国家高技术研究发展计划(2013AA102102)
- 作品数:28 被引量:145H指数:6
- 相关作者:江波张涛沐万孟缪铭聂少平更多>>
- 相关机构:江南大学南昌大学天津科技大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程理学更多>>
- 富含车前子多糖饮料的制备及其肠道功能活性研究被引量:2
- 2016年
- 以大粒车前子为原料制备富含水溶性多糖的提取液,在此基础上以感官评价为指标,通过单因素试验结合正交试验优化富含车前子多糖的功能性饮料工艺配方,并结合动物试验评价所得饮料对小鼠肠道功能的影响。结果表明:车前子多糖饮料的最佳工艺配方为车前子多糖提取液稀释2倍后用于饮料制作,在白砂糖添加量为6%,柠檬酸添加量为0.025%,茶多酚添加量为0.05%条件下得到的饮料口感最好;当CMC-Na和黄原胶的添加量均为0.01%时,车前子多糖饮料的稳定性最好;车前子多糖饮料可提高小鼠粪便的含水量,增加盲肠中丙酸和丁酸的浓度。所研发的车前子多糖饮料对肠道有一定的益生作用。
- 刘晓莹王力马璐瑶聂少平殷军艺
- 关键词:食品科学饮料正交试验肠道功能
- D-甘露糖异构酶的克隆表达及酶法制备D-甘露糖被引量:3
- 2019年
- 将大肠杆菌BL21中的D-甘露糖异构酶(MIase)基因yihS克隆到表达载体pET-28a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达。重组菌株经IPTG诱导培养6 h后MIase发酵酶活可达4.2 U/mL。重组MIase生产D-甘露糖时不需要金属离子的参与。该酶在40℃和pH 7.5条件下表现出催化D-果糖的最高活性,转化率为25%左右;通过研究底物浓度对酶活性的影响,得出该酶的活性不受底物浓度的抑制,以D-果糖为底物时,动力学参数Km为123.32mmol/L,Vmax为113.64μmol/(min·mg),催化效率kcat/Km为0.691 (s·mmol/L)。
- 胡兴张涛沐万孟缪铭江波
- 关键词:生物制备
- Bacillus methylotrophicus γ-聚谷氨酸合成酶基因的克隆表达被引量:1
- 2016年
- 研究了一株非谷氨酸依赖型γ-聚谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)产生菌Bacillus methylotrophicus SK19.001合成酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达。以p ET-28a(+)载体构建含有pgs BCA合成酶基因的表达载体,转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21构建重组菌。结果表明,在分别以葡萄糖和谷氨酸为底物的培养基中,重组工程菌都具有合成γ-PGA的能力,说明pgs BCA合成酶基因对于B.methylotrophicus SK19.001产γ-PGA是必需的。pgs BCA合成酶基因序列比对的结果的表明,pgs B和pgs C基因编码的氨基酸序列相对保守。
- 彭英云张涛江波沐万孟缪铭
- 关键词:BACILLUS克隆表达
- 固定化精氨酸脱亚胺酶的制备与性质研究被引量:2
- 2017年
- 从7种大孔型离子交换树脂中筛选出固定化效果最好的弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂D301-G,通过先吸附后交联的方法对精氨酸脱亚胺酶进行固定化条件及固定化酶性质研究。经单因素实验,结果表明,最佳固定化条件为每克树脂加入156 U精氨酸脱亚胺酶液,p H4.0,28℃条件下吸附4 h后,在4℃冷却,加入戊二醛溶液至体系内戊二醛体积分数为0.07%,4℃下交联4 h,最优条件下固定化酶活回收率可达85%以上。固定化酶的最适温度和p H分别为50~60℃和5.0~5.5,较游离酶具有更高的温度稳定性,同时固定化酶的米氏常数Km值比游离酶高。固定化酶在重复使用8次后仍保留57.7%的酶活,表明该固定化酶具有较好的操作稳定性,可为连续生产瓜氨酸提供技术依据。
- 蒋航宇张涛江波沐万孟缪铭
- 关键词:精氨酸脱亚胺酶树脂固定化瓜氨酸
- 菌体转化生成GABA菌株筛选、鉴定及发酵条件优化被引量:1
- 2014年
