国家自然科学基金(30871575) 作品数:23 被引量:92 H指数:6 相关作者: 陈由强 叶冰莹 陈如凯 何文锦 林荣华 更多>> 相关机构: 福建师范大学 中华人民共和国农业部 福建省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
甘蔗SPSⅢ内含子地高辛探针的制备及检测 2010年 以甘蔗SPS基因选择性剪接保留的内含子6,7,8片段为靶序列,利用PCR扩增技术分别制备出3种地高辛标记的SPS内含子探针:SPS-intron 6探针167 bp,SPS-intron 7探针93 bp和SPS-intron8探针175 bp,并通过斑点杂交实验表明这3种探针灵敏度高,都能检测到pg级的靶核酸,且特异性好,阴性对照实验显示无杂交信号. 许云珍 林荣华 何文锦 吴自明 陈由强 陈如凯关键词:地高辛标记探针 斑点杂交 甘蔗不同收获时间蔗糖含量的测定及变化分析 2014年 为测定及分析甘蔗在不同收获时间蔗糖含量的变化,采用水处理甘蔗样品,采取高效液相色谱法,经Waters Sugar Pak I柱(6.5mm×300mm,10.0μm),Waters2414示差折光检测器(RID)检测,流动相为高纯水,流速:1.0mL·min^-1,柱温:90℃,检测器温度:35℃.结果显示该法相对标准偏差(RSD)(n=6)〈2%,回收率为95%~105%,蔗糖质量浓度为10~50mg·mL^-1.且甘蔗在不同的收割时间蔗糖含量变化较明显,基本在14:00~15:00时达到最大值.实验表明HPLC法能够较快且较准确测出甘蔗中蔗糖的含量.通过比较可知,甘蔗蔗茎中蔗糖含量是随着光合作用的强弱而变化的. 王婷 陈丽芳 苏俊波 叶冰莹 陈由强关键词:甘蔗 高效液相色谱法 蔗糖含量 甘蔗双低频酶cDNA-AFLP体系的优化 被引量:2 2010年 目的:建立一个适合于甘蔗(Saccharum officenarum)为研究材料的cDNA-AFLP反应的优化体系。方法:用Rever-tAidTM First Strandc DNA Synthesis Kit反转录获得第一链,用Rnase H、E.coliDNA聚合酶Ⅰ和E.coliDNA连接酶合成双链cDNA,用双低频酶EcoRⅠ和PstⅠ对dscDNA酶切,连接,预扩增,和选择性扩增的关键因素进行分析。结果:500ng的dscDNA双酶切5h,将16℃过夜连接的产物稀释1倍用作预扩增的模板,预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增模板,6%聚丙烯酰胺凝胶检测及银染,扩增条带均匀分布,清晰可辨且主要分布在200~2000bp之间。结论:该体系具有稳定性高,重复性好等优点,可用于甘蔗cDNA-AFLP分析。 郭静 林荣华 胡薇 陈由强 陈如凯关键词:甘蔗 CDNA-AFLP 甘蔗UGPase5'侧翼序列克隆及缺失表达分析 被引量:1 2014年 以甘蔗(FN95;-1702)为材料,通过接头连接PCR方法克隆该基因不同长度5'侧翼序列。将不同长度的5'侧翼序列连同UGPase基因的外显子片段定向插入到GUS基因上游,在保证其后GUS编码框不发生偏移的情况下,插入的UGPase外显子融合GUS表达成为新的报告基因。根据此策略,构建了一系列表达结构为5'Flanking Sequence-UGPase Exon-GUS-Nos polyA的5'侧翼序列缺失表达载体,进行启动子活性分析。注射法转染烟草叶片组织检测GUS瞬时表达,分析结果表明,所克隆到的UGPase基因5'端侧翼序列不具有启动子活性。 