国家自然科学基金(31000844)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：沈文涛黎小瑛周鹏言普杨国峰更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南师范大学海南大学更多>>
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- 原核表达的PRSV HC-Pro基因同源dsRNA诱导番木瓜抗性的研究被引量：3
- 2013年
- 利用番木瓜环斑病毒(PRSV)HC-Pro基因3′端824bp区段,通过OZ-LIC法构建了含有PDK内含子的发夹RNA编码结构,并选用pSP73和M-Jm109LacY分别作为宿主载体和宿主菌,构建了高效的同源dsRNA原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-H824,经IPTG诱导表达的dsRNA不被DNaseI和RNaseA降解,稳定性较好。采用喷洒dsRNA粗制品的方式对番木瓜植株进行保护性处理和治疗性处理,症状观察及ELISA、Real-time RT-PCR分析结果表明,保护性处理能有效诱发对番木瓜环斑病毒的抗性(发病率低,发病时间晚);治疗性处理(植株已接种PRSV 25d)能在处理初期引起番木瓜环斑病毒积累量发生短暂降低。
- 杨国峰沈文涛言普黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜环斑病毒HC-PRODSRNA原核表达RNA沉默
- Complete genome sequence of an isolate of Papaya leaf distortion mosaic virus from commercialized PRSV-resistant transgenic papaya in China
- SUMMARY Papaya leaf distortion mosaic virus is highly destructive to commercial papaya production. Here,the co...
- Decai TuoWentao ShenPu YanChongqi LiLe GaoXiaoying LiHuaping LiPeng Zhou
- 文献传递
- PRSV-NIb基因同源dsRNA的原核表达及其在番木瓜叶片原生质体瞬时表达体系中诱导RNA沉默的研究
- 2013年
- 为探索利用PRSV-NIb基因同源dsRNA的原核表达产物在体外防治番木瓜环斑病毒的可行性,利用较保守的PRSV-NIb基因3′端的312、501和809 bp区段分别构建了含有PDK内含子的3个发夹RNA编码结构,并选用pSP73和M-Jm109LacY分别作为宿主载体和宿主菌构建了高效的dsRNA原核表达工程菌M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-N312、M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-N501、M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-N809,经IPTG诱导成功表达了dsRNA,并证明dsRNA不被DNase I和RNase A降解,稳定性较好。还利用PRSV-NIb基因构建了GFP瞬时植物融合表达载体pNIb-GFP,对经3种dsRNA和GFP瞬时融合表达载体共转化的番木瓜叶片原生质体的共聚焦显微镜观察及通过半定量RT-PCR对其中mRNA表达量的分析,结果表明融合基因NIb-GFP的表达均发生了不同程度的下调,说明dsRNA在原生质体中引发了针对同源基因的沉默。
- 杨国峰沈文涛言普黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜环斑病毒DSRNA原核表达RNA沉默
