国家自然科学基金(30270346)
- 作品数：24 被引量：104H指数：6
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- 电离辐射诱导P21蛋白表达及对细胞周期解偶联的作用被引量：4
- 2005年
- 采用免疫细胞化学方法检测P21蛋白表达的变化。采用PI荧光标记及流式细胞术(Flowcytometry,FCM)测定细胞周期并分析细胞倍体的变化。观察电离辐射对EL?4细胞P21蛋白表达的影响及对细胞周期解偶联的作用。时效实验结果显示,4.0GyX射线照射后2—72h,EL?4细胞中P21蛋白表达明显增高(p<0.05—p<0.001)。量效实验结果显示,0.5—6.0GyX射线照射后24h,EL?4细胞中P21蛋白表达明显增高(p<0.01—p<0.001)。结果还显示,1.0—6.0GyX射线照射后,EL?4细胞的8倍体细胞数在各剂量组均未见明显变化(均p>0.05)。研究表明,电离辐射可诱导EL?4细胞P21蛋白表达,但不诱导EL?4细胞周期解偶联。提示P21蛋白可能参与细胞周期解偶联的分子调控。
- 鞠桂芝闫凤琴付士波李鹏武
- 关键词：电离辐射P21蛋白
- 骨髓间充质干细胞对肾缺血再灌注损伤后肾功能及氧化应激水平的改善作用被引量：10
- 2009年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)促肾缺血再灌注损伤修复的能力,为肾脏疾病治疗提供新的思路。方法:健康3周龄C57BL/6J小鼠的骨髓细胞悬液进行BMSCs体外扩增培养。8周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、平行对照组和细胞移植组,每组16只小鼠。建立肾缺血-再灌注损伤模型,将BMSCs通过尾静脉注射到细胞移植组小鼠中,平行对照组注射生理盐水。检测肾功能指标血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平变化、损伤肾组织自由基——羟自由基和超氧阴离子自由基变化和肾形态学变化。结果:①分离培养的BMSCs增殖旺盛,纯度较高,且均质性和稳定性好。②平行对照组小鼠整体状态差,肾功能指标、氧化应激指标明显升高,组织形态学出现肾小球崩解,肾小管结构消失,肾间质见大量炎性细胞浸润。而细胞移植组小鼠整体状态良好,肾功能指标和氧化应激指标得到明显改善(P<0.05),组织形态学未出现明显病理性改变。结论:BMSCs在体外易分离培养,具有旺盛的增殖能力;移植BMSCs后,通过抑制氧自由基的生成来促进肾缺血-灌注损伤后小鼠的恢复。
- 丁国永郭丽杜忠君吴光健陈强卢日峰凌翎范洪学
- 关键词：骨髓间充质干细胞肾缺血-再灌注
- survivin与X射线诱导的染色体不稳定性被引量：1
- 2006年
- 目的探讨survivin基因在X射线诱导染色体不稳定性中所起的作用。方法用免疫细胞化学的方法检测survivin蛋白在HeLa细胞中的表达水平,并通过转染小片段发卡状RNA干扰HeLa细胞中survivin蛋白表达。转染后细胞接受4GyX射线照射,用流式细胞术检测照后0、4、12和48h的多倍体细胞发生率,并与单纯接受4GyX射线的对照组相比较。结果转染小片段发卡状RNA能够有效抑制HeLa细胞中survivin蛋白表达,转染48h抑制率达到32.16%。细胞接受4GyX射线照射后,多倍体细胞所占比例在48h时高于对照组(P<0.001)。而抑制survivin蛋白表达后,多倍体细胞所占比例于12和48h明显升高,大约是对照组的2倍以上。结论X射线照射可以诱导HeLa细胞发生染色体不稳定性。干扰survivin表达可以加强该效应,因而survivin在维持染色体稳定性方面发挥着重要作用。
- 沈波鞠桂芝刘扬
- 关键词：染色体不稳定性SURVIVIN基因RNA干扰X射线诱导
- siRNA沉默P21表达对细胞周期解偶联和细胞凋亡的影响被引量：6
- 2007年
- 目的:利用RNAi技术探讨P21蛋白表达对HeLa细胞周期解耦联和细胞凋亡的影响。方法:丝裂霉素刺激HeLa细胞后可诱导P21蛋白高表达,采用脂质体转染技术将p21 siRNA载体转染至HeLa细胞48 h后给予MMC刺激,利用流式细胞术检测HeLa细胞的P21蛋白表达、细胞倍体的形成和细胞凋亡的改变。结果:p21siRNA载体可有效干扰经MMC诱导的HeLa细胞中P21蛋白表达,MMC刺激后24 h和48 h细胞2倍体百分数明显少于对照组(P<0.01),4倍体和8倍体细胞百分数明显多于对照组(P<0.01)。p21 siRNA沉默HeLa细胞p21后,凋亡细胞百分率明显高于空质粒对照组(P<0.01)。结论:p21 siRNA可有效沉默HeLa细胞P21蛋白表达,在P21蛋白低表达的情况下,HeLa细胞可通过p53非依赖途径诱导细胞死亡,可能与细胞周期解偶联和p53非依赖的细胞凋亡有关。
- 杨英付士波鞠桂芝
- 关键词：蛋白质P21细胞凋亡RNA干扰解偶联
- 骨髓间充质干细胞在造血重建中的作用
- 2009年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(bonemarrow mesenchymal stem cells,BM-MSC)在造血损伤修复中的作用。方法将同系小鼠股骨、骨壳、注入骨髓条的塑料管及经20Gyγ-射线照射的股骨分别植入同一小鼠腹部皮下,观察1、2、3、4w各移植物造血重建情况。观察髓腔内微循环结构与机能、组织学、分化不同阶段的造血细胞数目与机能等变化,以及骨皮质体外间充质干细胞(MSC)培养与扩增规律。结果乏造血干细胞(HSC)的骨皮质异位移植完全可以造血重建,在移植后4w,移植物已形成完整的封闭的具有正常造血组织的股骨,其重建的程序、速度与具有大量HSC的完整股骨移植的重建基本一致。而经射线破坏和注入塑料管内的骨髓条完全失去造血重建功能。结论骨皮质可能是骨髓MSC的源泉,BM-MSC是造血重建的不可缺少的因素。
