国家自然科学基金(81170924)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
- 相关作者：吴皓李磊朱亚忠柴永川杨涛更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部卫生公益性行业科研专项上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内耳注射药物建立新生鼠耳聋动物模型被引量：2
- 2013年
- 目的通过纳升级微量注射泵内耳注射给药的实验方法,建立新生鼠耳聋动物模型。方法 42只出生第二天新生鼠,分别以注射速度分组:单纯穿刺组(对照组,6只,仅穿刺耳蜗底回侧壁,不注射液体)、蒸馏水1组(H2O 20组,4只,20nl/min)、蒸馏水2组(H2O 60组,3只,60nl/min)及药物浓度分组(新霉素各组给药速度为60nl/min):新霉素1组(Neo1组,4只,1μmol/ml)、新霉素2组(Neo10组,4只,10μmol/ml)、新霉素3组Neo 50组,5只,50μmol/ml)、新霉素4组(Neo 100组,8只,100μmol/ml)及新霉素5组(Neo 50 1组,8只,50μmol/ml)。各组均采用耳蜗底回微创打孔技术,利用纳升级微量注射泵按上述各组用药、剂量及给药速度进行内耳药物注射。术后1天(Neo 50 1组)及3天(其余各组)采用基底膜免疫荧光染色观察内耳毛细胞及支持细胞的形态改变。结果术后新生鼠存活好,伤口恢复优良。耳蜗毛细胞机械性损伤与注射速度呈正相关,术后3天,H2O 20组和H2O 60组注射区域内、外毛细胞略减少,差异无统计学意义(P>0.05)。毛细胞损伤与新霉素浓度呈正相关,与对照组比较,术后3天Neo1组的外毛细胞数量及Neo10、50、100组内、外毛细胞数量均明显减少(P<0.05)。与H2O 60组比较,术后3天Neo50及Neo100组内、外毛细胞数量均明显减少(P<0.05)。新霉素50μmol/ml注射后1天(Neo 50 1组)与3天(Neo 50组)内、外毛细胞数量差异无统计学意义(P>0.05)。新霉素50μmol/ml注射后3天免疫荧光染色示支持细胞形态良好。结论利用纳升级微量注射泵给药方式注射50μmol/ml新霉素200纳升至内耳,可建立新生鼠耳聋动物模型,具有毛细胞死亡率高,致聋效果显著的优点;而支持细胞保留较好,且动物存活率高。
- 胡凌翔吴皓石复辛
- 关键词：新霉素
- 芯片检测结合测序技术在遗传性耳聋产前基因筛查与诊断中的应用被引量：14
- 2012年
- 目的探讨遗传性耳聋基因检测芯片在中国孕妇人群常见遗传性耳聋基因突变位点检测中的作用，并评估其在遗传性耳聋产前诊断中的应用。方法对3056例孕妇采集外周血并抽提DNA，采用遗传性耳聋基因芯片检测GJB2、SLC26A4、线粒体12SrRNA、CJB3等4个中国人群常见遗传性耳聋基因共9个突变热点。根据检测结果对有耳聋生育风险的夫妇提供遗传咨询与生育指导。结果3056例孕妇中，共检测到156例携带至少一种基因突变，占总抽查人数的5．11％。其中7例为线粒体12SrRNA突变，预测后代亦为此突变携带者，需终生避免使用氨基糖苷类抗生素。149例为另外三种隐性耳聋基因突变，对其中的124例生育配偶进行了相关基因的全序列测序分析，共有20对夫妇具有遗传性耳聋生育风险。5对夫妇要求进行耳聋产前诊断，4例产前诊断结果均为相应致病基因单杂合突变或野生型，出生后听力随访均未发现异常；1例为P．V37I／c．235delC复合杂合突变，有产生轻、中度耳聋的风险。结论利用遗传性耳聋基因芯片进行临床耳聋基因突变产前筛查具有高度可靠性和可操作性，结合产前诊断技术能有效预防先天性耳聋患儿的出生。
- 孙莲花李磊王晓雯朱亚忠柴永川李晓华吴皓杨涛
- 关键词：遗传筛查寡核苷酸序列分析
