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国家自然科学基金(81172048)

作品数：14 被引量：53H指数：4
相关作者：宋慧娟苏荣健刘婷婷李丹宋佳更多>>
相关机构：锦州医科大学辽宁医学院锦州市中心医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅自然科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 14篇细胞
  • 8篇蛋白
  • 7篇调节蛋白
  • 7篇葡萄糖调节蛋...
  • 7篇葡萄糖调节蛋...
  • 4篇受体
  • 4篇肿瘤
  • 3篇凋亡
  • 3篇雷公藤
  • 3篇雷公藤红素
  • 3篇激酶
  • 3篇红素
  • 3篇肺癌
  • 3篇癌细胞
  • 2篇蛋白激酶
  • 2篇增殖
  • 2篇生长因子受体
  • 2篇细胞癌
  • 2篇细胞肺癌
  • 2篇细胞侵袭

机构

  • 11篇锦州医科大学
  • 3篇辽宁医学院
  • 1篇辽宁医学院附...
  • 1篇锦州市中心医...

作者

  • 2篇宋慧娟
  • 2篇苏荣健
  • 1篇谷艳娇
  • 1篇叶丽平
  • 1篇宋佳
  • 1篇李丹
  • 1篇包翠芬
  • 1篇张敬坤
  • 1篇赵颂
  • 1篇刘婷婷

传媒

  • 5篇吉林大学学报...
  • 3篇中国医科大学...
  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇重庆医科大学...
  • 1篇中药新药与临...
  • 1篇西安交通大学...
  • 1篇中药药理与临...
  • 1篇解放军医学院...

