国家自然科学基金(30060037)
- 作品数：19 被引量：48H指数：4
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- α和β纤维蛋白原基因核苷酸多态性及其单体型与冠心病的关系被引量：5
- 2007年
- 目的研究α纤维蛋白原基因TaqI多态性和β纤维蛋白原基因-455G/A-、249C/T、-148C/T、+1689T/G、448G/A、BsmAI、BclIG/A、HinfIA/C单核苷酸多态性及其单体型与冠心病的关系。方法采用聚合酶链反应限制片长多态性法确定基因型,采用比浊法测定血浆纤维蛋白原水平,采用EH+程序分析核苷酸多态性的单体型,采用卡方检验分析病例组和对照组的等位基因频率、基因型频率及单体型频率的差异。结果β纤维蛋白原基因-455A、-148T和448A的等位基因频率在冠心病组分别为0.343、0.351和0.326,在对照组分别为0.254、0.254和0.242,冠心病组β纤维蛋白原基因-455A、-148T和448A的等位基因频率明显高于对照组(P<0.05),β纤维蛋白原基因-455A、-148T和448A携带者患冠心病的相对危险度比非携带者分别大1.53倍、1.59倍和1.51倍;其他位点的等位基因频率在两组间无统计学差异。β纤维蛋白原基因-455G、-249C、-148C、+1689T、448G、BclIG、HinfIA和a纤维蛋白基因TaqI T2位点构成的单体型H16在病例组中的频率比对照组低(P<0.05)。以启动子区3个位点构建的单体型中,由-455G、-249C和-148C构成的单体型h1在病例组中的频率低于对照组(P<0.01),由-455A、-249C、-148C构成的单体型h5和由-455A、-249C、-148T构成的单体型h6在病例组中的频率高于对照组(P<0.05和P<0.01)。结论β纤维蛋白原基因-455G/A、-148C/T和448G/A单核苷酸多态性与冠心病关联,β纤维蛋白原基因-455A、-148T和448A可能是与冠心病相关的遗传危险因素。
- 孙川梁亮李巍景肖锋苏雨江姚震陈晓丹邢波陈莫水刘国勋蔡望伟
- 关键词：分子生物学纤维蛋白原冠心病单体型
- 凝血因子ⅩⅢ A亚基mRNA大片段缺失所致遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏症的分子机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的 研究凝血因子ⅩⅢ（FⅩⅢ）A亚基mRNA DelCD 11-279大片段缺失引起遗传性FⅩⅢ缺乏症的分子致病机制.方法 构建正常人、先证者母亲FⅩⅢA亚基mRNA表达质粒pET-22b（＋）/FⅩⅢA和先证者FⅩⅢA亚基mRNA DelCD 11-279大片段缺失的表达质粒pET-22b（＋）/FⅩⅢA-Del,转化大肠杆菌BL21,SDS-PAGE和Western blot法检测FⅩⅢA亚基蛋白的表达,Ni-NTA树脂结合柱纯化FⅩⅢA亚基蛋白质,EZ-LinkTM5-（Biotinamido） Pentylamine掺入法检测纯化FⅩⅢA亚基蛋白质活性.结果 pET-22b（＋）/FⅩⅢA和pET-22b（＋）/FⅩⅢA-Del经酶切及PCR鉴定构建成功,转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导后获特异高效表达,SDS-PAGE显示重组蛋白质的相对分子质量分别为83 200和51 900,用Ni-NTA树脂结合柱分离得到纯化蛋白质,Western blot方法分析表明重组的蛋白质是人FⅩⅢA亚基蛋白,先证者及其母亲的纯化FⅩⅢA亚基蛋白活性分别为正常人的0、95.87％.结论 FⅩⅢA亚基mRNA DelCD 11-279大片段缺失导致编码截短的464个氨基酸的无活性FⅩⅢA亚基蛋白是先证者遗传性FⅩⅢ缺乏症的分子机制之一.
