国家自然科学基金(30970231)
- 作品数：13 被引量：138H指数：7
- 相关作者：郎志宏黄大昉朱莉张杰何康来更多>>
- 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所中国农业科学院植物保护研究所东北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 真核生物启动子研究概述被引量：27
- 2014年
- 启动子是调控基因表达的重要基因元件,它的调控作用是多层次多因素共同作用的结果。通过启动子的调控能够控制基因表达的水平、部位及方式。深入研究启动子对于了解生物的生长发育、防御系统、疾病等都有非常重要的意义。本文综述了启动子克隆、生物信息学分析和预测的方法,比较了两种启动子分析方法,介绍了启动子甲基化、多态性和合成启动子的研究进展,以期能够为启动子的研究提供参考。
- 李圣彦郎志宏黄大昉
- 关键词：启动子克隆生物信息学转录因子甲基化多态性
- 转基因作物的生态安全性问题及其对策被引量：6
- 2010年
- 随着转基因作物商业化进程的加快,转基因作物的安全性引起了人们越来越多的关注,主要就转基因作物生态安全性问题以及产生的原因进行综述,并提出我国现阶段应采取的对策。
- 王延锋郎志宏赵奎军黄大昉
- 关键词：转基因作物生态安全基因漂移安全性评价
- 1种适用于转基因玉米PCR检测的DNA快速提取方法被引量：3
- 2014年
- [目的]建立一种快速提取玉米基因组DNA的方法。[方法]对改良CTAB法进行进一步简化,不需要进行沉淀、洗涤、溶解和RNA消化等步骤,建立一种快速提取玉米基因组DNA的方法。[结果]该方法获得的DNA完整性及PCR扩增效果与试剂盒提取方法相比无明显差异;经过对样品ELISA检验可知,该方法得到的DNA用于PCR检测结果准确。[结论]该方法能够满足转基因玉米PCR检测中快速、高效、准确、高通量的要求。
- 戴军汪海朱莉黄大昉郎志宏
- 关键词：转基因玉米基因组DNAPCR检测
- 转Bt cry1Ah/2mG2-epsps双价基因抗虫/耐除草剂玉米研究被引量：7
- 2012年
- 构建了含有Bt杀虫基因cry1Ah和耐草甘膦基因2mG2-epsps的双价植物表达载体pMAGUHM,通过基因枪轰击Q31×Z31杂交组合的胚性愈伤组织,以2mG2-epsps为筛选标记,通过1mmol/L草甘膦异丙胺盐筛选,获得T0代转化植株80株,其中PCR检测有36株为阳性植株,阳性率达45%。对得到的阳性植株的T1、T2代进行了跟踪检测,证明外源基因已整合到玉米基因组中并正确表达。草甘膦及玉米螟抗性检测结果表明,有5个转基因品系表现出具有耐草甘膦和抗虫的双重特性。
- 赫福霞郎志宏张杰陆伟何康来黄大昉
- 关键词：双价基因耐除草剂草甘膦异丙胺盐抗虫BT杀虫基因
- Utilizing modified ubi1 introns to enhance exogenous gene expression in maize(Zea mays L.) and rice(Oryza sativa L.)被引量：1
- 2016年
- supported by the National Natural Science Fund of China （30970231）;the Genetically Modified Organisms Breeding Major Project of China （2014ZX08003001）
- PAN Yang-yangCHEN RuiZHU LiWANG HaiHUANG Da-fangLANG Zhi-hong
- 利用密码子优化提高Bt cry1Ah基因在转基因玉米(Zea mays L.)中的表达被引量：15
- 2011年
- Bt cry1Ah基因是本实验室从苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BT8中克隆的一种新型杀虫蛋白基因。在前期工作中已根据植物密码子偏好性对cry1Ah基因进行过一次优化。根据玉米密码子偏好性对cry1Ah基因进行第二次优化,并将两次优化的cry1Ah基因分别构建了pAhmG和pmAhb植物表达载体,利用农杆菌介导法转化玉米自交系综31,分别得到10株和9株阳性转基因玉米植株。通过ELISA、Westernblot检测及生物活性检测,比较不同优化的基因在玉米中的蛋白表达量及抗虫情况。初步结果表明外源基因在玉米植株中可以稳定表达并可以遗传。二次优化基因比一次优化基因在玉米中的蛋白表达量更高,抗虫性更好。表明密码子优化有利于提高外源基因的表达。
- 李圣彦郎志宏朱莉李秀影张杰何康来黄大昉
- 关键词：密码子优化抗虫玉米
- Ⅱ型内含子介导的基因打靶技术及应用前景
- 2012年
- Ⅱ型内含子除具有核酶的特性之外,还可作为一种可移动的元件特异性地转移到基因组序列中,其转移过程需要内含子RNA和内含子编码蛋白质(IEP)来识别靶标位点,内含子已经作为一种新型的基因打靶工具应用于原核生物的基因插入失活和特定的基因敲除,并在真核生物基因组的功能基因组学和基因治疗中展现了广阔的应用前景。
- 潘阳阳郎志宏朱莉黄大昉
- 关键词：基因打靶
- 转Bt cry1Ah基因抗虫玉米的分子检测及农艺性状分析被引量：11
- 2014年
- 利用农杆菌介导法将具有自主知识产权的Bt cry1Ah基因转入玉米自交系综31中,在获得的1 764株转基因植株中筛选获得1株对玉米螟有显著抗性的转基因植株。对该抗性植株进行了室内和田间抗虫性分析及外源基因表达分析,并研究了其杂交后代的农艺性状。结果表明,该转基因植株对亚洲玉米螟田间抗虫性达到高抗水平;外源基因能够正常高效表达,在玉米抽穗期的叶片中Cry1Ah蛋白表达量最高,达到1μg/g鲜重;株高、穗位高、穗长、穗粗等与非转基因对照植株相比差异不大,秃尖长明显短于对照,千粒重及单株产量明显高于对照,这种差异在人工模拟虫害爆发情况下达到极显著水平。
- 戴军李秀影朱莉汪海张杰何康来郎志宏黄大昉
- 关键词：转基因玉米分子检测抗虫
- 萜类化合物在植物间接防御中的作用被引量：14
- 2010年
- 植物受到虫害后释放萜类化合物吸引害虫天敌的间接防御是一种新颖且环保的抗虫模式。植物受到害虫危害等因素诱导后做出响应,在体内经过一系列复杂调控,释放萜类物质,害虫天敌顺着这些萜类物质找到害虫,通过捕食或寄生于害虫体内的方法来消灭害虫。在实际应用中,可考虑利用直接和间接防御相结合的防治方法。
- 周妮朱莉郎志宏黄大昉
- 关键词：萜类
- 转Bt cry1Ah/cry1Ie双价基因抗虫玉米的研究被引量：13
- 2012年
- 构建了含有人工改造的抗虫基因Bt cry1Ah、cry1Ie和耐除草剂基因2mG2-epsps的植物表达载体pMUHUESGM,利用基因枪法将表达盒片段转化玉米愈伤组织,以2mG2-epsps基因为筛选标记基因,经草甘膦异丙胺盐筛选获得24株T0代再生植株,其中PCR检测阳性植株有20株。T0和T1代植株的分子检测结果证明了外源基因已经整合到玉米基因组中并能够稳定遗传和表达,转基因株系在田间生物活性检测中表现出较好的抗虫性,这为培育抗虫玉米新品种提供了参考,同时本研究中采用了基因枪片段转化法,提高了转基因的生物安全性。
- 杨召军郎志宏张杰宋福平何康来黄大昉
- 关键词：BT转基因玉米
