国家自然科学基金(30971098)
- 作品数：10 被引量：28H指数：4
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- 内皮祖细胞在动脉粥样硬化发生发展不同阶段中的作用被引量：1
- 2012年
- 动脉内皮损伤是动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）发生的首要环节（1）。而内皮祖细胞（Endothe-lial progenitor cells,EPCs）来源于骨髓,可增殖分化成为血管内皮,但尚未表达成熟的血管内皮表型。
- 李妍妍杨娜娜秦树存
- 关键词：内皮祖细胞动脉粥样硬化
- 雌激素通过上调S1P／S1PR信号通路促进内皮细胞鞘氨醇-1-磷酸生成和分泌
- 2013年
- 动脉粥样硬化性心血管病是全球范围内发病率和死亡率最高的慢性炎症性疾病，而保护内皮系统则是防治动脉粥样硬化的重要策略之一。上世纪90年代人们试图使用雌激素替代治疗遏制女性心血管病，10多年后发现并未出现预期效果。其原因可能与人们在实验中所发现的雌激素抗动脉粥样硬化分子机制存在重要缺陷有关。因此，重新审视雌激素的血管保护机制和分子靶点有可能为雌激素替代治疗提供新的思路。鞘氨醇-1-磷酸（SIP）是目前研究发现的最重要的活性鞘脂类分子之一，其具有促进细胞生长、增殖和抗炎症等多种生物学功能。在细胞膜上分布有5种s1P受体（s1PR），命名为S1PRl—5，其中S1PRl—3广泛分布于血管内皮系统。已有研究表明S1P／S1PR信号通路在内皮系统功能方面扮演着重要角色。
- 郭守东翟雷于杨崔英杰秦树存
- 关键词：雌激素鞘氨醇激酶
- 载脂蛋白A-I模拟肽L-4F减轻过氧化氢诱导的小鼠骨髓内皮祖细胞损伤被引量：5
- 2016年
- 目的:研究载脂蛋白A-I模拟肽L-4F是否减轻过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的小鼠骨髓来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)氧化应激损伤及其机制。方法:通过密度梯度离心法分离小鼠骨髓单个核细胞,条件培养基EGM-2MV诱导分化培养EPCs。对培养EPCs先以PI3K/AKT抑制剂LY294002(30μmol/L)干预2 h后加入L-4F(75 mg/L)4 h,再加入100μmol/L H2O224 h。MTT法检测细胞活力,试剂盒检测各实验组培养基超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,以评价细胞氧化与抗氧化平衡及脂质过氧化程度;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;免疫印迹法检测p-AKT蛋白水平。结果:L-4F预处理显著抑制了H2O2诱导的细胞活力降低、SOD活性下降、MDA含量增加及细胞凋亡。H2O2下调p-AKT的蛋白水平,L-4F呈浓度依赖性地上调p-AKT的蛋白水平。LY294002抑制了L-4F减轻EPCs损伤的作用。结论:载脂蛋白A-I模拟肽L-4F部分通过PI3K/AKT通路减轻H2O2诱导的EPCs氧化应激损伤。
- 展恩欣范昊昌陈晓凤孙玉兰杜云塞黄文秀杨娜娜秦树存
- 关键词：动脉粥样硬化内皮祖细胞过氧化氢氧化应激
- 载脂蛋白AI模拟肽对小鼠骨髓源内皮祖细胞功能促进和损伤保护作用
- 2011年
- 载脂蛋白AⅠ的A型两亲性螺旋结构具有较强的脂质结合能力,其模拟肽是人工合成的具有载脂蛋白AⅠ类似功能的两亲性螺旋肽类。近年来诸多研究表明,血管内皮细胞外的干细胞可修复血管大面积创伤,因而提出了内皮祖细胞（endothelialprogenitor cells,EPC）修复假说。本实验目的观察载脂蛋白AⅠ模拟肽L4F对诱导分化小鼠骨髓来源EPC功能的影响,及其对脂多糖（LPS）与肿瘤坏死因子（TNF-α）诱导的EPC凋亡是否具有保护作用。
- 杨娜娜秦树存焦鹏李大伟
- 关键词：内皮祖细胞
- 单个核细胞分化的命运与动脉粥样硬化被引量：5
- 2010年
- 动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是危害人类健康最严重的心脑血管疾病之一,故阻止AS的进展已成为基础医学与临床医学研究的热点。AS以血管平滑肌细胞增生、脂质沉积形成粥样硬化斑块为特征,并伴有炎症性疾病的病理现象,如变质。
- 杨娜娜张良丁国勇桑慧秦树存
- 关键词：动脉硬化单核细胞内皮祖细胞树突细胞
- 槲皮素预处理对衣霉素所致巨噬细胞凋亡的抑制作用及机制被引量：9
- 2013年
