湖北省自然科学基金(2005ABA080)
- 作品数：10 被引量：33H指数：3
- 相关作者：王清秀王家宁钟和英姚尚龙彭成为更多>>
- 相关机构：郧阳医学院附属人民医院华中科技大学郧阳医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省卫生厅青年科技人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 基于低频电子脉冲的膀胱功能障碍治疗仪优化设计被引量：1
- 2022年
- 为了提高膀胱障碍患者的治疗效果,提出一种基于低频电子脉冲的膀胱功能障碍治疗仪。首先,根据膀胱功能障碍治疗仪功能需求,对治疗仪整体方案进行设计,并结合国内外治疗设备参数指标和临床经验,对设计的治疗仪电刺激参数进行设定;其次,根据治疗仪整体设计方案,对其硬件和软件进行了详细设计,包括微控制器、电源和DAC转换等硬件,以及刺激波形生成、主控程序、按键处理程序等软件;最后,对刺激输出波形和电压升压电路进行了测试。结果表明,设计的膀胱功能障碍治疗仪治疗效果良好,具有一定的可行性。
- 王静周舰胡志张炜
- 关键词：膀胱治疗仪
- 大鼠坐骨神经损伤性疼痛的行为观察和背根神经节中Kv1mRNA的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)钾通道Kv1mRNA的表达及其在疼痛发生机制中的作用。方法:SD雄性大鼠60只,随机分为:A组:CCI组(30只);B组:对照组(30只)。术前及术后3,7,14,28天分别测定大鼠热痛阈值、机械痛阈值和行为学评分。术后3、7、14、28天用RT-PCR分析Kv1mRNA表达的变化。结果:所有CCI动物从术后3天起,出现明显疼痛行为学改变和热痛、机械痛阈值的降低,与对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。RT-PCR结果显示A组术后3天Kv1.2,Kv1.4,Kv1.6mRNAs明显减少,术后7天Kv1.1mRNAs明显减少,显著低于B组(P<0.05或P<0.01),术后Kv1.5mRNAs均无减少(P>0.05)。结论:慢性坐骨神经损伤后,背根神经节钾通道Kv1.1,Kv1.2,Kv1.4mRNAs的表达减少,而且表达减少与CCI大鼠的痛过敏、行为变化在时相上基本一致,说明CCI大鼠痛觉过敏与背根神经节Kv1.1,Kv1.2,Kv1.4mRNAs表达的减少有关。
- 张瑞王清秀郭慧琴唐微
- 关键词：背根神经节钾通道
- Proseal与Slipa喉罩在腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果比较被引量：8
- 2017年
- 目的:比较proseal与slipa喉罩在腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果。方法:收集我院收治的68例胆囊行腹腔镜胆囊切除术患者,随机分为A组和B组,每组各34例,A组患者应用slipa喉罩,B组患者应用proseal喉罩进行麻醉。观察并比较两组患者各时间点血压、心率水平,患者麻醉时间、苏醒时间、喉罩插入时间与拔除时间以及患者的不良反应发生率。结果:与喉罩置入前相比,两组患者手术中收缩压(SBP)以及舒张压(DBP)水平均下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者各时间点的血压以、心率、麻醉时间及苏醒时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与B组相比,A组患者的喉罩插入时间较长,喉罩沾血的发生率较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Pro seal与Slipa喉罩在腹腔镜胆囊切除术中的麻醉效果相当,但Slipa喉罩的插入时间以及喉罩沾血的发生率更高。
- 陈新生李雄刚周本健王宇飞刘建华
- 关键词：PROSEAL喉罩SLIPA喉罩腹腔镜胆囊切除术
- 人类神经生长因子β基因重组腺病毒载体的构建被引量：7
- 2005年
