河南省科技攻关计划(102102310027) 作品数:7 被引量:54 H指数:4 相关作者: 黄继红 杜小波 王文 王伟华 李海月 更多>> 相关机构: 河南工业大学 孟州市华兴生物化工有限责任公司 华南农业大学 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 化学工程 农业科学 更多>>
ATP生物发光法快速检测食源性致病菌的研究 被引量:9 2016年 由于微生物在特定的生长阶段ATP含量稳定,因此可通过测定食品内微生物ATP总含量进行活菌计数。通过平板计数法与ATP生物发光法,建立了7种常见食源性致病菌菌落浓度与相应发光强度的数学模型,并通过SAS软件分析了菌种间ATP含量的差异,进而评价生物发光法进行菌落计数的可靠性。结果显示:7种食源性致病菌数学模型的线性相关系数中有6种均大于0.93,P<0.05;肠致病性大肠埃希氏菌为0.861 2,P<0.05,相关性均显著。当发光值相同时不同菌种所含菌落总数无显著差异,当菌落浓度相同时各菌种所含ATP总含量无显著差异。综合试验结果得出:ATP生物发光法可定量检测7种食源性致病菌的数量,而且不同种类致病菌对计数结果影响不显著,这为ATP生物发光在食品质量安全的应用提供了理论支撑。 李海月 黄继红 张新武 杨铭乾 王文 纪小国关键词:ATP生物发光法 食源性致病菌 活菌计数 谷氨酸棒杆菌L-色氨酸营养缺陷型突变及其高产菌株的选育 被引量:2 2015年 目的以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)HX-22为出发菌株,研究了目标发酵产物L-色氨酸合成途径交叉反馈抑制途径代谢突变与色氨酸分解代谢类似物抗性的营养缺陷型突变诱导过程及L-色氨酸高产复合突变菌株的筛选。方法采用硫酸二乙酯、紫外线、钴60γ-射线等诱变方法交叉处理起始与突变菌株,通过营养缺陷表型和自杀代谢底物抗性的筛选方法,定向突变和选育L-色氨酸合成与分解代谢突变的色氨酸高产菌株。结果通过多次连续营养缺陷型诱变选育,筛选出一株具有分支酸-Trp/Phe/Tyr代谢途径L-Phe和L-Tyr合成缺陷型和L-Trp分解代谢自杀代谢底物抗性的L-色氨酸高产菌HX22-118(ΔPhe^--ΔTyr^--5FT^r-4FP^r-SG^r);通过连续传代10次发酵,色氨酸产酸最高达到28.4 g/L,平均27.1g/L,较出发菌株HX22产酸水平提高81.8%。结论选育出的高产菌株具有多重代谢途径突变(ΔPhe^--ΔTyr^--5FT^r-4FP^r-SG^r),突变体具有良好的遗传稳定性,具有后续工业化生产应用潜力。 张新武 侯钢北 杨晓明 廉娜娜关键词:L-色氨酸 营养缺陷型 菌株选育 产酸率 L-色氨酸营养缺陷型高产菌株的发酵工艺研究 被引量:5 2014年 目的以L-色氨酸营养缺陷型高产菌HX22-118为出发菌株,研究探讨L-色氨酸补料分批发酵工艺。方法通过对L-色氨酸补料分批发酵工艺中不同初糖浓度、不同补料方式、碳氮源比例、不同p H值调节方式、添加L-苯丙氨酸、L-酪氨酸对发酵的影响进行了研究。结果通过补料分批发酵工艺能有效地解除了高糖对菌体生长的抑制,促进菌体生长产酸,选择初糖淀粉浓度为90 g/L,保持葡萄糖总浓度160 g/L,在发酵第24 h开始连续流加剩余的糖,并于发酵第12 h和24 h分2次补加各50 mg/L的L-苯丙氨酸、L-酪氨酸,同时用氨水与Na OH控制发酵过程的p H,发酵产酸较分批发酵的33.5 g/L提高49.5%,达到50.1 g/L,缩短了发酵周期,提高了原料利用率。结论形成一套先进的L-色氨酸工业化发酵生产工艺技术,产酸高,生产运行稳定。 张新武 杨晓明 廉娜娜 黄继红关键词:L-色氨酸 营养缺陷型 菌株 补料分批发酵 产酸率 食品中微生物危害的分析和控制 被引量:19 2014年 目前,食源性疾病的发生和食品产品微生物指标不合格已经成为日益关注的食品问题。本文主要针对食品中有害微生物的来源、分类、危害度、生长因子进行分析,介绍了微生物危害识别和暴露识别,食品微生物危害分析的原则和要素;探讨了有害微生物的预防和控制方法,阐述了栅栏技术和Hazard Analysis Critical Control Points(HACCP)系统在食品微生物控制上的运用,以期对保障食品质量起到促进作用。 张新武 杜小波 徐素玲 黄继红关键词:食品微生物 危害分析 青霉素对枯草芽孢杆菌破壁效果研究 2011年 [目的]研究枯草芽孢杆菌生长期添加青霉素时的破壁效果。[方法]为使细菌释放出细胞内的有效活性物质,采用青霉素干扰微生物细胞壁形成的方法,研究不同的青霉素添加量对细胞的破壁效果。[结果]通过检测破壁前后菌体光密度变化值得出,在枯草芽孢杆菌的生长期,青霉素添加量对菌体光密度的变化有明显影响,青霉素添加量为25 mg/kg,作用时间4 h,温度30℃时,光密度变化值(ΔOD)最高,达0.695,说明此时破壁效果最佳。[结论]青霉素对细胞具有一定的破壁效果,推测根据需要可以适量添加青霉素,使细菌释放出细胞内的物质。 周靖波 周娅 黄宗泳 姚正辉 张新武 黄继红关键词:枯草芽孢杆菌 青霉素 一株凝结芽孢杆菌菌粉制备工艺的优化 被引量:2 2014年 采用响应面试验优化了凝结芽孢杆菌NJ39生长和产芽孢的发酵条件,得到芽孢生成与发酵温度、pH值、接种量和发酵时间的关系方程,求解二次多项回归方程确定了发酵温度34℃、接种量13.5%(种子液菌体密度104 cfu/ml)、pH7.1和发酵时间58h为产芽孢的最优条件,芽孢数大于2×108cfu/ml。探讨了载体不同添加量的芽孢菌泥含水量随时间变化的关系,得到在载体加量为1倍、冷阱温度-45℃和真空度20Pa的条件下,冷冻干燥10h,菌粉含水量在5%以下,芽孢数量达到1010cfu/g。 苏雪锋 杜小波 黄继红 杨铭乾 典姣姣 王文 董贞关键词:凝结芽孢杆菌 菌粉 冷冻干燥 食源性微生物快速检测研究进展 被引量:17 2010年 食源性微生物是影响食品安全的主要因素之一,本文回顾了食源性微生物引起的食源性疾病及对人类的危害;介绍了国内外7种食源性微生物快速检测技术的研究现状,指出常规的微生物专用酶快速反应检测技术、分析化学技术、载体技术、代谢学技术、免疫分析检测技术、分子生物检测技术以及其它新生物学技术检测方法,的灵敏度和专一性有一定提高,但操作繁琐;现在发展的分子生物学方法为食品中快速、灵敏的病毒检测带来了更多的希望,各种快速检测方法还只是实践中的一个参考。其今后的发展方向主要是:克服现有分子生物学方法的缺点,最好能定量测定微生物细胞特征活性能,简化程序,提高效率。 王伟华 张新武 周靖波 黄继红关键词:食品安全