年份

  • 1篇2021
  • 2篇2020
  • 4篇2019
  • 4篇2018
  • 1篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
葡萄糖调节蛋白78对L858R突变的非小细胞肺癌erlotinib敏感性的影响
2018年
目的观察葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对L858R突变非小细胞肺癌对erlotinib敏感性的影响。方法应用基因转染技术干预H3255细胞中GRP78及其突变体的表达,应用MTT方法检测erlotinib对细胞增殖的抑制情况,应用流式细胞术和FITCTUNEL分析凋亡情况,应用免疫印迹技术检测表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)的表达及磷酸化水平。结果过表达GRP78及其多肽结合结构域删除的突变体降低H3255细胞对erlotinib的敏感性,抑制erlotinib诱导的细胞凋亡,促进EGFR、ERK的磷酸化。结论 GRP78通过其ATPase结构域促进非小细胞肺癌细胞对erlotinib耐药。
王倩文徐振华王志静苏荣健陈学军谷艳娇
关键词：葡萄糖调节蛋白78非小细胞肺癌表皮生长因子受体ERLOTINIB
抗体封闭细胞表面GRP78抑制厄洛替尼耐药性口腔舌鳞状细胞癌细胞的生长和转移
2019年
目的观察应用特异性抗体封闭细胞表面葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对厄洛替尼耐药的口腔舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞生长的抑制作用。方法应用GRP78特异性抗体处理厄洛替尼耐药性舌鳞癌细胞(TCA-8113-ER),采用MTT方法和克隆形成实验检测抗体封闭对TCA-8113-ER细胞增殖情况及其对厄洛替尼反应性的影响,in-cell Western技术检测GRP78在TCA-8113-ER细胞表面的表达,流式细胞术检测TCA-8113-ER细胞凋亡情况,划痕法和Transwell法检测TCA-8113-ER细胞侵袭和转移情况,Western blotting检测c-MET、AKT和STAT3表达及磷酸化水平。结果GRP78特异性抗体可以抑制TCA-8113-ER细胞的生长,促进其凋亡,增强其对厄洛替尼的反应性,抑制其侵袭和转移,抑制c-MET、AKT和STAT3的磷酸化。结论抗体封闭细胞表面GRP78能够抑制厄洛替尼耐药性舌鳞癌细胞的生长、侵袭和转移,增加其对厄洛替尼的敏感性。
商家炜徐振华黄克强王月王志静苏荣健
关键词：舌鳞状细胞癌获得性耐药厄洛替尼
葡萄糖调节蛋白78对人舌癌细胞侵袭的影响及其机制被引量：3
2015年
目的探讨葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,Grp78)对人舌癌细胞系Tca-8113侵袭的影响及其分子机制。方法应用pc DNA3.1(+)-Grp78重组质粒转染舌癌细胞系Tca-8113筛选得到稳定表达Grp78的克隆(78C6),再应用si RNAGrp78转染78C6敲除Grp78表达,应用Transwell实验分析其侵袭能力,免疫荧光和细胞伸展实验检测细胞骨架排列和细胞伸展情况,GST-pulldown技术对Rac1和Rho A活性进行分析,Western blot检测Rac1、Rho A、MMP-9和MMP-2的表达。结果 Transwell实验结果显示,特异性上调Grp78表达明显促进舌癌细胞的侵袭,并且这种促进作用可以被si RNA-Grp78转染抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。进一步的研究发现,与对照组相比,Grp78高表达可以促进舌癌细胞Tca-8113的伸展和极性形成,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞骨架染色结果表明特异性上调Grp78后,细胞骨架微丝主要分布于细胞边缘,而这种作用可以被si RNA-Grp78转染抑制,导致细胞皮质部位出现明显的应力纤维。GST-pulldown结果表明,与对照组相比,Grp78高表达使Rac1的活性水平增高,Rho A活性降低,而si RNA-Grp78转染的细胞中Rac1活性降低,Rho A活性升高。Western blot研究显示,与对照组相比,Tca-8113/Grp78细胞中MMP-2和MMP-9表达增高(P<0.05),si RNA-Grp78转染的细胞中MMP-2和MMP-9表达降低(P<0.05),而Rho A和Rac1的表达前后无变化。结论 Grp78通过激活Rac1抑制Rho A活性及上调MMP-2和MMP-9表达来促进舌癌Tca-8113细胞的侵袭。
宋佳宋慧娟李丹刘婷婷叶丽平
关键词：TCA-8113
葡萄糖调节蛋白78对肝癌细胞放射敏感性的调控作用及其机制被引量：1
2021年
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对肝癌细胞放射敏感性的影响,初步阐明其分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测肝癌SMMC-7721、HepG2、PLC、Huh7和QGY-7703细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平,筛选GRP78高表达和低表达的肝癌细胞作为研究对象。采用RNA干扰技术在GRP78高表达的人肝癌SMMC-7721细胞中靶向沉默GRP78,命名为siGRP78-SMMC-7721(siGRP78组),以siNC-SMMC-7721为对照组(siNC组);采用基因重组技术在GRP78低表达的人肝癌HepG2细胞中过表达GRP78,命名为Flag-GRP78-HepG2(Flag-GRP78组),以空载体3×Flag-HepG2为对照组(3×Flag组)。各组细胞分别给予0、2、4、6、8和10 Gy剂量X射线照射后,采用MTT法检测肝癌细胞存活率,5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)荧光染色法检测肝癌细胞增殖率,Western blotting法检测肝癌细胞中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法和Western blotting法检测,SMMC-7721细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平最高,HepG2细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达水平最低,选取SMMC-7721和HepG2细胞作为研究对象。