叶冰莹 王婷 何文锦 邱思 陈由强关键词:甘蔗 UGPASE 高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖、葡萄糖和蔗糖的含量 被引量:31 2011年 研究高效液相色谱(HPLC)示差折光检测法测定甘蔗节间糖含量,建立一种简便、快速和准确可靠的,能同时测定果糖、葡萄糖、蔗糖含量的高效液相色谱法。HPLC方法采用Agilent Zorbaxcarbohydrate柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(75:25,V/V),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测器温度35℃。该法相对标准偏差(RSD)为0.82%~0.87%(n=5),加标回收率为97.84%~99.12%,糖类质量浓度在0.625~20mg/mL内呈现良好的线性关系,相关系数在0.9982(n=6)以上。采用本法测定两种甘蔗品种不同时期、不同节间糖含量,均获得满意结果。 逯平杰 代容春 叶冰莹 林荣华 何文锦 陈由强 陈如凯关键词:高效液相色谱法 果糖 葡萄糖 蔗糖 利用基因芯片筛选甘蔗成熟期叶片差异表达候选基因 被引量:4 2012年 利用Agilent甘蔗4×44k(per array)芯片分析甘蔗叶片在甘蔗成熟期的差异表达基因,并通过生物信息学手段对基因芯片杂交结果进行分析。芯片杂交结果符合质控标准,并且杂交数据重复性良好,结果可靠。在甘蔗生长过程中8个时间点上,共筛选出相关差异在2倍以上的基因20个,其中上调表达基因17个,下调表达基因3个。这些候选基因分别涉及不同水平分子进程和多种代谢途径。 黄峰 何文锦 代容春 林荣华 叶冰莹 陈由强关键词:基因芯片 甘蔗 差异表达基因 甘蔗SPSⅢ5′侧翼序列缺失表达载体的构建及其转化烟草的研究 被引量:1 2011年 蔗糖磷酸合成酶是糖代谢调节的关键酶之一,根据本实验室克隆到的SPSⅢ5′侧翼序列,构建了3个侧翼序列缺失表达载体,转化云烟85成功获得转基因植株,可用于核心启动子确定的研究。转基因植株叶片冰冻切片结果表明3段缺失侧翼序列均有启动子活性。 池朝华 陈玲 周平 高玉娜 叶冰莹 陈由强关键词:核心启动子 绿色荧光蛋白 筛选甘蔗SPSⅢ启动子诱饵片段结合蛋白的酵母单杂交诱饵质粒的构建 被引量:2 2011年 主要构建了可以与酵母染色体发生重组的质粒pAbAI-Bait,并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞获得转化子,将阳性克隆进行PCR与DNA测序的方法鉴定,结果表明:酵母单杂交中报告质粒pAbAI-Bait构建成功,可用于酵母单杂交体系. 邹丽娟 高玉娜 周平 叶冰莹 陈由强 陈如凯关键词:酵母单杂交 转录因子 甘蔗叶片蛋白质组双向电泳技术优化 被引量:5 2011年 为了建立适合甘蔗叶片蛋白质组研究的双向电泳技术,对甘蔗叶蛋白质的溶解方法、IEF电泳、上样量等关键步骤进行了优化.结果表明:裂解液中有2 mmol/L的硫脲才能更充分地溶解蛋白;上样量1.0 mg时得到质量较好的凝胶图谱;甘蔗叶片蛋白质主要分布在pH4~7范围.通过对甘蔗叶片蛋白双向电泳技术的优化,提高了双向电泳图谱分辨率和蛋白点数,建立了一套适用于甘蔗叶片蛋白质组分析的双向电泳(2-DE)方法,为甘蔗糖代谢相关的差异蛋白质组学研究提供参考. 张燕 何文锦 叶冰莹 陈由强 陈如凯关键词:甘蔗 蛋白质组 双向电泳 甘蔗SPSⅢ基因启动子5’侧翼缺失的GUS表达载体构建 被引量:1 2012年 蔗糖磷酸合成酶是调节植物蔗糖合成的关键酶之一。本研究根据该段序列上预测的顺式作用元件将SPSⅢ5'侧翼序列不同长度的片段与GUS基因融合,成功构建了3个缺失表达载体,为进一步的甘蔗SPSⅢ启动子活性区域鉴定提供基础。 张积森 郑月霞 郑月霞 高玉娜 郭春芳 高玉娜 陈由强 郭春芳关键词:甘蔗 GUS基因