国家自然科学基金(30740044)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 相关作者：刘兴奎段忠心喻田王英谢平更多>>
- 相关机构：遵义医学院南华大学青岛市市立医院更多>>
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- 二氮嗪后处理对离体大鼠心功能及线粒体心磷脂的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:建立离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,观察二氮嗪(diazoxide,D)后处理对缺血/再灌注损伤离体大鼠心功能及线粒体心磷脂的影响,并探讨ATP敏感性钾通道在二氮嗪后处理心肌保护中的作用。方法:采用Langendorff装置建立离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,将SD大鼠随机分为对照组(control)、缺血再灌注模型组(I/R)、二氮嗪后处理组(I/R+D)、5-羟葵酸拮抗二氮嗪后处理组(I/R+5-HD+D),每组8只,均先灌注平衡20 min。Control组:灌注平衡后续灌70 min;I/R组:缺血前灌注4℃ST.Thomas停跳液,全心缺血40 min,再灌30 min;I/R+D组:全心缺血40 min,缺血后给予含二氮嗪(50μmol/L)的K-H液灌注5 min后,再灌25 min;I/R+5-HD+D组:二氮嗪后处理前给予含5-羟葵酸(100μmol/L)的K-H液灌注5 min,再灌20 min。观察各组续(再)灌注末心率、冠脉流出液量、心功能、心肌酶学及心肌线粒体心磷脂的变化。结果:各组续(再)灌注末比较,I/R组较control组及I/R+D组心率减慢、冠脉流出液量降低,心功能明显受损,心肌酶增加,心磷酯含量减少,但与I/R+5-HD+D无明显差异。结论:二氮嗪后处理通过增加线粒体心磷脂含量,减少心肌酶的释放,改善心脏功能,减轻心肌的再灌注损伤,产生心肌保护作用。5-羟葵酸能够完全阻断二氮嗪的心肌保护作用。
- 段忠心刘兴奎喻田
- 关键词：心磷脂二氮嗪
- 缺血后处理对离体大鼠心肌线粒体功能的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:建立离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,观察缺血后处理对大鼠心肌线粒体功能的影响,并探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP)在缺血后处理心肌保护中的作用。方法:采用Langendorff装置建立离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型。将SD大鼠随机分为对照组(C)、模型组(M)、缺血后处理组(IPO)、5-羟癸酸拮抗缺血后处理组(5-HD+IPO),每组8只。各组均先灌注平衡20 min,C组:续灌70 min;M组:缺血前灌注4℃St.Thomas停跳液(10 mL/kg),全心缺血40 min,复灌30 min;IPO组:全心缺血40 min,复灌前先开放10 s,缺血10 s,反复6次,时间为2 min,复灌28 min;5-HD+IPO组:缺血后处理前给予含5-羟癸酸(100μmol/L)的K-H液灌注5 min,余同IPO组,复灌23 min。观察各组平衡末与再灌注末心肌线粒体膜电位、氧自由基及呼吸功能的变化。结果:(1)各组再灌注末心肌线粒体膜电位较平衡末显著降低,而C组显著高于其它3组,IPO组明显高于5-HD+IPO与M组,5-HD+IPO组高于M组。(2)各组再灌注末与平衡末比较,心肌线粒体氧自由基含量显著升高,其中M组显著高于其它3组,5-HD+IPO组高于IPO及C组,IPO组高于C组。(3)各组再灌注末较平衡末线粒体呼吸功能明显受损,且C组优于其它3组,IPO组优于5-HD+IPO与M组,5-HD+IPO组优于M组。结论:(1)缺血后处理通过维护线粒体膜电位稳定、减少线粒体氧自由基的产生、保护线粒体呼吸链及功能,减轻心肌的再灌注损伤。(2)5-HD不能完全阻断缺血后处理的心肌保护作用。(3)缺血后处理的心肌保护效应可通过激活心肌mitoKATP实现,同时还有其它因素参与了缺血后处理的心肌保护。
