湖南省自然科学基金(07JJ3030) 作品数:4 被引量:0 H指数:0 相关作者: 何淑雅 马云 杨阳 李斌元 董晓 更多>> 相关机构: 南华大学 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
FTH1真核表达载体的构建与鉴定 2011年 目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(FTH1)基因的真核表达载体pCMV-Myc-FTH1,为研究FXR1P与FTH1体内相互作用奠定基础。方法以人胎脑cDNA文库为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增FTH1基因片段,将扩增片段经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到同样经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pCMV-Myc载体,酶切鉴定阳性克隆并进一步测序鉴定。结果成功构建了pCMV-Myc-FTH1重组真核表达载体。结论 pCMV-Myc-FT1重组真核表达载体的构建为进一步在细胞内鉴定FXR1P与FTH1相互作用奠定了基础,对研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理提供了依据。 董晓 何淑雅 李斌元 王三虎 自映萍 马云关键词:脆性X综合征 真核表达载体 脆性X相关蛋白Ⅰ结构及功能研究进展 2011年 脆性X相关蛋白Ⅰ(FXR1P)是脆性X蛋白家族成员,与脆性X智力低下蛋白(FMRP)的氨基酸序列60%以上相似。FXR1P分子中存在KH-Ⅰ结构域、RGG结构域、Agenet结构域、NLS、NES信号、NoS等结构;FXR1P可作为转录调节因子参与特定mRNA的转录与翻译。研究表明,FXR1P可以参与miRNA调控途径,实现对靶mRNA的调节。从结构和功能方面对FXR1P研究进展作一综述。 符向辉 何淑雅 李斌元 董晓 马云Construction and expression of enhanced green fluorescent protein and FXR1 co-expression vector <正>Objective:To construct EGFP and FXR1 co-expression vector and to detect its expression in cultured HEK 293T... Hui Ting LIU,Yun MA,Yang YANG,Shu Ya HE (Department of Biochemistry and Molecular Biology of University of South China, Hengyang,421001)文献传递 FXR1真核表达载体的构建及鉴定 2010年 目的构建携带人脆性X相关基因1(FXR1)的真核表达载体pCMV-HA,为研究FXR1P互作蛋白奠定基础。方法以pYESTrp3-FXR1为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增FXR1基因片断,将扩增片段经EcoR I和XhoI双酶切后克隆到pCMV-HA载体,酶切鉴定阳性克隆并测序鉴定。结果成功构建了pC-MV-HA/FXR1真核表达载体。结论pCMV-HA/FXR1真核表达载体的构建为进一步在细胞内鉴定FXR1互作蛋白奠定了基础,从而对研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理具有深远意义。 杨阳 马云 符向辉 何淑雅关键词:脆性X综合征 免疫共沉淀 FXR1基因与增强型绿色荧光蛋白融合载体的构建及表达 2009年 目的:构建携带人脆性X相关基因1(Fragile X related genel,FXR1)与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的融合表达载体并进行表达,为研究FXR1基因在脆性X综合征中的作用机制奠定基础。方法:以重组质粒pYESTrp3/FXR1为模板,PCR扩增FXR1基因,将扩增片段双酶切后连接到质粒pEGFP-N1中,形成重组表达载体pEGFP-N1/FXR1,并用脂质体法转染人胚肾细胞,荧光显微镜下观察GFP在细胞内的表达及Western Blotting检测FXR1的表达情况。结果:成功构建融合表达载体pEGFP-N1/FXR1,在人胚肾细胞实现表达,检测到融合蛋白EGFP/FXR1。结论:本实验成功构建EFGP和FXR1重组共表达载体并可在真核细胞中表达,为进一步研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理奠定基础。 刘慧婷 马云 杨阳 何淑雅关键词:增强型绿色荧光蛋白 人胚肾细胞 智力低下相关蛋白FXR1P与CMAS相互作用区域的鉴定 目的FXR1P是一种对于神经和肌肉系统发育有重要调控作用的蛋白,FXR1是脆性X致病相关基因家族成员,通过构建不同的FXR1P选择剪接异构体诱饵载体,进行其与本实验室经酵母双杂交、Co-IP和细胞内蛋白共定位技术证实与F... 符向辉 何淑雅 董晓 李斌元 王三虎 秦凌雪 陈小卫 马云关键词:脆性X综合征 酵母双杂交 文献传递