国家质检总局科技计划项目(2011IK225)
- 作品数:4 被引量:12H指数:2
- 相关作者:雷质文倪鑫姜英辉梁成珠王志聪更多>>
- 相关机构:山东出入境检验检疫局中国海洋大学青岛科技大学更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 志贺氏菌基于核酸序列恒温扩增检测方法研究被引量:1
- 2012年
- 使用自行建立和优化的基于核酸序列恒温扩增(Nucleic Acid Sequence-based Amplification,NASBA)检测体系,对志贺氏菌(Shigella spp.)进行检测。采用志贺氏菌的ipaH基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测志贺氏菌的NASBA检测法,并进行特异性和灵敏度试验。结果表明:该检测方法具有较高的灵敏度和可靠的特异性,灵敏度为6.3×102cfu/mL,高于普通PCR方法。
- 李宏姜英辉张健赵丽青雷质文梁成珠
- 关键词:志贺氏菌
- 霍乱弧菌SDA-琼脂糖凝胶电泳检测技术研究被引量:3
- 2011年
- 选取霍乱弧菌ompW基因片段,设计链置换扩增(strand displacement amplification)特异性引物,建立霍乱弧菌SDA快速检测方法,同时对设计的引物的灵敏度、特异性进行研究,结果发现所建立的SDA检测技术对霍乱弧菌的检测灵敏度达到7.0×102cfu/mL,特异性检测发现,SDA技术可以特意性地扩增霍乱弧菌。
- 梁炜尼秀媚雷质文魏晓棠张京宣姜英辉吴兴海宋涛
- 关键词:霍乱弧菌SDA
- O1型霍乱弧菌Fosmid文库的构建及分析
- 2013年
- 为构建O1型霍乱弧菌Fosmid文库并对文库进行分析,采用低熔点琼脂糖包埋法提取O1群霍乱弧菌N16961完整基因组,用随机剪切法将基因组进行片段化处理,脉冲电泳分离片段化DNA并切胶回收33~48kb之间的DNA片段,然后对DNA片段进行末端平滑化和磷酸化处理,与pCC1FOS载体连接,经包装、转染后构建霍乱弧菌Fosmid文库。平均插入片段为37kb,共保存9 600个克隆,空载率小于2%。本文库符合文库的构建要求,文库的建立为O1霍乱弧菌重要基因及其功能的研究奠定了基础。
- 倪鑫麻丽丹雷质文梁成珠王殿夫吕秀芳
- 关键词:霍乱弧菌基因组FOSMID文库
- 依赖于核酸序列恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌方法的建立被引量:9
- 2011年
- 为建立副溶血性弧菌的快速检测方法,本研究采用依赖于核酸序列恒温扩增(NASBA)技术,以副溶血性弧菌的tlh基因为扩增的靶基因设计特异性引物和探针,建立可快速扩增副溶血性弧菌的NASBA方法。特异性和灵敏度试验结果表明:该NASBA方法对副溶血性弧菌的最小检出量为5.1×102 cfu/mL,高于普通PCR方法,而且与其他种属的菌无任何交叉反应。此外,本研究将副溶血弧菌扩增产物采用通用型核酸扩增物快速检测板进行检测,实现了特异性强的快速副溶血弧菌的检测。该方法对仪器要求低,具有良好的应用前景。
- 倪鑫王志聪雷质文梁成珠汪东风姜英辉王建广祝素贞
- 关键词:副溶血性弧菌