- 目的:为研究人神经生长因子β(hNGFβ)基因对慢性神经病理性痛的治疗作用,构建人类神经生长因子β基因重组腺病毒载体。方法:将hNGFβ外源性核酸片段插入到pBluescriptⅡSK(+)的XmaⅠ与XbaⅠ位点,构建成pBluescriptⅡSK(+)hNGFβ,再将其与腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV经KpnⅠ和NotⅠ双酶切后,构建成转移质粒pShuttleCMVhNGFβ,将该转移质粒经PmeⅠ酶切后,转化含腺病毒骨架质粒pAdEasy1的感受态菌BJ5183,重组为pAdEasy1hNGFβ,经PCR鉴定后,LipoVec介导pAdEasy1hNGFβ转染AD293细胞,将透析纯化后的腺病毒采用紫外分光光度计进行滴度测定。并进行自动测序鉴定。结果:线性化的pShuttleCMVhNGFβ转化含pAdEasy1的感受态菌BJ5183,24h后获得了30%阳性重组质粒,经酶切得到一个大于20kb的大片段和一个4.5kb的特征性条带,PCR扩增出731bp片段。pAdeasy1hNGFβ经PacI酶切线性化后,转染Ad293细胞包装成表达hNGFβ的重组腺病毒。260nm处吸光值测病毒滴度为2.24×1012OPU·L-1。重组AdhNGFβ腺病毒质粒经上海基康生物技术有限公司自动测序鉴定为目的基因。结论:应用细菌内同源重组能快速构建AdhNGFβ,为hNGFβ基因在神经病理性痛中的应用奠定了基础。
- 王清秀钟和英王家宁黄永章余开峰周青山马大青姚尚龙
- 关键词：同源重组腺病毒基因
- 细菌体内同源重组构建pAdEasy-1-hNGFβ重组体被引量：8
- 2005年
- 目的采用细菌内同源重组法高效制备含神经生长因子β基因(hNGFβ)的重组腺病毒质粒。方法hNGFβ自载体pBLAST44hNGFβv02中切出,亚克隆至质粒pBluescriptⅡsk(+)中,形成pBluescriptⅡsk(+)hNGFβ,自pBluescriptⅡsk(+)hNGFβ中酶切出hNGFβDNA,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV中,形成转移质粒pShuttleCMVhNGFβ,在感受态大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy1同源重组,得到重组腺病毒载体pAdEasy1hNGFβ。结果线性化的pShuttleCMVhNGFβ转化含pAdEasy1的高效感受态大肠杆菌BJ5183,24h后获得了30%阳性重组质粒克隆,经酶切获得大于20kb的大片段和4.5kb的特征性条带,PCR反应扩增出731bp片段。结论应用细菌内同源重组能快速构建含hNGFβ基因的重组腺病毒载体pAdEasy1hNGFβ,为hNGFβ基因的研究及应用奠定了基础。
- 王清秀钟和英周青山王家宁黄永章余开峰马大青姚尚龙
- 关键词：同源重组腺病毒
- ICU患者感染病原菌的分布与耐药性研究
- 2015年
- 目的探讨ICU感染的病原菌分布及其耐药性,以指导临床合理用药。方法选取2010年5月-2013年10月ICU收治的529例患者,对患者的痰液、尿液、胸腹腔积液等标本进行病原菌培养、鉴定,药敏试验采用K-B琼脂扩散法,采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析。结果共检出病原菌371株,其中革兰阳性菌82株占22.11%,革兰阴性菌232株占62.53%,真菌57株占15.36%;主要革兰阴性菌对常用抗菌药物的耐药率普遍较高,鲍氏不动杆菌对妥布霉素、阿米卡星敏感,耐药率<10.00%,铜绿假单胞菌对妥布霉素、美罗培南敏感,对阿米卡星100.00%敏感,肺炎克雷伯菌对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、美罗培南100.00%敏感;鲍氏不动杆菌对三代头孢的耐药率高达100.00%,对环丙沙星、头孢吡肟的耐药率>90.00%,对美罗培南和亚胺培南的耐药率已>80.00%。结论 ICU病原菌感染主要分布在呼吸道,以革兰阴性菌为主,其中鲍氏不动杆菌的感染率逐年上升,并呈现泛耐药性,临床诊疗中应加强抗菌药物的合理使用和鲍氏不动杆菌的耐药性检测。
- 徐亮黄大伟揭凤英
- 关键词：鲍氏不动杆菌重症监护病房病原学检测
- 大鼠脊髓星形胶质细胞的分离与纯化被引量：3
- 2008年
- 目的:纯化培养和鉴定新生大鼠的脊髓星形胶质细胞,建立稳定的星形胶质细胞培养体系,为研究创伤后慢性神经病理性痛的脊髓机制奠定基础。方法:根据成纤维细胞与星形胶质细胞生长倍增时间的差异,用阿糖胞苷(Ara-C)抑制成纤维细胞生长分裂的方法获取星形胶质细胞,用胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光法对其鉴定。同时与差速贴壁培养法进行对比。结果:用Ara-C处理后,可获得较高纯度的星形胶质细胞,经鉴定其纯度可达90%以上,而对照组几乎全部为成纤维细胞。结论:Ara-C处理能彻底清除成纤维细胞,从而保持星形胶质细胞的正常生长繁殖,达到纯化星形胶质细胞的目的。