- 范东艳郭丽孟繁凯陈强凌翎王欣范洪学
- 关键词：间充质干细胞造血重建
- 电离辐射对EL-4细胞Caspase-3蛋白表达的影响被引量：4
- 2006年
- 孙世龙付士波刘扬鞠桂芝
- 关键词：CASPASE-3蛋白表达电离辐射EL-4细胞细胞凋亡机制特征性改变
- 电离辐射对胸腺细胞及脾细胞p16、CyclinD1、CDK4蛋白表达的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 研究电离辐射对小鼠胸腺细胞及脾细胞中p16、CyclinD1及CDK4蛋白表达的影响。方法 采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果 时效实验证实 ,2 0GyX射线全身照射后 8,2 4及 48h ,胸腺细胞p16蛋白表达显著增高 (分别P <0 0 5、P <0 0 1及P <0 0 5) ;照射后 2 4h ,脾细胞p16蛋白表达显著增高 (P <0 0 5)。然而 ,照射后 8～ 2 4h ,胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5～P <0 0 1) ;照射后 8～ 72h ,脾细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5～P <0 0 1)。量效实验证实 ,1 0 ,2 0及 4 0Gy全身照射后 2 4h ,胸腺细胞及脾细胞p16蛋白表达均显著增高 (P <0 0 5～P <0 0 1)。然而 ,2 0Gy照射后胸腺细胞CDK4蛋白表达显著降低(P <0 0 5) ;0 5～ 6 0Gy照射后脾细胞CDK4蛋白表达显著降低 (P <0 0 5～P <0 0 1)。研究还发现 ,胸腺细胞及脾细胞中CyclinD1蛋白表达于照射后均明显降低。结论 电离辐射可诱导胸腺细胞及脾细胞中p16蛋白表达增高。p16 CyclinD1
- 鞠桂芝王晓梅付士波刘树铮
- 关键词：电离辐射胸腺细胞脾细胞P16CYCLINDLCDK4
- 不同剂量X射线照射的细胞周期效应被引量：15
- 2003年
- 鞠桂芝马淑梅叶飞付士波刘树铮
- 关键词：X射线电离辐射胸腺细胞
- 蝎毒组分Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用被引量：9
- 2007年
- 目的:观察蝎毒组分Ⅰ(SV-Ⅰ)对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用。方法:卵巢癌细胞SKOV3分为空白对照组和SV-Ⅰ处理组(终浓度分别为200、400、800 mg.L-1),采用MTT法检测SV-Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长抑制率,集落形成法检测肿瘤细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果:200、400和800 mg.L-1组SKOV3细胞生长抑制率分别为29.87%、48.11%和67.77%,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01);在400和800 mg.L-1组,SKOV3细胞集落数分别为57.00±6.16和48.00±4.11,明显低于对照组(84.00±5.29)(P<0.01);与空白对照组比较,400 mg.L-1组SKOV3细胞S期细胞数明显减少(P<0.01),G2+M期细胞明显增多(P<0.01),800 mg.L-1组SKOV3细胞G2+M期细胞数明显减少(P<0.01),G1期细胞数有增多趋势;与空白对照组比较,400和800 mg.L-1组SKOV3凋亡细胞数明显增加(P<0.01)。结论:在一定浓度范围内蝎SV-Ⅰ可明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的生长,其机制与SV-Ⅰ抑制SKOV3细胞DNA合成、诱导SKOV3细胞发生G2+M和G1期阻滞及诱导SKOV3细胞凋亡有关。
- 付士波杨英闫凤琴刘淑春李鹏武鞠桂芝
- 关键词：蝎毒SKOV3细胞细胞周期细胞凋亡
- 电离辐射诱导EL-4细胞Caspase-3、P53蛋白表达及其生物学作用被引量：2
- 2006年
- 目的研究电离辐射对EL-4细胞中Caspase-3和P53蛋白表达的影响，及其对辐射诱导细胞凋亡及多倍体细胞的作用。方法采用单克隆抗体免疫荧光标记及流式细胞术检测蛋白表达的变化，采用PI荧光标记及流式细胞术检测细胞凋亡及多倍体细胞的变化。结果实验表明，4．0GyX射线照射后8及12h，EL-4细胞中Caspase-3蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；照射后2、4、8、12及24h，P53蛋白表达与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。实验还表明，4．0Gy照射后2、4、8、12、24、48及72h，EL-4细胞凋亡与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05～P〈0．001）；而照射后2～48h，多倍体细胞数与对照组比较则未见明显变化。结论电离辐射可诱导EL-4细胞Caspase-3及P53蛋白表达增高，可能在辐射诱导细胞凋亡中起重要作用，而辐射诱导多倍体细胞的分子通路则可能是P53非依赖性的。
- 鞠桂芝沈波孙世龙闫凤琴付士波李鹏武
- 关键词：电离辐射CASPASE-3