- 马秋玲金洁蔡望伟
- 关键词：质粒FACTOR
- 海南汉族人群中α和β纤维蛋白原基因核苷酸多态性及其单倍型与缺血性脑卒中的关联分析被引量：9
- 2006年
- 目的研究α纤维蛋白原基因的TaqⅠ多态性和β纤维蛋白原基因-455G/A、-249C/T、-148C/T、+1689T/G、βBsmAⅠG/C、448G/A、BclⅠG/A、HinfⅠA/C单核苷酸多态性及其单倍型与缺血性脑卒中的关系。方法用比浊法测定160例海南籍缺血性脑卒中和130名海南籍对照个体的血浆纤维蛋白原浓度,用PCR限制性片段长度多态法确定基因型,用EH+程序分析核苷酸多态性的连锁不平衡关系及单倍型,用卡方检验分析病例组和对照组的等位基因频率、基因型频率及单倍型频率的差异。结果-455G/A、-148C/T、448G/A多态性的基因型频率、等位基因频率在病例组和对照组之间的差异有统计学意义(P<0.01),其余6个核苷酸多态性的基因型频率、等位基因频率在病例和对照组间的差异无统计学意义(P>0.05),A-455、T-148、A448携带者患缺血性脑卒中的相对危险度比非携带者分别大2.46倍、2.30倍和2.08倍。连锁不平衡分析未发现所分析的区域内存在单倍型板块。9个位点构建的单倍型在病例组和对照组之间的差异无统计学意义,以4个位点构建的单倍型中,某些单倍型在病例组和对照组之间的差异有统计学意义,对照组中某些携带G-455、C-148、G448位点的单倍型的频率高于病例组,而病例组中某些携带A-455、T-148、A448位点的单倍型的频率高于对照组。结论多个位点和单倍型分析的结果提示β纤维白原455G/A、-148C/T、448G/A可能是海南汉族人群中与缺血性脑卒中关联的危险因素。
- 梁亮孙川廖小平肖锋陈晓丹黄仕雄汤小兰文国强龙志刚王小英刘国勋程爽蔡望伟
- 关键词：纤维蛋白原缺血性脑卒中连锁不平衡分析单倍型
- 一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA链基因5’-端短串联重复序列[AAAG]n多态性分析
- 2004年
- 目的:分析一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA基因5’-端非翻译区STR多态性,对该亚基的突变位点进行遗传分离分析。方法:应用PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法技术分析一个经测序确诊的凝血因子XⅢ基因缺乏的家系的凝血因子XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn。结果:在该家系中检测出两种基因型,先证者及其弟XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn的基因型为L2/L2基因型,先证者的父亲、母亲及其妹的基因型为L1/L2,先证者的XⅢA链基因的突变位点分别与父源的L2和母源的L2位点连锁。结论:根据家系XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn与FXⅢA基因突变位点的连锁关系可确定突变的遗传分离特点。
- 肖德乾王巍蔡望伟周克元
- 关键词：家系
- 海南汉族、黎族人群纤维蛋白原基因9个核苷酸多态性及单体型的比较研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究海南汉族、黎族人群体纤维蛋白原基因αTaqⅠ、βBclⅠG/A、βHinfⅠA/C、β448G/A、βBsmAⅠG/C、β+1689T/G、β-148C/T、β-249C/T、β-455G/A9个位点的等位基因频率、连锁不平衡关系及单体型。方法从末梢血提取316名海南汉族个体和182名海南黎族个体的DNA标本,用PCR-RFLP法及测序法分析多态性和确定基因型,用EH+程序分析核苷酸多态性的连锁不平衡关系及单体型,用χ2检验分析人群间的等位基因频率及单体型频率的差异。结果纤维蛋白原基因αTaqⅠ、βBclⅠG/A、βHinfⅠA/C、β448G/A、βBsmAⅠG/C、β+1689T/G、β-148C/T、β-249C/T、β-455G/A的稀有等位基因频率在汉族人群中分别为0·429、0·255、0·128、0·255、0·302、0·267、0·282、0·468、0·274,在黎族人群中分别为0·312、0·363、0·150、0·344、0·328、0·350、0·331、0·626、0·350。海南汉族人群和黎族人群αTaqⅠ、βBclⅠG/A、β448G/A、β+1689T/G、β-249C/T、β-455G/A5个位点的稀有等位基因频率分布存在统计学差异(P<0·01)。黎族人群9个位点两两之间的连锁不平衡的紧密程度比汉族人群高。部分单体型的分布在两个人群之间的分布存在统计学差异。结论海南汉族、黎族人群纤维蛋白原基因的某些多态性及单体型的频率存在差异。
- 孙川梁亮肖锋刘国勋程爽蔡望伟
- 关键词：纤维蛋白原单体型