MTT法检测,随着放射剂量的增加,肝癌细胞存活率逐渐降低;与siNC组比较,6 Gy以上剂量X射线照射后,siGRP78组细胞存活率明显降低(P<0.01);与3×Flag组比较,4 Gy以上剂量X射线照射后,Flag-GRP78组细胞存活率明显升高(P<0.05或P<0.01)。EdU荧光染色法检测,与siNC组比较,siGRP78组细胞增殖率明显降低(P<0.05);与3×Flag组比较,Flag-GRP78组细胞增殖率明显升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与siNC组比较,siGRP78组细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与3×Flag组比较,Flag-GRP78组细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:高表达水平的GRP78可降低肝癌细胞放射敏感性,其作用机制可能与GRP78激活PI3K/Akt信号通路有关。
杨洁贺武斌安妮孔雯聪苏荣健王学哲
关键词：葡萄糖调节蛋白78肝肿瘤细胞凋亡磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B
人葡萄糖调节蛋白78基因磷酸化位点的真核突变载体的构建及表达
2014年
目的构建人葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)基因编码区磷酸化位点的真核突变载体,并在肝癌SMMC-7721细胞中进行表达。方法利用定点诱变技术将GRP78基因的两个磷酸化位点进行突变,即203位苏氨酸(T)用丙氨酸(A)替换,466位酪氨酸(Y)用苯丙氨酸(F)替换,以质粒pEGFP-N1-GRP78为模板,进行PCR扩增后,构建突变质粒pEGFP-N1-GRP78(T203A)、pEGFP-N1-GRP78(Y466F)和pEGFP-N1-GRP78(T203A/Y466F),并进行DNA测序分析。将测序正确的突变质粒转染肝癌SMMC-7721细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,Western blot法检测融合蛋白在细胞中的表达。结果突变质粒pEGFP-N1-GRP78(T203A)、pEGFP-N1-GRP78(Y466F)和pEGFP-N1-GRP78(T203A/Y466F)经双酶切及测序鉴定,证明构建正确;突变质粒组荧光蛋白表达分布于细胞质内,细胞核内无表达产物分布;3个突变质粒转染组在相对分子质量约105 000处均可见目的蛋白条带,大小与预期相符。结论成功构建了人GRP78单突变T203A、Y466F和双突变T203A/Y466F真核表达载体,并可在肝癌SMMC-7721细胞中表达,为进一步研究GRP78基因磷酸化位点T203、Y466在肝肿瘤侵袭和转移中的作用奠定了基础。
宋慧娟赵颂苏荣健
关键词：葡萄糖调节蛋白78磷酸化位点定点诱变真核细胞基因表达
雷公藤红素通过逆转EMT抑制SKOV-3细胞的侵袭转移被引量：9
2018年
目的:探讨雷公藤红素对卵巢癌SKOV-3细胞侵袭转移的抑制作用及机制。方法:应用MTT、Transwell小室实验、划痕修复实验测定细胞的增殖、侵袭、转移能力; Western blot法检测各组相关蛋白的表达。结果:MTT显示雷公藤红素抑制SKOV-3细胞增殖,呈时间和剂量依赖性; Transwell小室实验显示空白组、TGF-β1组、TGF-β1+雷公藤红素(0. 24、0. 36、0. 48mg/L)组、TGF-β1+SIS3 HCI组(n=3)侵袭细胞数分别为262±5、345±7、305±4、147±6、83±5、189±8;划痕修复实验显示各组细胞12h迁移率为(41±3)%、(56±5)%、(33±5)%、(24±2)%、(13±3)%、(31±4)%,24h迁移率为(54±6)%、(67±5)%、(42±1)%、(37±3)%、(28±7)%、(40±5)%,与模型组比较有显著差异; Western blot显示,与空白组相比,TGF-β1组E-Cadherin表达下调,Vimentin、Fib、Snail表达上调;与TGF-β1组相比,TGF-β1+雷公藤红素(0. 24、0. 36、0. 48mg/L)组和TGF-β1+SIS3 HCI组E-Cadherin表达上调,Vimentin、Fib、Snail表达下调,同时p-Smad2/3的表达亦明显下调,Smad2/3表达显著上调。结论:雷公藤红素抑制SKOV-3细胞的侵袭转移,机制可能是通过阻断TGF-β/Smad信号通路,逆转细胞EMT的发生。
张亚南何冰玉苏荣健齐凤杰张蕴莉
关键词：雷公藤红素TGF-Β1卵巢癌EMT
外分泌葡萄糖调节蛋白78对肝细胞癌侵袭的影响被引量：4
2018年
目的观察肝细胞癌细胞外分泌葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对肝细胞癌侵袭的影响。方法应用重组GRP78处理肝细胞癌细胞(SMMC7721和PLC5),采用Transwell方法检测肝细胞癌细胞侵袭,共聚焦显微镜技术观察侵袭伪足的形成情况,免疫印迹技术检测Cortactin、FAK和Src表达及磷酸化水平。结果重组GRP78可以促进肝细胞癌细胞侵袭,促进侵袭伪足形成和Cortactin、FAK、Src磷酸化,应用表皮生长因子受体(EGFR)抗体阻断可以抑制重组GRP78对肝细胞癌细胞侵袭的促进作用。结论肝细胞癌细胞外分泌GRP78可以促进肝细胞癌侵袭,EGFR在该过程中可能发挥重要作用。
王月徐振华苏荣健
关键词：表皮生长因子受体
巨噬细胞刺激1受体抑制剂BMS777607对肺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
2020年