- 刘兴奎段忠心喻田
- 关键词：线粒体功能缺血后处理再灌注损伤心肌
- 缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体心磷脂合成的影响：离体实验被引量：2
- 2015年
- 目的 评价缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体心磷脂合成的影响.方法 雄性SD大鼠,16～20周龄,体重250～ 350 g,建立Langendorff离体心脏灌注模型.取离体心脏64个,采用随机数字表法,将其分为4组（n=16）：正常对照组（C组）、缺血再灌注组（Ⅰ/R组）、缺血后处理组（IPO组）和5-羟葵酸＋缺血后处理组（5-HD＋IPO组）.平衡灌注20 min时,C组继续灌注K-H液70 min;Ⅰ/R组灌注4℃ST.Thomas停跳液10 ml/kg,常温下缺血40 min,再灌注37℃含氧的K-H液30min;IPO组于缺血40 min时先恢复灌注10s,缺血10s,反复6次,继之灌注37℃含氧的K-H液28min;5-HD＋IPO组于缺血40 min时灌注含100 μmol/L 5-羟葵酸（线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂）的K-H液5 min,余同IPO组.分别于平衡灌注20 min（T1）和再灌注30 min（T2）时,记录HR、左室发展压（LVDP）、左室舒张末压（LVEDP）和冠脉流量（CF）,收集冠脉流出液2 ml,测定乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）的活性,然后提取线粒体,测定心磷脂含量.结果 与C组比较,其余3组T2时HR、LVDP和CF降低,LVEDP升高,冠脉流出液LDH和CK的活性升高,线粒体心磷脂合成降低（P＜0.05）;与Ⅰ/R组比较,IPO组T2时HR、LVDP和CF升高,LVEDP降低,冠脉流出液LDH和CK的活性降低,线粒体心磷脂含量升高（P＜0.05）;与IPO组比较,5-HD＋IPO组T2时HR、LVDP和CF降低,LVEDP升高,冠脉流出液LDH和CK的活性升高,线粒体心磷脂含量降低（P＜0.05）.结论 缺血后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与其开放线粒体ATP敏感性钾通道,增加线粒体心磷脂合成有关.
- 段忠心刘兴奎喻田
- 关键词：心肌再灌注损伤线粒体缺血后处理
- 二氮嗪后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 评价二氮嗪后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠,体重250～300 g,成功建立Langendorff再灌注模型的64个心脏随机分为4组（n=16）：正常对照组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、二氮嗪后处理组（D组）和线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂5-羟葵酸＋二氮嗪后处理组（5-HD＋D组）.采用K-H液平衡灌注20 min时,C组继续灌注K-H液70 min;I/R组、D组和5-HD＋D组进行心肌缺血40 min,I/R组缺血前灌注4 ℃ ST.Thomas停跳液10 ml/kg;D组再灌注5 min时灌注含50μmol/L二氮嗪的K-H液5 min,然后再灌注20 min;5-HD＋D组灌注二氮嗪前灌注含100 μmol/L 5-羟葵酸的K-H液5 min,再灌注20 min.分别于平衡灌注末与再灌注末时取8个心脏,记录心功能指标,然后提取线粒体,测定心肌细胞线粒体膜电位（MMP）、氧自由基（ROS）生成量和呼吸功能指标.结果 各组平衡灌注末时各指标差异无统计学意义（P＞0.05）.与C组比较,再灌注末时其余3组心功能和线粒体呼吸功能减退,MMP降低,ROS生成量增加（P＜0.05或0.01）;与I/R组和5-HD＋D组比较,D组心功能和线粒体呼吸功能改善,MMP升高,ROS水平降低（P＜0.01）.结论二氮嗪后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与开放线粒体ATP敏感性钾通道而改善线粒体功能有关.