- 海南地区人群中凝血因子ⅧA链567位点多态性的研究
- 2010年
- 目的研究海南地区汉族人群、黎族人群凝血因子XIIIA链567位点(GAA→GAG)分布频率。方法用聚合酶链反应、限制性片段长度多态性分析检测205名汉族正常人、236名黎族正常人凝血因子XIIIA链567位点多态性。结果汉族人群和黎族人群均未发现567位点GAA→GAG突变。结论凝血因子XIIIA链567位点变异在中国海南人群中很少见。
- 王巍蔡望伟刘国勋程爽杨志刚
- 关键词：凝血因子XIII多态性基因频率
- β-纤维蛋白原基因启动子区单体型与缺血性脑卒中的关联分析被引量：1
- 2006年
- 目的研究β-纤维蛋白原(β-Fg)基因启动子区单体型与缺血性脑卒中的关系。方法用比浊法测定160例缺血性脑卒中患者和130例健康对照个体的血浆纤维蛋白原浓度,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)、等位基因特异聚合酶链反应及核苷酸序列测定法分析β- Fg基因启动子区的-1420G/A、-993C/T、-854G/A、-455G/A、-249C/T、-148C/T单核苷酸多态性(SNPs)和基因型,用EH+程序分析核苷酸多态性的连锁不平衡关系及单体型,用x2检验分析病例组和对照组之间的基因型频率、等位基因频率及单体型频率的差异,用MatInspeetor程序预测序列中的顺式作用元件。结果缺血性脑卒中组-455(GA+AA)、-148(CT+TT)基因型携带者急性期的血浆Fg水平比-455(GG)、-148(CC)基因型携带者高(P<0．05);脑卒中组与对照组之间的-993C/T、-455G/ A、-148C/T 3个位点的基因型频率和等位基因频率存在显著性差异(p<0．01),由-1420G、-993C、-854G、-455G、-249C、-148C构成的单体型H1在对照组中的频率高于病例组(P<0．05),由-1420A、-993T、-854G、-455A、-249T、-148T构成的单体型H14在病例组中的频率高于对照组(P <0．01);野生型序列存在6个不同于突变型的顺式作用元件,突变型序列出现9个不同于野生型的顺式作用元件。结论海南汉族人群中β-Fg-455G/A、-148C/T多态性与缺血性脑卒中急性期血浆Fg升高相关,单体型H14可能是与缺血性脑卒中相关的危险因素,单体型H1可能是降低缺血性脑卒中发生风险的保护性因素,单体型与缺血性脑卒中的相关性可能是由于顺式作用元件改变所致。
- 邢宏运廖小平肖锋梁亮孙川黄仕雄陈晓丹文国强汤小兰刘国勋程爽蔡望伟
- 关键词：纤维蛋白原缺血性脑卒中连锁不平衡分析单体型
- 遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏症的研究进展被引量：1
- 2004年
- 凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)是催化凝血过程最后一步反应的凝血因子,在止血过程中起重要作用。FⅩⅢ缺乏将导致凝血块不稳定,引起出血。近年来的研究发现FⅩⅢA链和B链基因突变影响FⅩⅢmRNA、蛋白质的的表达及稳定性,引起FⅩⅢ缺乏。本文就FⅩⅢ基因突变与遗传性FⅩⅢ缺乏症关系作一综述。
- 王巍马秋玲蔡望伟
- 关键词：基因突变稳定性
- 纤维蛋白原基因单核苷酸多态性与血栓性疾病研究进展
- 2004年
- 梁亮孙川蔡望伟
- 关键词：纤维蛋白原基因多态性单核苷酸血栓性疾病
- 一种新的遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏症ⅩⅢA亚基mRNA大片段缺失的鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的分析1个遗传性凝血因子）ⅩⅢ缺乏症家系白细胞表达的凝血因子）ⅩⅢA亚基mRNA。方法采用RT—PCR、半定量RT—PCR、克隆和测序方法分析遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏症家系先证者及其亲属外周血单个核细胞的凝血因子ⅩⅢA亚基mRNA；用SWISS．MODEL分析凝血因子ⅩⅢA亚基基因突变对蛋白质结构和功能的影响。结果①先证者凝血因子ⅩⅢA亚基mRNA存在第11到第279个密码子大片段缺失（DelCD11-279），该缺失为阅读框内缺失，编码1条454个氨基酸截短的凝血因子]ⅩⅢA亚基；先证者的凝血因子）ⅩⅢA亚基mRNA表达量明显减少；②三维结构分析显示DelCD11—279的凝血因子ⅩⅢA亚基mRNA所编码1条464个氨基酸截短的凝血因子ⅩⅢA亚基蛋白缺乏部分活性肽、B一夹层区和部分催化中心区，不能形成正常的催化中心，缺乏转谷氨酰胺酶活性。结论凝血因子）ⅩⅢA亚基mRNADelCD11—279与遗传性凝血因子）ⅩⅢ缺乏相关，该家系患者凝血因子）ⅩⅢA亚基基因表达水平降低是导致凝血因子）ⅩⅢ缺乏的原因之一。
- 马秋玲周克元周鹏蔡望伟
- 关键词：DNA突变分析
