测。 邓丛良 黄峰 吕玉峰 张凯 郭育林 赵焕生关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒 两种植原体的PCR检测及其体系优化 被引量:1 2009年 用已报道的植原体通用引物对葡萄黄化病和枣疯病植原体进行常规PCR及巢式PCR检测,并对PCR反应体系进行优化。结果表明:常规PCR扩增出了1.5kb的特异片段,所需PCR模板DNA用量为20ng/μL;在PCR基础上的巢式PCR扩增出1.2kb的特异片段,所需PCR模板DNA用量为2pg/μL。检测灵敏度提高约10000倍。优化试验表明:25μL反应体系中,MgCl2用量对扩增效果影响最大。最终最佳反应体系确立为:25mM MgCl21.7μL,2.5mM dNTP1.8μL,5U/μL Taq酶可选用0.2μL,10mM引物对各0.2μL,最佳退火温度为45.0℃。 马春春 张祥林 乾义柯 王羽中关键词:植原体 PCR 巢式PCR 多年生黑麦草中小麦矮腥黑穗病菌PCR检测方法的建立 被引量:7 2008年 寄生于多年生黑麦草的Tilletia属腥黑粉菌共有4种,即小麦矮腥黑穗病菌Tilletia controversa(TCK)、黑麦草腥黑粉病菌T.lolii、T.vankyi、黑麦草粒腥黑穗病菌T.walkeri。本研究分析了黑麦草上冬孢子形态非常相似的3种腥黑粉菌的DNA序列差异,设计了TCK的特异引物,成功建立了TCK菌丝基因组DNA的特异PCR检测方法和冬孢子的套式特异PCR检测方法。 黄国明 罗加凤 廖芳 刘跃庭关键词:多年生黑麦草 小麦矮腥黑穗病菌 PCR检测 翦股颖上腥黑粉菌近似种多重分子检测 被引量:1 2009年 匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)和细弱翦股颖(A.tenuis)是优良的牧草和草坪草。寄生于翦股颖上的腥黑粉菌共有3种,即小麦网腥黑穗菌(Tilletia caries,TCT)、翦股颖腥黑穗菌(T.sphaerococca)和苍白腥黑粉菌(T.pallida)。在形态、自发荧光和萌发生理3方面比较研究的基础上,选取冬孢子形态非常相似的2种腥黑粉菌TCT和T.sphaerococca为研究对象,依据序列特点设计4套引物,成功建立了TCT和T.sphaerococca菌丝基因组DNA的特异双重PCR检测方法和冬孢子的特异套式双重PCR检测方法。 廖芳 崔铁军 张裕君 罗加凤 刘跃庭 黄国明关键词:翦股颖 套式PCR 基于新型稀土荧光纳米标记物的快速免疫层析方法 <正>随着临床检测需求的不断提高和科学技术的不断进步,免疫分析技术也在不断的向前发展。其发展方向是追求更高的检测灵敏度、更短的检测时间和更简便的操作步骤。为了达到上述目的,本论文介绍了一种新型的免疫层析方法,它是以新型的... 许晔 夏晓虎 李新 陈文彬 王国磊 杨薇 李庆阁文献传递 亚洲梨火疫病菌入侵中国的风险分析 被引量:3 2009年 亚洲梨火疫病(Erwinia pyrifoliae)是一种严重为害梨树的毁灭性病害,本文从其分布状况、寄主、危害及经济重要性、寄主植物经济重要性、传入与定殖可能性和风险管理难度等方面进行了综合分析评估,其综合风险值R为2.52,属于特别危险的有害生物,并据此提出了防止其入侵为害的风险管理措施。 商明清 赵文军 李志红 杨伟东 朱水芳关键词:ERWINIA 风险分析