- 段忠心刘兴奎喻田
- 关键词：二氮嗪心肌再灌注损伤后处理
- RISK途径在二氮嗪后处理离体大鼠心肌中的保护作用
- 2014年
- 目的探讨特异性线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪(DZ)后处理能否激活再灌注损伤挽救激酶(RISK)信号通路减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤(IRI)。方法采用Langendorff装置建立大鼠离体心肌缺血/再灌注模型,将SD大鼠随机分为正常组(NOR)、对照组(CON)、二氮嗪后处理组(DZ)、LY拮抗二氮嗪组(DZ+LY),每组8例。对比观察:1平衡末、再灌注末各组不同时点心功能的变化;2再灌注末取心肌组织并分离、提取蛋白,用Western blot分析蛋白激酶B(PKB/Akt),P70S6激酶(P70S6K),内皮型一氧化氮合酶(eNOS),细胞外调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平的表达。结果 1心功能指标的变化:DZ组再灌注末心率(HR)、冠脉流量(CF)、左心室发展压(LVDP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左心室内压下降最大速率(-dp/dtmax)优于CON组、DZ+LY组(P<0.01),但差于NOR组(P<0.01);平衡末心脏功能指标差异无统计学意义(P>0.05)。2再灌注末DZ组Akt、P70S6K、eNOS磷酸化水平的表达明显高于NOR组、CON组、DZ+LY组(P<0.01),各组ERK1/2磷酸化水平的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论二氮嗪后处理能够通过激活RISK信号通路减轻离体大鼠心脏IRI。
- 王英谢平张琳刘兴奎喻田
- 关键词：二氮嗪后处理RISK心肌保护线粒体ATP敏感性钾通道
- PI3K/Akt/GSK-3β信号通路在二氮嗪后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用：离体实验被引量：6
- 2014年
- 目的 评价磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β（PI3K/Akt/GSK-3β）信号通路在二氮嗪后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 取清洁级SD成年大鼠,制备离体灌注心脏30个,采用随机数字表法分为5组（n=6）：正常对照组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、二氮嗪后处理组（DZ组）、PI3K抑制剂LY294002组（LY组）和二氮嗪后处理＋LY294002组（DZ＋ LY组）.C组采用K-H液平衡灌注70 min;I/R组灌注4℃ST-Thomas停跳液10 ml/kg,继之停止灌注泵造成全心缺血,40 min后再次灌注K-H液30 min;DZ组于再灌注开始即刻经主动脉逆行灌注50 μmol/L二氮嗪5 min; LY组于再灌注开始即刻经主动逆行脉灌注15μmol/L LY294002 5 min;DZ＋ LY组于再灌注开始即刻经主动脉逆行灌注15 μmol/L LY294002 5 min,随后逆行灌注50 μmol/L二氮嗪5 min.于平衡灌注20 min时（T1）和再灌注30 min时（T2）记录HR、冠状动脉流量（CF）、左心室发展压（LVDP）、左室舒张末压（LVEDP）和压力瞬时最大变化率（±dp/dtmax）.采用Western blot法测定心肌组织总Akt（t-Akt）和总GSK-3β（t-GSK-3β）表达水平及其磷酸化水平.结果 与C组比较,其余4组T2时HR、LVDP和±dp/dtmax降低,LVEDP升高,I/R组、LY组和DZ＋ LY组CF降低,DZ组心肌组织Akt和GSK-3β磷酸化水平升高（P＜0.01）;与I/R组比较,DZ组T2时HR、CF、LVDP和±dp/dtmax升高,LVEDP降低,心肌组织Akt和GSK-3β磷酸化水平升高（P＜0.01）,LY组和DZ＋ LY组心肌组织Akt和GSK-3β磷酸化水平差异无统计学意义（P＞0.05）;与DZ组比较,LY组和DZ＋ LY组HR、CF、LVDP和±dp/dtmax降低,LVEDP升高,心肌组织Akt和GSK-3β磷酸化水平降低（P＜0.01）.结论 PI3K/Akt/GSK-3β信号通路参与了二氮嗪后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.
- 王英谢平张琳刘兴奎喻田
- 关键词：二氮嗪1-磷脂酰肌醇3-激酶蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶糖原合成酶激酶3