- 从酸牛奶和泡菜等5个样品中分离到了23株菌。通过薄层色谱初筛之后,再经过HPLC复筛,得到6株具有转化谷氨酸钠生成γ-氨基丁酸(GABA)菌株。对转化量最高的菌株进行生理生化和分子生物学鉴定,鉴定该菌株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。对该菌种的发酵培养基做了部分优化,得出了以下最佳条件:碳源为蔗糖(15 g/L),氮源为复合氮源(25 g/L),初始pH 6.2,添加1 mmol/L的Zn2+和Mn2+,谷氨酸钠的添加量为10 g/L。在已优化培养基培养,最佳菌龄为20 h。最终GABA转化量达到3.9 g/L。
- 邱文军张涛江波缪铭沐万孟
- 关键词:Γ-氨基丁酸菌株
- 新型水溶性(1→3)(1→6)-α-D-葡聚糖的性质被引量:3
- 2016年
- 利用明串珠菌SK24.002发酵制备水溶性(1→3)(1→6)-α-D葡聚糖,采用高效液相色谱仪、扫描电镜、Zeta电位/粒径仪、热分析系统、差示扫描量热仪、旋转流变仪等现代分析方法测定其理化性质。结果表明,该葡聚糖表面呈多孔网络结构,能溶于水,溶液中粒径分布在40~160nm范围内。相对分子质量分布呈单一峰,具有较高的热稳定性,200℃以下只失去了吸附水,当温度在265~345℃时,发生强烈的热裂解反应,(1→3)(1→6)-α-D葡聚糖溶液的黏度在5~10 g/d L范围内随着质量浓度增加呈指数上升,高浓度的葡聚糖溶液呈现剪切变稀特性,能形成弱凝胶。
- 黄超缪铭金征宇江波
- 关键词:扫描电镜流变特性
- 天然产物来源多糖结构解析研究进展被引量:47
- 2017年
- 多糖是高等植物、动物、微生物细胞中一类非常重要的天然大分子物质,由于许多活性多糖具有良好的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化和调节肠道菌群等功能,因此科学认识多糖结构有利于深入研究其生物活性功能,对多糖的基础研究和应用具有重要意义。本文简述天然产物来源多糖分离纯化和结构解析的研究方法,重点介绍葡聚糖、葡甘聚糖、木葡聚糖、阿拉伯木聚糖和果胶等多糖结构解析的研究进展,就多糖结构解析目前存在的一些问题进行探讨与展望。通过归纳文献资料并结合笔者团队近20年的研究积累,提出"部分降解-甲基化-核磁共振"可作为多糖一级结构解析的核心技术,同时可辅助利用ESI-MS、Maldi-Tof-MS、离子淌度-质谱联用等技术与方法,从而构建一套先进的多糖一级结构解析技术体系。
- 谢明勇殷军艺聂少平
- 关键词:多糖甲基化核磁共振
- 海藻酸钠固定细胞产D-阿洛酮糖的研究被引量:11
- 2015年
- D-阿洛酮糖3-差向异构酶(DPEase)是一种能催化D-果糖转化为D-阿洛酮糖的异构酶。本实验采用海藻酸钠作为载体,包埋重组大肠杆菌催化D-果糖生成D-阿洛酮糖。以固定化细胞的酶活活力回收率为指标,优化出最佳固定化条件为:海藻酸钠浓度3%,细胞包埋量60g/L,Ca Cl2浓度2%,固定化时间4h,0.01%浓度戊二醛溶液中交联4h。该条件下所得固定化细胞的酶活回收率高达76%,且具有较好的操作稳定性,重复操作8次后酶活回收率仍然保持61%。固定化后DPE细胞的最适酶反应温度提高了5℃、最适pH与游离细胞基本一致,耐热性明显提高,p H稳定性与游离细胞一致。
- 李秋喜林春芳沐万孟江波张涛
- 关键词:海藻酸钠固定化
- 糖苷水解酶第3家族β-葡萄糖苷酶的研究进展被引量:17
- 2017年
- β-葡萄糖苷酶属于糖苷水解酶家族,在食品、医药、生物质转化中有着重要的作用。本文主要对糖苷水解酶家族3的β-葡萄糖苷酶进行综述,主要包括理化性质、底物特异性、反应动力学、三维结构、催化残基和酶基因克隆表达等几个方面,为从基础领域研究该家族此酶的催化机理及表达调控机制提供参考。
- 周林芳江波张涛李淑华
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶克隆表达
- D-塔格糖3-差向异构酶的储存稳定性被引量:2
- 2014年
- 为提高D-塔格糖3-差向异构酶(D-tagatose 3-epimeriase,DTE)粗酶液的储存稳定性,在其粗酶液中添加防腐剂以及糖类、盐类、多元醇类与蛋白质等稳定剂。通过单因子研究与正交实验,研究了它们对酶液储存稳定性的影响。结果表明:0.3%尼泊金甲酯(methylparaben,Met)有较佳的防腐效果,且能显著降低酶液的失活速率;果糖、肌醇、Mg SO4是DTE良好的稳定剂,其组合2 mmol/L Mg SO4,6%果糖,4%肌醇为最优的复合稳定剂;将加有0.3%Met和复合稳定剂的粗酶液在25℃下保存,粗酶失活半衰期为62 d,而仅加防腐剂Met的半衰期为25 d,空白酶液仅2 d。因此,复合稳定剂与防腐剂Me的联合使用能较好地提高DTE粗酶液的储存稳定性。
- 张巧帅玉英张涛江波缪铭沐万孟
- 关键词:半衰期稳定剂