- 杨镭镭王清秀彭成为钟和英王家宁李国华
- 关键词：脊髓星形胶质细胞纯化
- 坐骨神经慢性压迫损伤性疼痛与脊髓背角P物质关系研究被引量：3
- 2008年
- 目的观察大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)后脊髓背角P物质表达的变化,探讨P物质在疼痛发生机制中的作用。方法SD雄性大鼠60只,随机分为:A组:CCI组(30只);B组:对照组(30只)。术前及术后3、7、14、28 d分别测定大鼠热痛阈值、机械痛阈值和行为学评分。术后3、7、14、28d每组取4只,麻醉后用4%多聚甲醛灌注固定,取L4-6段脊髓,以备免疫组化,测定SP的变化。结果所有CCI动物从术后第3天起,出现明显的疼痛行为学改变和热痛阈值、机械痛阈值的降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫组织化学结果表明,A组术后术侧明显高于B组(P<0.05或P<0.01);A组术侧明显高于健侧(P<0.05或P<0.01);而B组仅在第4天术侧高于健侧(P<0.05)。结论慢性坐骨神经损伤后,脊髓背角SP的表达增加,而且表达增加与CCI大鼠的痛觉过敏、行为变化在时相上基本一致,说明CCI大鼠痛觉过敏与脊髓背角SP的表达增加有关。
- 张瑞王清秀郭慧琴唐微
- 关键词：神经病理性疼痛脊髓背角P物质
- 鞘内转染重组腺病毒介导人神经生长因子β基因对神经病理性痛大鼠的镇痛作用被引量：1
- 2007年
- 目的评价鞘内转染重组腺病毒介导人神经生长因子β（Ad-hNGFβ）基因对神经病理性痛大鼠的镇痛作用。方法雄性SD大鼠96只,体重200～250 g,随机分为3组（n=32）,假手术组（Ⅰ组）假手术后立即鞘内注射人工脑脊液;Ⅱ组和Ⅲ组制备坐骨神经慢性压迫性损伤（CCI）模型,术后分别立即鞘内注射人工脑脊液或Ad-hNGFβ基因。分别于术前1d（基础值）和转染后4～28 d每4天测定整体行为学评分、机械痛阈和热痛阈;每组分别于转染后4、7、14及28 d各处死8只大鼠,取脊髓组织,每个时点的4个标本用于测定hNGFβ表达（免疫组化方法）,每个时点的另外4个标本用于测定hNGFβ的含量（ELISA法）。结果Ⅲ组脊髓出现hNGFβ表达;Ⅲ组脊髓hNGFβ含量高于Ⅰ组和Ⅱ组（P〈0.01）;与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组行为学评分升高,机械痛阈及热痛阈均降低（P〈0.05或0.01）;与Ⅱ组比较,Ⅲ组行为学评分及机械痛阈差异无统计学意义（P〉0.05）,转染后8～24 d热痛阈升高（P〈0.05）。结论CCI诱导的慢性神经病理性痛大鼠鞘内转染Ad-hNGFβ基因后,可在脊髓组织持续、高效表达,且能减轻热痛觉过敏,但对机械痛觉过敏无影响。
- 王清秀彭成为杨镭镭施静姚尚龙
- 关键词：神经生长因子神经痛
- Ad-hNGFβ转染原代培养的大鼠脊髓星形胶质细胞及其生物活性研究被引量：1
- 2007年
- 目的:体外培养新生SD大鼠脊髓星形胶质细胞,观察携带人β神经生长因子基因的重组腺病毒(Ad-hNGFβ)对其存活及毒性作用,为Ad-hNGFβ在体研究打下基础。方法:分离新生SD大鼠的脊髓星形胶质细胞(Astrocyte,Ast),应用DMEM/F-121∶1培养基进行原代培养扩增鉴定。重组Ad-hNGFβ(MOI=25,50,100)转染Ast后,噻唑蓝(MTT)法检测病毒感染滴度与细胞存活的关系。ELISA方法测定培养3,6,9,12,15d时培养上清中hNGFβ的含量;用流式细胞仪对转染细胞进行倍体分析,观察转染Ad-hNGFβ对细胞周期和凋亡的影响;Western blot印迹法测定转染后表达产物的存在形式。结果:从新生SD大鼠的脊髓组织中成功分离培养出星形胶质细胞,GFAP免疫荧光阳性。经MTT法测定,当MOI=25,50,100时试验组的吸光值OD490与对照组比无显著差异,P>0.05。转染Ad-hNGFβ后试验组细胞培养上清中hNGFβ表达量与对照组同期相比有显著差异,P<0.01;且hNGFβ可持续表达至15d。Ad-hNGFβ转染细胞后所表达的活性产物以hNGFβ二聚体的形式存在。流式细胞仪测得细胞增殖指数与对照组比明显升高,P<0.01。结论:Ad-hNGFβ可有效介导hNGFβ基因转染原代培养的脊髓星形胶质细胞,并且成功表达有活性的hNGFβ,增加细胞活性。
- 王清秀杨镭镭钟和英彭成为王家宁马大青
- 关键词：重组腺病毒星形胶质细胞
