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牙鲆淋巴囊肿病毒核酸疫苗的安全性研究被引量：4: 2006年; 对牙鲆淋巴囊肿病毒核酸疫苗进行了安全性鉴定。试验采用PCR方法，通过检测该疫苗是否与牙鲆染色体整合，以及疫苗中的卡那霉素抗性基因是否对牙鲆体内和环境中抗性菌数量及种类产生影响，来确认疫苗的安全性。结果表明，该疫苗不与牙鲆染色体发生整合，也未对环境中的抗性苗数量和种类产生影响，表明本实验用核酸疫苗对于受免牙鲆和环境都是安全的。; 郑风荣孙修勤刘洪展吴谡琦张进兴曲凌云洪旭光; 关键词：核酸疫苗抗性基因安全性

CpG DNA的免疫学活性及在鱼类疾病防治中的应用被引量：1: 2005年; 研究发现,细菌中的CpGDNA和人工合成的CpGODN可激活T细胞、B细胞、NK细胞等免疫活性细胞,产生多种细胞因子,增强机体的非特异性和特异性免疫,并诱导Th1型介导的免疫反应,是高效、安全的新型免疫佐剂。该文简要介绍CpGDNA的结构特点、免疫学性质以及在鱼类疾病防治中的应用。; 郑风荣刘洪展孙修勤; 关键词：佐剂 CPG 鱼类免疫学活性疾病防治

牙鲆淋巴囊肿病毒主要衣壳蛋白基因片段真核表达载体的构建、表达与免疫效果评价被引量：1: 2006年; 用淋巴囊肿病毒LCDV-cn感染牙鲆鳃细胞系FG-9307,提取细胞总RNA,用RTPCR法获得了LCDV-cn主要衣壳蛋白（MCP）0.6kb基因片段.将该LCDV-cn-MCP0.6kb片断克隆入真核表达载体pEGFP-N2,得到重组质粒pEGFP-N2-LCDV-cn-MCP 0.6.采用脂质体法将重组质粒转染入牙鲆鳃细胞系FEC,并进行瞬时表达.通过荧光显微镜观察和特异性RT-PCR检测,证实重组质粒pEGFP-N2-LCDV-cn-MCP 0.6kb已成功转染到FEC细胞,并得到了初步表达.将重组质粒肌注入牙鲆体内,检测牙鲆外周血、肠、脾脏、前肾和淋巴细胞的增殖反应、呼吸爆发活性及抗体产生水平.结果表明,构建的核酸疫苗pEGFP-N2-LCDV-cn-MCP 0.6可诱导牙鲆特异性体液免疫和细胞免疫,具有明显的免疫保护作用.; 孙修勤郑风荣李继业吴兴安曲凌云张进兴洪旭光; 关键词：核酸疫苗真核表达载体构建免疫效果

脂质体对牙鲆淋巴囊肿病毒核酸疫苗免疫活性的影响被引量：1: 2006年; 将淋巴囊肿病毒核酸疫苗pEGFP-N2-LCDV0．6kb用脂质体梭华-Softast^TM包裹后肌肉注射入牙鲆体内，通过测定牙鲆外周血、肠、脾脏和前肾的淋巴细胞增殖反应、呼吸爆发活性以及抗体产生水平，评价脂质体对pEGFP-N2-LCDV0．6kb免疫活性的影响。结果表明，脂质体可显著增强该核酸疫苗的免疫活性和提高保护率，可作为一种有应用前景的核酸疫苗佐剂。; 郑风荣刘洪展张进兴孙修勤; 关键词：核酸疫苗免疫效果脂质体佐剂

DNA疫苗的分子佐剂研究进展及其在鱼用疫苗中应用被引量：4: 2006年; DNA疫苗是一种能诱生机体产生免疫应答的新型疫苗,近年来成为一种新的研究热点,但存在免疫效果低的缺点,为优化DNA疫苗的免疫效果,人们开始研究一类新型的DNA疫苗分子佐剂。本文简述了当前DNA疫苗中几种常用的分子佐剂如细胞因子、CpG-ODN及其在鱼用疫苗中的应用。; 郑风荣刘洪展孙修勤; 关键词：DNA疫苗分子佐剂细胞因子 CPG-ODN

