教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-10-0597)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：罗恩柳娜张朝良陈轶珺刘显更多>>
- 相关机构：四川大学上海交通大学医学院附属仁济医院西南交通大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核因子-κB受体活化因子配体表达抑制对其促进羟基磷灰石生物骨结合的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中的表达抑制对其成骨特性的影响。方法将大鼠BMSCs分为3组:实验组、阴性对照组、空白对照组,实验组和阴性对照组分别转染相应的小干扰RNA(small in-terfering RNA,siRNA),空白对照组不做转染。转染后检测3组细胞RANKL mRNA表达情况,判断特异性siRNA是否抑制了大鼠BMSCs内RANKL的基因表达。转染1周后,对3组BMSCs进行成骨相关基因的实时定量PCR检测。将转染后和未转染的BMSCs与羟基磷灰石(hydroxyapotite,HA)材料复合后植入体内,进行扫描电镜、组织学切片观察,测试骨组织的压缩强度及拉伸强度,通过以上方法,对比HA与生物骨的结合情况。结果 siRNA转染后,特异siRNA成功下调BMSCs中RANKL的表达(P<0.05),BMSCs成骨相关基因检测结果显示,RANKL的下调会导致骨形成蛋白及核心结合蛋白因子-2(runt-related transcription factor-2,RunX-2)的下调和过氧化酶活化增生受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma,PPAR-γ)及CCAAT增强子结合蛋白-α的上调(P<0.05);扫描电镜、组织学和生物力学检测表明RANKL下调明显降低BMSCs植入体骨再生及生物骨结合能力。结论 RANKL下调会降低BMSCs成骨分化作用,进而影响其骨修复促进作用。
- 张继斌邵军施鹏伟柳娜张朝良罗恩
- 关键词：RANKL羟基磷灰石羟基磷灰石类骨整合
- 氯磷酸二钠修饰羟基磷灰石对颌骨缺损修复的影响
- 2012年
- 目的研究氯磷酸二钠修饰羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)在体内外促进骨形成对骨缺损修复效果的影响。方法制备氯磷酸二钠-HA复合材料,以HA为对照;分离培养成骨细胞,接种于氯磷酸二钠-HA和HA支架,四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞增殖活性,测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,实时荧光定量PCR检测成骨细胞骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κβ受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa beta ligand,RANKL)mRNA表达的变化;进而将氯磷酸二钠-HA和HA植入兔下颌骨缺损区域,改良Masson染色及生物力学检测观察氯磷酸二钠对HA修复颌骨缺损的影响。结果 MTT和ALP活性检测表明成骨细胞在氯磷酸二钠-HA和HA支架上生长的增殖活性差异无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,两组细胞RANKL mRNA表达无明显变化,而氯磷酸二钠-HA组OPGmRNA显著上调(P<0.05)。改良Masson染色表明,与HA相比,氯磷酸二钠-HA更有利于材料周围新骨形成。生物力学检测结果表明氯磷酸二钠-HA组的压缩强度、拉伸强度、剪切强度均大于HA组(P<0.05)。结论复合在HA表面的氯磷酸二钠可能通过上调成骨细胞OPG表达,促进新骨形成,提高骨缺损修复的生物力学性能。
- 邵军白云Khagendra Chhetri张朝良罗恩
- 关键词：羟基磷灰石成骨细胞骨缺损
- Ca-Alg作为OPG缓释载体的实验研究
- 2014年
- 目的本实验以藻酸钙(calcium alginate,Ca-Alg)凝胶为载体将护骨素(osteoprotegerin,OPG)与羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)复合构建OPG/Ca-Alg/HA复合材料,筛选出OPG缓释效果最稳定的OPG/Ca-Alg/HA复合材料,体外研究该材料缓释的OPG对体外培养破骨细胞的形态及功能影响,并进一步研究其植入兔下颌骨缺损后骨缺损的修复的效果。方法通过ELISA法检测检测OPG蛋白释放速率并筛选OPG缓释效果最稳定的OPG/Ca-Alg/HA复合材料;将该材料与兔破骨细胞在体外共培养,抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞形态与功能;体内植入兔下颌骨缺损,通过影像学和组织学方法评估术后8周标本的成骨效果。结果 1.5%藻酸钠溶液和100mmol/L氯化钙溶液配比的OPG/Ca-Alg/HA复合材料能以较平稳的速度释放OPG。OPG/Ca-Alg/HA复合材料与兔破骨细胞共培养后破骨细胞的伪足收缩,细胞核固缩,胞质内出现广泛空泡样变性,形成的骨陷窝面积减小。OPG/Ca-Alg/HA实验组与缺损部位骨组织结合紧密,无明显松动,HA-骨界面有明显成骨,新生骨质致密;对照组材料与缺损部位骨组织结合良好,部分标本有松动,HA-骨界面新生骨量少且疏松。结论 Ca-Alg作为OPG缓释载体,在1.5%藻酸钠溶液和100mmol/L氯化钙溶液配比下具有较好的缓释作用;其释放的OPG可以在体外实验中抑制成熟破骨细胞的骨吸收功能,在体内实验中,缓释OPG可以促进Ca-Alg/HA材料周围骨再生。
- 刘瑶张晓辉杨光柳娜罗恩
- 关键词：护骨素
- hOPG转染对大鼠BMSCs及种植体周围成骨的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究体内、体外人骨保护素(hOPG)基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨功能和种植体周围成骨的影响。方法:构建含hOPG的重组腺病毒,蛋白印迹杂交法Western Blot检测转染细胞OPG蛋白功能表达。倒置显微镜观察转染细胞形态差别,茜素红S染色鉴定转染细胞的体外成骨能力。建立大鼠股骨干骺端羟基磷灰石涂层种植体植入动物模型。植入种植体前,实验组于植入体窝注入10μL的病毒悬浮液;对照组注入10μL的PBS。4周后取材,HE染色,光镜下观察,定量分析。结果:Western blot结果显示OPG在蛋白水平高表达;茜素红S染色转染组和未转染组都出现了较多散在的致密圆形矿化结节,萃取染色后分光光度检测两者无明显差异;体内实验显示实验组种植体周围成骨明显高于对照组。结论:体外pDC316-hOPG-EGFP成功转染大鼠BMSCs,转染hOPG基因的BMSCs能持续稳定的高表达hOPG。转染不影响BMSCs的成骨活性。种植体周围注射hOPG具有促进种植体周围成骨的作用。
- 陈轶珺刘显魏本娟柳娜罗恩
- 关键词：骨保护素成骨基因转染种植体