- 本文旨在研究槲皮素(quercetin,QUE)预处理对内质网应激诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的抑制作用,并探讨可能的分子机制。体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20、40和80μmol/LQUE预处理30min,再加入5mg/LTM继续培养12h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC双染法检测细胞活力和凋亡情况;免疫荧光细胞化学法和免疫印迹法检测转录激活因子6(activating transcription factor6,ATF6)核转位情况;分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-timePCR)技术检测促凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)和抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白及mRNA表达变化。结果显示,QUE(40和80μmol/L)预处理显著抑制TM所诱导的细胞活力降低和凋亡。与TM处理组比较,QUE预处理组内质网应激感受器ATF6由胞浆向核内转移明显减弱。TM在蛋白和转录水平均明显上调CHOP表达,并下调Bcl-2表达,而QUE则明显抑制上述变化,且呈浓度依赖性。以上结果表明,QUE可减轻TM所诱导的RAW264.7巨噬细胞凋亡,可能是部分通过抑制ATF6-CHOP信号途径实现的。
- 姚树桐苗成刘庆华李妍妍田华王芸芸马变颖方永奇秦树存
- 关键词：槲皮素衣霉素
- 磷脂转运蛋白缺乏降低小鼠血浆及高密度脂蛋白上鞘氨醇-1-磷酸含量
- 2013年
- 目的循环中鞘磷脂信号分子鞘氨醇-1-磷酸（s1P）主要富集于高密度脂蛋白（HDL）颗粒并对HDL功能产生重要影响。HDL上S1P来自何处并通过何种途径富集于HDL上对分析HDL功能具有重要意义。磷脂转运蛋白（PLTP）通过介导磷脂转运引起HDL重构及功能改变的分子机制很可能与S1P的转运有关。本研究采用液相-串联质谱（LC-Ms／MS）检测C57BL／6小鼠（WT）和相同遗传背景下PIJTP缺陷（PLTP-/-）小鼠脂蛋白上的S1P含量，分析PI胛对血浆S1P分布的影响，并通过体外转运实验分析PLTP介导S1P在红细胞与脂蛋白之间的转运作用。方法选用普通饲料喂养下的wT和PLTP-/-小鼠，收集血浆并采用超速离心法分离脂蛋白，抽提脂质，采用LC—Ms／MS方法进行S1P定量。
- 于杨郭守东冯玉梅冯蕾崔英杰宋国华罗甜张科王义维蒋宪成奏树存
- 关键词：高密度脂蛋白红细胞
- 白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的作用。方法以10μg/mL脂多糖诱导内皮祖细胞损伤,制备内皮祖细胞损伤模型后用不同质量浓度白花丹参提取物干预,用MTT比色法检测各组细胞活性,用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化,碘化丙啶单染流式细胞仪检测各组细胞周期。结果与正常对照组比较,模型组细胞增殖活性明显下降,细胞凋亡率明显增加,S期细胞比率降低,G0/G1期细胞比率增加。与模型组比较,白花丹参组细胞存活率升高,细胞凋亡率下降,且呈剂量依赖性,G0/G1期细胞比率降低,S期及G2/M期细胞比率均增加。结论白花丹参对脂多糖损伤的血管内皮祖细胞有保护作用,其机制可能是通过保护细胞周期正常进行、抑制细胞凋亡实现的。
- 焦鹏杨娜娜唐瑜菁秦树存
- 关键词：白花丹参内皮祖细胞细胞周期凋亡增殖
- 磷脂转运蛋白介导鞘氨醇-1-磷酸在血浆脂蛋白颗粒间转运
- 目的:循环中鞘磷脂信号分子鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate,SIP)主要富集于高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)颗粒并对HDL功能产生重要影响。HDL...
- 郭守东于杨刘帅冯蕾罗甜崔英杰秦树存
- 差速贴壁分离法:获得小鼠骨髓内皮祖细胞诱导分化培养的最佳贴壁时间被引量：6
- 2011年
- 本文旨在比较差速贴壁方法分离的不同时间点贴壁的小鼠骨髓单个核细胞诱导分化为内皮祖细胞的生物学特性,探讨最适宜贴壁时间。Ficoll密度梯度离心分离小鼠骨髓单个核细胞,接种于预先铺有纤维连接蛋白的培养板上,定义为1d贴壁细胞组,取1d非贴壁细胞再接种为3d贴壁细胞组,继续培养2d取非贴壁细胞再接种为3d非贴壁细胞组,继续培养20d后,分别检测3组诱导分化内皮祖细胞亚群表面标志、粘附能力和成血管能力。结果显示,1d贴壁细胞中CD34+、FLK-1+、CD34+/FLK-1+细胞数明显多于3d贴壁细胞和3d非贴壁细胞(P<0.01);1d贴壁细胞粘附能力、成血管能力均显著高于3d贴壁细胞和3d非贴壁细胞;1d贴壁细胞和3d贴壁细胞内皮型一氧化氮合酶(endothelial NO synthase,eNOS)表达量无显著差异,但均显著高于3d非贴壁细胞(P<0.01);3d贴壁细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平显著高于1d贴壁细胞和3d非贴壁细胞(P<0.01)。以上结果提示,小鼠骨髓单个核细胞1d贴壁诱导分化的内皮祖细胞生物学功能显著高于3d贴壁细胞和3d非贴壁细胞;3d贴壁细胞较1d贴壁细胞和3d非贴壁细胞表达较多的VEGF,1d贴壁细胞和3d贴壁细胞eNOS表达高于3d非贴壁细胞。小鼠骨髓内皮祖细胞诱导分化培养最适宜贴壁时间为1～3d。
- 杨娜娜焦鹏李大伟王孟赞姚树桐宗传龙秦树存
- 关键词：内皮祖细胞差速贴壁小鼠CD133FLK-1
