重庆市自然科学基金(CSTC-2005881154)
- 作品数：5 被引量：74H指数：4
- 相关作者：李名扬祝钦泷眭顺照刘光德李艳冬更多>>
- 相关机构：西南大学华南农业大学云南省德宏热带农业科学研究所更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1)的克隆及序列分析被引量：16
- 2009年
- 【目的】克隆金荞麦二氢黄酮醇4-还原酶基因(FdDFR1),分析其序列特征。【方法】利用同源克隆的原理,采用RACE结合cDNA文库筛选的方法,从金荞麦cDNA文库中克隆DFR基因(FdDFR1);对其序列进行生物信息学分析和Southern杂交检测。【结果】克隆到一个DFR蛋白基因(FdDFR1),通过Southern杂交分析,推测在金荞麦基因组中DFR基因是1～2个基因的小家族,FdDFR1是单拷贝基因;FdDFR1基因编码一个长341个氨基酸的蛋白质,在N端存在一个NADP结合位点"VTGASGFVGSWLVMRLLEHGY",还存在一个底物结合特异性决定的氨基酸基序"TVNVEEKQKPVYDETCWSDVDFCRRV"。【结论】首次从金荞麦中克隆到类黄酮代谢的中期关键酶基因(FdDFR1),它具有DFR同源基因的典型特征。
- 刘光德雷兴华祝钦泷钟光驰郭铁英李艳冬眭顺照李名扬
- 关键词：金荞麦克隆类黄酮
- 金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1的克隆及分子特征分析被引量：6
- 2009年
- 目的：对金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1进行克隆和序列特征分析。方法：采用RACE结合cDNA文库筛选的方法，从金荞麦cDNA文库中克隆MYBP1基因（FdMYBP1）；生物信息学分析，Southern杂交。结果：克隆到1个MYBP1转录因子基因（FdMYBP1），通过Southern杂交分析，推测FdMYBP1基因是1～2个拷贝基因；FdMYBP1基因编码1个长256个氨基酸的蛋白质， 在N端存在1个保守结构域，属于MYB转录因子家族。结论：首次从金荞麦中克隆到转录因子基因FdMYBP1，它具有MYB同源基因的典型特征，可能在金荞麦类黄酮代谢途径中起作用。
- 马婧祝钦泷郭铁英刘光德眭顺照李名扬
- 关键词：金荞麦MYB转录因子类黄酮
- R1601转化金荞麦影响因素的研究被引量：3
- 2008年
- 就发根农杆菌R1601转化金荞麦过程中感染时间和感染浓度（OD600值）的组合、不同外植体、第二次活化时所用YEB的pH值及乙酰丁香酮的添加方式对转化效率的影响进行了探讨,结果表明：白色疏松愈伤组织在OD6000.2-0.4、pH5.4-5.8的工程菌液中浸泡5-7 min,在1/2MS＋AS（100μmol/L）培养基上共培养2-4 d,感染率可高达80%.
- 潘灿飞李名扬睢顺照
- 关键词：金荞麦发状根发根农杆菌
- 资源植物野生金荞麦的研究进展被引量：48
- 2006年
- 中国地大物博,有30000多种高等植物,居北半球之首,其中资源植物十分丰富,也是天然药物主产国之一。自20世纪70年代以来,中国的资源植物研究尤其是药用植物的研究发展迅猛,近20年来,从天然产物中开发各种新药成为世界科学家研究的热点。中国是世界荞麦的起源中心,也是遗传多样性中心。野生金荞麦(Fagopyrumdibotrys)系蓼科荞麦属多年生草本植物,原产于中国西南,分布于陕西、江苏、浙江、江西、河南、湖北、湖南、广西、广东、四川、重庆及云南等省区,是一种营养丰富并具有重要药用价值的资源植物。野生金荞麦中蕴涵着丰富的优异基因,作为中国重要的传统中药材,金荞麦的块根活性提取物(植物次生代谢产物)具有显著的抗癌,抑制肿瘤细胞肺侵袭和转移,以及消炎抗菌等重要作用,是多种有效药物的主要成分之一。除此之外,由于其籽粒蛋白质的组分全,必需氨基酸含量高,富含维生素和微量元素,使其成为一种较理想的保健食品的选用成分。目前,由于人工栽培产量的限制,加之栽培品种在营养价值上、药用有效活性成分和效价上均低于野生品种,这就造成了对野生金荞麦资源的大量需求,从而对野生资源造成了极大的破坏。鉴于此,中国现已将其列为国家二级保护植物。国内外已经展开了资源收集、多样性、生理特性、育种、药效学以及生态环境等方面的研究,基于活性成分合成的功能基因的研究,国内外还未见报道,为了进一步开发野生金荞麦的利用价值,发掘其优异的功能基因,并保护其野生基因资源,综述了野生金荞麦在本草、原植物分类及分布、多样性、核形、化学及功能成分、药理药效、生态环境、栽培及组织培养方面研究的新进展,并从基础研究、组织培养、基因工程、抗癌机理研究、育种研究、保健品开发等方面作了展望。
- 刘光德李名扬祝钦泷李艳冬眭顺照
- 关键词：资源植物
- 资源植物金荞麦高类黄酮含量愈伤系的获得及其cDNA文库的构建被引量：8
- 2006年
- 用野生金荞麦无菌苗的茎和叶片作外植体,茎在MS添加2.0mg.L-16-BA和0.1mg.L-1NAA的固体培养基上,通过12d的诱导,可获得100%的诱导率;叶在MS添加1.0mg.L-16-BA和0.5mg.L-1NAA的固体培养基上诱导13d,可获得100%的诱导率。茎和叶分别在各自激素组合培养基上连续继代3次后,用目视法直接从大量的稳定愈伤组织中筛选获得4种不同次生代谢能力的细胞系:红色系(Stem1愈伤系)、褐色系(Stem2愈伤系)、浅黄色系(Leaf1愈伤系)和白色系(Leaf2愈伤系)。用分光光度法直接筛选出高类黄酮含量的红色系,其类黄酮含量为6.3804mg.g-1,是含量最低的白色系的3.5倍。用改良的CTAB法提取金荞麦高黄酮含量的红色系1～13d愈伤组织总RNA,用SMARTcDNALibraryConstructionKit构建cDNA文库。经测定原始文库滴度为1.5×106pfu.mL-1,扩增总文库滴度为7.0×109pfu.mL-1,重组率达到98%,插入片段在0.5kb到2kb之间,1kb以上的占66%。通过简并扩增的方式,从总文库中检测到了低峰度表达的R2R3Myb转录调控因子P基因的特异片段。各项指标都表明,已获得较高质量的cDNA文库。金荞麦高类黄酮含量愈伤系的获得及其cDNA文库的构建,不但为野生金荞麦的优异基因资源的保存和其类黄酮次生代谢相关基因的克隆和调控研究打下了的基础,也为最终实现药用次生代谢产物的规模化生产奠定了基础。
- 刘光德祝钦泷郭余龙李艳冬罗莉莉眭顺照李名扬
- 关键词：资源植物金荞麦类黄酮CDNA文库
