国家自然科学基金(30871701)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：王西平肖欢侯鸿敏李慧娥王倩更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 中国野生毛葡萄钙调蛋白基因克隆及序列分析(英文)被引量：4
- 2010年
- 于葡萄黑痘病发病盛期,用病叶压片法对高抗黑痘病的中国野生毛葡萄商-24接种黑痘病病原菌,采用mRNA差异显示技术进行抗黑痘病基因表达差异的研究.结果显示：（1）获得了T11GG/B0304-400、T11CC/S428-350、T11GG/S424-700、T11AG/S432-350、T11GG/S433-250、T11GG/S433-300、T11AG/S432-300、T11GG/S438-353和T11AG/S424-300等9个基因表达差异cDNA片段.其中T11GG/S438-353 mRNA片段表达在接种后3 d被诱导显著降低,并在之后2 d几乎检测不到.（2）采用RACE技术克隆了T11GG/S438-353 mRNA片段的cDNA全长序列;序列分析表明,该cDNA包含一个607 bp完整的开放阅读框架,编码149个氨基酸;其编码氨基酸序列与拟南芥、欧洲葡萄、柳杉、党参、无梗花栎、欧洲栗及寄生草钙调蛋白的一致性分别为99%、97%、94%、91%、90%、88%和77%.（3）本实验克隆到了负向调控中国野生毛葡萄抗黑痘病的钙调蛋白基因,并命名为VqCaM,其GenBank登录号为EU694099;实时荧光定量PCR结果再次验证VqCaM表达受葡萄黑痘病侵染下调,
- 李慧娥王西平王跃进杨亚州王倩
- 关键词：黑痘病毛葡萄MRNA差异显示钙调蛋白
- 中国野生葡萄病原菌诱导响应VqSAP基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2012年
- 【目的】为了验证SAP基因在葡萄抗病防御机制中的作用，【方法】在前期通过抑制消减杂交技术（SSH）获得中国野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相关蛋白（SAP）基因EST序列的基础上，采用RT—PCR从毛葡萄‘商-24’中分离到SAP基因cDNA序列，并通过实时定量PCR和半定量PCR分析了SAP基因的表达特异性。【结果】序列分析表明该基因具有完整的的开放阅读框，序列长度为819bp，编码272个氨基酸残基，相对分子质量为30．56ku，等电点为8．78，将其命名为VqSAP。多重比较结果显示VqSAP基因与油棕、玉米、萱草、拟南芥、水稻等植物SAP基因的同源性为65％～74％。实时定量结果表明，在白粉菌诱导初期，抗病的毛葡萄株系‘商-24’和感病的华东葡萄株系‘湖南-1’VqSAP基因表达量均升高，这可能是因为它参与了病原菌诱导的细胞程序性死亡过程。水杨酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、乙烯（Eth）处理表明衰老相关蛋白基因表达受激素分子调节，但在抗病和感病株系中基因的表达量有所差异。在嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同葡萄组织中的表达表明VqSAP基因的表达具有空间差异性。【结论】这些结果暗示着VqSAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控，很有可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。
- 牛姣张玉成郭荣荣王西平
- 关键词：毛葡萄克隆
- 葡萄属植物种质资源遗传多样性的RAPD分析被引量：10
- 2010年
- 以起源于中国的野葡萄12个种23个株系、欧美杂种6个品种、河岸葡萄3份、15个欧洲葡萄品种共47份材料为试材,采用RAPD技术对葡萄属植物种质资源遗传多样性进行研究。从520个随机引物中获得16个多态性好的引物用于RAPD分析,共获得DNA条带258个,其中多态性条带186个,DNA条带大小介于100~3 500 bp之间。应用STATISTICA获得了47份葡萄材料树谱图,供试材料可分为6类。欧洲葡萄、欧美葡萄杂种、河岸葡萄与中国野葡萄亲缘关系较远。在中国野葡萄中,山葡萄与其他种亲缘关系较远,刺葡萄次之。
- 侯鸿敏李慧娥肖欢王西平
- 关键词：葡萄RAPD种质资源
- 陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌的分离与鉴定被引量：6
- 2010年
- 采用常规组织法对陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌进行分离、纯化,共获得病原菌菌株24个,并对菌株YL018进行形态学鉴定、致病性测定及病原菌DNA同源性分析。利用ITS区域通用引物ITS1-F/ITS4进行病原菌DNA PCR扩增,将获得的病原菌rDNA-ITS区域的DNA序列进行Blast比较分析。结果发现,菌株YL018与GenBank登录号分别为AY826763、AY826762和AY826764的Elsinoe ampelina位于一个分支上。从而证明分离到了陕西杨陵葡萄黑痘病病原菌。也为进一步研究在病原菌侵染葡萄过程中,植物防御系统中酶类物质的变化及作用做好了前期基础。
- 肖欢朱明旗侯鸿敏赵素平王西平
- 关键词：葡萄黑痘病
- 华东葡萄抗白粉病基因差异表达cDNA克隆与序列分析被引量：2
- 2011年
- 为筛选和克隆华东葡萄抗白粉病相关基因,以高抗葡萄白粉病的华东葡萄株系白河-35-1为材料,采用mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术进行在白粉病病原菌诱导下抗白粉病差异表达基因的研究,筛选出适宜DDRT-PCR的引物组合184对,获得抗白粉病差异表达的cDNA片段13个,序列分析结果显示其功能分别涉及转录调控、能量代谢、蛋白合成、防御反应等生理生化过程,表明华东葡萄白河-35-1抗白粉病是诸多代谢途径相互协调作用的结果。这些差异片段的获得为探明葡萄抗白粉病分子机制提供了前期理论基础。
- 王西平王倩王跃进
- 关键词：华东葡萄抗白粉病MRNA差异显示