淋巴囊肿病病毒主要衣壳蛋白1.3kb基因片段的原核表达被引量：4: 2006年; 取淋巴囊肿病病毒感染牙鲆组织,蛋白酶K裂解,PCR法成功获得了淋巴囊肿病病毒主要衣壳蛋白1.3kb基因片段。构建其原核表达载体,IPTG诱导表达。结果表明,该融合蛋白分子量约70kD,可与抗LCDV多克隆血清特异反应。为LCDV基因工程疫苗的研制奠定了实验基础。; 钟楠胡刚张亮张芳琳白文涛于澜徐志凯吴兴安; 关键词：原核表达

淋巴囊肿病毒核酸疫苗在牙鲆体内的表达及免疫效果评价被引量：2: 2007年; 将本试验室得到的牙鲆淋巴囊肿病毒（LCDV-cn）衣壳蛋白0.6kb片段重组质粒pEGFP-N2-LCDV-cn MCP0.6肌注入牙鲆体内,荧光显微观察及特异性RT-PCR检测其在牙鲆组织内的表达,并进一步测定牙鲆外周血、肠、脾脏、前肾的淋巴细胞增殖反应、呼吸爆发活性及抗体产生水平.研究结果表明, pEGFP-N2-LCDV-cn MCP 0.6可分布于牙鲆各组织内,并在一定时间内持续表达;免疫学检测表明,该重组质粒诱导了牙鲆特异性体液免疫和细胞免疫.本试验成果为淋巴囊肿病毒核酸疫苗的生产应用和产业化提供了重要的理论依据.; 郑风荣孙修勤张进兴廉建华吴谡琦; 关键词：淋巴囊肿病毒核酸疫苗免疫效果

PLD 的生化特性及在信号传导中的作用被引量：2: 2005年; 磷脂酶 D(PLD)是一种分解磷脂的多功能酶,磷脂酶可激活调控许多重要的细胞生理功能,在信号转导、小泡运输、有丝分裂、激素作用的发挥、细胞骨架组装、防御反应以及种子萌发和衰老过程中都起重要作用．主要介绍了磷脂酶基因的生化特性及在植物信号转导中的作用．; 刘洪展郑风荣; 关键词：PLD 生化特性信号转导

淋巴囊肿病病毒主要衣壳蛋白1.3kb基因真核载体的构建及初步免疫被引量：2: 2006年; 从LCDV1.3kb/pGEX-4T1质粒酶切获得LCDV1.3kb基因片段,构建重组真核表达质粒LCDV1.3kb/pcDNA3.1(+);并将其免疫BALB/c小鼠,用ELISA法检测免疫小鼠血清中抗LCDV抗体和IFN-γ。结果发现免疫小鼠可产生特异性抗LCDV抗体,平均效价为1:40,最高效价达1:320,但小鼠血清中IFN-γ平均含量在30pg/mL左右,与阴性对照组无明显差异。结果表明,所构建的重组表达质粒LCDV1.3kb/pcDNA3.1(+)免疫小鼠后可成功诱导其特异性体液免疫应答,但细胞免疫应答不明显,可能与所选载体、免疫动物种类及免疫方法有关,其具体原因有待于进一步探索。此研究为LCDV基因工程疫苗的研制提供了实验资料。; 吴兴安钟楠胡刚张亮张芳琳白文涛于澜司瑞徐志凯; 关键词：基因免疫

Application of quantitative PCR method in detection of Lymphocystis disease virus China (LCDV-cn) in Japanese flounder (Paralichthys olivaceus): 2007年; Lymphocystis disease causes serious economic losses in the fish farming industry. The causative agent of the disease is Lymphocystis disease virus China (LCDV-cn), which has a wide range of hosts. Based on competitive quantitative PCR technology, we established a method to quantify the LCDV-cn in tissue. Results demonstrate that the average amount of LCDV-cn in the peripheral blood of infected flounder with evident tumors is about 106virions/ml while the average amount in those flounder with no evident tumor but cultured with the flounder with evident tumor is about 104virions/ml. No virus was found in the negative samples of flounder.; 昝金东孙修勤张之文曲凌云张进兴

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