广东省自然科学基金(04105510)
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
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- 利用PCR技术检测阴道毛滴虫体内的人型支原体被引量:4
- 2006年
- 采用人型支原体16SrDNA的特异引物,对从广州市多所医院门诊患者分离到的28株阴道毛滴虫进行PCR检测,结果有12株感染了人型支原体,感染率为42.9%。这显示了阴道毛滴虫和人型支原体之间的共生关系在中国具有普遍性。
- 方顺丽肖建春伦照荣
- 关键词:阴道毛滴虫人型支原体PCR检测
- 阴道毛滴虫半胱氨酸蛋白酶3基因的克隆、表达与免疫原性分析被引量:1
- 2009年
- 目的研究小鼠对阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis)半胱氨酸蛋白酶3(TvCP3)重组蛋白的免疫应答。方法用PCR方法从阴道毛滴虫基因组DNA扩增TvCP3基因编码序列,分别用编码前体酶和成熟酶的基因片段构建重组表达质粒pET28b-TvCP3和pET28b-TvCP3C,转化入大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)后进行诱导表达,通过金属螯合层析法(im-mobilized metal affinity chromatography,IMAC)纯化表达产物重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠。BALB/c小鼠分为TvCP3免疫组、TvCP3C免疫组和对照组3组,每组6只,分别用TvCP3重组蛋白、TvCP3C和PBS免疫小鼠。第1次25μg/只,福氏完全佐剂乳化;第2次25μg/只,福氏不完全佐剂乳化;第3次与第4次12.5μg/只,水剂。前3次免疫间隔2周,第4次间隔1周。末次免疫后1周用ELISA测定血清抗体滴度。采集高滴度小鼠血清制备免疫血清,通过蛋白质印迹(Western blotting)分析抗体所识别的阴道毛滴虫虫体或其分泌物中的特异性抗原组分。结果重组表达质粒pET28b-TvCP3和pET28b-TvCP3C均能在E.coli BL21(DE3)中高效表达,重组蛋白占菌体总蛋白的25%以上;ELISA结果显示,纯化的重组蛋白TvCP3和TvCP3C免疫小鼠4次后血清抗体效价分别达1︰204800和1︰102400;Western blotting分析显示,小鼠免疫血清能特异性识别表达产物中的目的蛋白,以及阴道毛滴虫虫体或分泌物中的特异性抗原组分。结论重组表达质粒pET28b-Tvcp3和pET28b-Tvcp3C可在E.coli BL21(DE3)中高效表达,纯化的表达产物具有良好的免疫原性。
- 贾万忠李志赵亮聂芳芳伦照荣
- 关键词:阴道毛滴虫半胱氨酸蛋白酶3重组抗原酶联免疫吸附试验BALB/C小鼠
- 阴道毛滴虫精氨酸水解途径的特点与意义
- 2006年
- 阴道毛滴虫所具有的精氨酸水解途径在真核生物中是非常罕见的。它对毛滴虫的生长繁殖有着重要的生物学意义,表现在消耗精氨酸获得能量,以及提高毛滴虫在阴道寄生的适应性。本文综述了该水解途径的结构基因组成和代谢特点。随着研究的不断深入,阴道毛滴虫精氨酸水解途径的进化起源及其在医学上的应用价值将受到越来越多的关注。
- 谢礼发肖建春伦照荣
- 关键词:阴道毛滴虫