目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制。方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞14 d,同时设对照组,采用克隆形成实验观察各组细胞克隆形成情况并检测各组细胞增殖率;不同浓度(10和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞24 h,同时设对照组,采用EdU掺入法检测各组细胞中EdU阳性细胞率;不同浓度(1、5、10、15和20μmol·L^-1)BMS777607处理A549细胞48 h,同时设对照组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、聚酰苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、活化型PARP(Cleaved-PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase 9)和活化型Caspase 9(Cleaved-Caspase 9)蛋白表达水平。结果:MTT实验,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。克隆形成实验,与对照组比较,10μmol·L^-1 BMS777607组细胞克隆形成数量明显减少,20μmol·L^-1 BMS777607组细胞几乎无克隆形成;与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01)。EdU掺入法实验,与对照组比较,10和20μmol·L^-1 BMS777607组细胞中EdU阳性细胞率均明显降低(P<0.05或P<0.01)。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L^-1 BMS777607组A549细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase 9蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:MST1R抑制剂BMS777607能够抑制肺癌A549细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与�
贾答淇孔雯聪苏荣健杜晓媛贺武斌
关键词：肺肿瘤磷酸化蛋白激酶B
雷公藤红素对胃癌细胞增殖及有氧糖酵解的影响被引量：12
2019年
目的探究雷公藤红素对胃癌细胞BGC-823增殖及有氧糖酵解的影响。方法BGC-823细胞经雷公藤红素处理后,CCK8实验与克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡与周期;分光光度计法检测细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量及己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性变化;Western blot检测BGC-823细胞内葡萄糖转运体1(GLUT1)、己糖激酶Ⅱ亚型(HKⅡ)、丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)、LDH蛋白表达。结果雷公藤红素作用后,BGC-823细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加,细胞周期阻滞于G2/M期。BGC-823细胞葡萄糖利用量及乳酸生成量降低,GLUT1、HKⅡ及LDH蛋白表达下降,HK、LDH酶活性受抑制。结论雷公藤红素抑制BGC-823细胞增殖,其作用可能与抑制细胞有氧糖酵解有关。
李珂张蕴莉苏荣健安申
关键词：雷公藤红素胃癌细胞增殖有氧糖酵解
MST1R抑制剂BMS-777607对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制和凋亡诱导作用被引量：2
2020年
目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS-777607对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制。方法:采用不同浓度BMS-777607处理乳腺癌MCF-7细胞,将细胞分为对照组(0μmol·L-1 BMS-777607组)和0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0及20.0μmol·L-1 BMS-777607组。采用MTT法检测各组MCF-7细胞增殖率,克隆形成实验检测各组MCF-7细胞存活率,EDU成像和EDU流式细胞术检测各组MCF-7细胞增殖率,Hoechst33342染色法检测各组MCF-7细胞凋亡形态表现,流式细胞术检测各组MCF-7细胞凋亡率,Western blotting法检测各组MCF-7细胞中ERK、p-ERK、Akt、p-Akt、PARP、Cleaved PARP、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Caspase-9和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平。结果:MTT检测,与对照组比较,5和10μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。克隆形成实验,与对照组比较,5和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞存活率升高(P<0.05或P<0.01)。EDU掺入法检测,与对照组比较,10和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。Hoechst33342荧光染色,对照组MCF-7细胞核淡染,10μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞核少部分浓染、明亮,20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞核大部分浓染,细胞核染色质固缩、明亮。双染流式细胞术检测,与对照组比较,10和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞凋亡率降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L-1BMS-777607组MCF-7细胞中p-ERK和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),PARP、Cleaved PARP、Bax、Cleaved Caspase-3及Cleaved Caspase-9蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:MST1R抑制剂BMS-777607能够抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制与抑制p-ERK和p-Akt表达和促进Cleaved PARP、Bax、Cleaved Caspase-9及Cleaved Caspase-3表达有关。
孔雯聪贺武斌苏荣健贾答淇谷艳娇王月杜晓媛
关键词：乳腺肿瘤细胞增殖
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