广西壮族自治区自然科学基金(2010gxnsfa013240)
- 作品数:5 被引量:12H指数:3
- 相关作者:朱小东赵伟曲颂苏芳卢小迪更多>>
- 相关机构:广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 自噬抑制剂磷酸氯喹增加鼻咽癌CNE-2细胞株的放射敏感性被引量:4
- 2012年
- 目的探讨自噬现象在照射致人鼻咽低分化鳞癌(CNE-2)细胞死亡过程中的作用。方法采用Westernblot技术检测CNE-2细胞经射线照射后自噬标志物LC3、P62的变化,透射电镜检测自噬小体;流式细胞术检测CNE.2细胞凋亡率;MTT法检测CNE-2细胞照射后不同时间的存活率;细胞克隆形成实验检测CNE.2细胞的存活能力及放射敏感性。结果透射电镜检测示自噬抑制剂磷酸氯喹(CDP)抑制照射所致自噬体的形成,自噬诱导剂雷帕霉素(RAPA)增加照射致自噬体数量(F=105.15,P〈0.05);CDP抑制射线引起的LC3.I向LC3-Ⅱ的转化,而RAPA促进LC3-I向LC3-II的转化(F=231.68,P〈0.05);CDP使P62表达上调,RAPA使P62表达下调(F=117.52,P〈0.05);CDP+照射组和RAPA+照射组的CNE-2细胞凋亡率明显高于单纯照射组(F=143.72,P〈0.05);CDP、RAPA降低了照射后CNE-2细胞的存活率(F=25.88,P〈0.05);二次线性模型拟合剂量存活曲线示自噬抑制剂CDP、RAPA可增加CNE-2细胞株的放射敏感性(F=167.32,P〈0.05)。结论照射联合自噬抑制剂CDP显著增加了CNE-2细胞株对射线的敏感性,提示自噬抑制剂或可用于鼻咽癌的辅助治疗。
- 周支瑞朱小东赵伟曲颂潘闻燕郭亚苏芳李小宇
- 关键词:自噬鼻咽癌磷酸氯喹雷帕霉素
- 细胞自噬在照射所致CNE-2细胞凋亡过程中的作用被引量:4
- 2012年
- 细胞自噬是真核细胞溶酶体途径蛋白降解的主要形式之一,对其在肿瘤治疗中作用的研究越来越引起人们重视。
- 朱小东潘闻燕赵伟曲颂李龄苏芳周支瑞李小宇
- 关键词:细胞自噬CNE-2细胞凋亡照射细胞溶酶体蛋白降解
- 自噬相关基因ATG5沉默增加鼻咽癌裸鼠移植瘤的放射敏感性被引量:3
- 2015年
- 目的通过构建自噬相关基因ATG5沉默的人鼻咽癌低分化鳞癌细胞(CNE-2细胞)裸鼠移植瘤模型,研究自噬与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法选取24只裸鼠,随机分入对照组、NC组和ATG5组,每组8只。对照组裸鼠接种CNE-2细胞,NC组裸鼠接种转染阴性对照载体的CNE-2细胞,ATG5组裸鼠接种稳定沉默ATG5基因的CNE-2细胞。每组各取4只裸鼠给予10Gy射线照射,观察各组裸鼠移植瘤的生长情况,并应用Western印迹法检测自噬相关蛋白ATG5和LC3Ⅱ的表达。结果自噬相关基因ATG5沉默的人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型构建成功,成瘤率为100%。ATG5组的LC3Ⅱ、ATG5蛋白相对表达量显著低于对照组和NC组(P值均<0.05),ATG5+10Gy组也均显著低于对照+10Gy组和NC+10Gy组(P值均<0.05)。结论自噬相关基因ATG5沉默可以增加鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性,推断自噬与鼻咽癌放射敏感性呈负相关。
- 卢小迪朱小东赵伟曲颂梁霞
- 关键词:自噬鼻咽癌裸鼠
- 自噬活性的降低增加人鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性被引量:3
- 2015年
- 目的 研究自噬与人鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性之间的关系.方法 采用慢病毒介导的RNA干扰技术建立稳定沉默自噬相关基因ATG5的人鼻咽癌CNE-2细胞系,实验分为未转染的CNE-2细胞组(对照组)、转染NC-shRNA的CNE-2细胞组(NC组)及转染ATG5-shRNA的CNE-2细胞组(ATG5组),应用CCK-8法、流式细胞术及克隆形成实验检测细胞增殖、凋亡及放射敏感性的变化.结果 CCK-8实验结果显示,与对照组和NC组相比,各剂量点ATG5组的细胞存活率均显著降低(F =3.755、46.086、8.609、44.160,P<0.05),绘制细胞生存曲线可见下调ATG5的表达后可以增加CNE-2细胞的放射敏感性;流式细胞术结果显示,经6 GyX射线照射后,ATG5组细胞的凋亡率较NC组及对照组明显升高(F =394.876,P<0.05);克隆形成实验结果提示沉默ATG5基因可增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性.结论 降低鼻咽癌CNE-2细胞的自噬活性可以增强其放射敏感性.
- 卢小迪朱小东赵伟曲颂梁霞苏芳
- 关键词:自噬鼻咽癌
- 抑制磷酸腺苷激活的蛋白激酶活性增强人鼻咽癌细胞放射敏感性被引量:3
- 2014年
- 目的研究磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)活化程度对人鼻咽癌(NPC)细胞放射敏感性的影响。方法应用AMPK活化抑制剂Compound C(CC)处理人NPC CNE-2细胞1h后,给予X线照射,48h后Western blot检测总AMPK(tAMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)及自噬标志物MAPlLC3的变化;透射电子显微镜检测自噬小体形成情况。经不同药物干预后的CNE-2细胞给予X线照射48h后四甲基偶氮唑盐(MTT)和流式细胞技术检测两组细胞活力和凋亡变化。结果 CNE-2细胞经CC干预后t-AMPK未发生明显变化(P>0.05),而活化状态的AMPK,即p-AMPK表达显著降低(P<0.01),且自噬标志物MAPlLC3的表达量显著降低(P<0.05),自噬小体数量明显减少(P<0.05);CNE-2细胞经CC干预后进行X线照射可明显抑制其增殖并促进细胞凋亡(P<0.05)。结论 CC可通过抑制细胞自噬来增强放射线对NPC CNE-2细胞增殖抑制和凋亡促进作用,从而增强NPC的放射敏感性。
- 卢小迪朱小东赵伟曲颂梁霞苏芳马慧
- 关键词:抑制剂鼻咽癌自噬