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幽门螺杆菌免疫学检测方法研究进展被引量：6: 2013年; 幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）是1982年由澳大亚学者Warren和Marshall从胃炎和消化性溃疡病人胃黏膜活体组织中培养出来的一种革兰氏阴性螺旋形细长微弯杆菌。Hp感染不仅能引起慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种胃肠道疾病,并且HP被证实为I类致胃癌致病因子[1,2]。; 常艳萍吴利先; 关键词：幽门螺杆菌免疫学检测方法胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤慢性活动性胃炎消化性溃疡病活体组织

幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的克隆及在大肠杆菌和双歧杆菌中的表达被引量：2: 2011年; 目的构建幽门螺杆菌融合基因vacA-hpaA的大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒,并观察其在大肠杆菌(E.coli)和双歧杆菌(B.bifidium)中的表达情况。方法通过PCR得到hpaA-vacA融合基因,将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-hpaA-vacA,电穿孔转化入大肠杆菌BL21和双歧杆菌。转化菌经IPTG诱导,然后用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达的重组蛋白。结果构建了重组质粒pGEX-vacA-hpaA,vacA-hpaA融合基因的分子量约为1 548 bp;经SDS-PAGE分析,在大肠杆菌中表达出85 kD的融合蛋白,表达的蛋白约占细菌总蛋白的20.5%;在双岐杆菌中也能得到正确表达,但表达量较大肠杆菌低,占细菌总蛋白约8.5%。Western blotting结果确认了该条带为hpaA-vacA融合基因的产物。结论构建的重组质粒pGEX-hpaA-vacA能够在大肠杆菌及双歧杆菌中获得表达。; 王国富高峰薛士鹏吴利先; 关键词：幽门螺杆菌双歧杆菌大肠杆菌

两歧双歧杆菌抗福氏痢疾杆菌感染的机制研究被引量：4: 2010年; 目的：以福氏痢疾杆菌感染大鼠为模型,研究两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染大鼠肿癌坏死因子-α（TNF-α）水平的影响,从而探讨其抗福氏痢疾杆菌感染的机制。方法：先用硫酸链霉素给正常大鼠灌胃,出现菌群失调症状,再通过福氏痢疾杆菌灌胃感染大鼠,使用两歧双歧杆菌液干预治疗福氏痢疾杆菌感染大鼠,检测干预治疗后各组大鼠血及脾中TNF-α的含量。结果：福氏痢疾杆菌感染各组与正常组相比,大鼠体内血及脾中TNF-α的含量均有明显差异;福氏痢疾杆菌感染各组中,未干预组、生理盐水组及双歧杆菌组脾中TNF-α的含量有显著变化。其中,双歧杆菌组的TNF-α水平升高更明显。结论：两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染机体的TNF-α分泌有一定促进作用,是其抗福氏痢疾杆菌感染的可能机制。; 吴利先王国富高峰; 关键词：两歧双歧杆菌福氏痢疾杆菌肿瘤坏死因子-Α

幽门螺杆菌重组Bb-hpaA-vacA疫苗的构建被引量：13: 2012年; 目的构建幽门螺杆菌(Hp)重组双歧杆菌(Bb)Bb-hpaA-vacA疫苗。方法通过PCR分别扩增hpaA和va-cA抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接hpaA和vacA,得到hpaA-vacA融合基因;将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-hpaA-vacA,电穿孔法将该质粒导入Bb,构建幽门螺杆菌重组hpaA-vacA疫苗,然后用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达的重组蛋白。结果 PCR成功扩增出分子量约为1 500bp的hpaA-vacA融合基因,双酶切证实hpaA-vacA融合基因成功插入pGEX-1λT中,并成功转化入双歧杆菌,而且重组蛋白能在双岐杆菌中得到正确表达,Western blotting显示重组蛋白具有免疫原性。结论成功构建螺杆菌rBb-hpaA-vacA疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定了基础。; 王国富高峰吴利先; 关键词：幽门螺杆菌双歧杆菌

幽门螺杆菌活载体疫苗的研究进展被引量：4: 2011年; 幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）被公认为是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等疾病发生的主要病因,并与胃腺癌、胃淋巴瘤的发生密切相关,是一级致癌因子[1]。虽然HP确切的致病机制尚未完全阐明,但HP必须首先定植于胃粘膜,然后再进一步侵入宿主防御系统,由其毒素的直接作用和诱导的炎症反应等间接作用损伤组织而致病。流行病学调查研究显示，我国幽门螺旋杆菌感染率约为40％～60％，儿童也有相当高的感染率。; 罗夙医吴利先; 关键词：幽门螺杆菌活载体疫苗慢性活动性胃炎幽门螺旋杆菌致病机制

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云南省自然科学基金(2007C147M)