国家自然科学基金(81172210)
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 相关作者:黄卫国张志伟朱媛李跃华苏菊更多>>
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- 鼻咽癌顺铂耐药细胞系的建立及其耐药性变化被引量:4
- 2013年
- 目的通过顺铂(cDDP)浓度递增法建立鼻咽癌耐药的细胞株CNE2/cDDP,并研究其耐药性变化。方法采用cDDP浓度递增法建立鼻咽癌顺铂耐药细胞系CNE2/cDDP,倒置显微镜进行形态学观察,MTT检测CNE2/cDDP细胞系对不同化疗药物的耐药性。结果 MTT研究发现在不同药物(顺铂、长春新碱、卡铂、紫杉醇、5-FU)作用下,CNE2/cDDP较CNE2的IC50值及耐药指数均有明显的增加,CNE2/cDDP细胞对顺铂的耐药性最强,增加到200.6倍,对5-Fu的耐药性最差,增加到2.8倍;耐药细胞株CNE2/cDDP较非耐药细胞株CNE2生长速度减慢,其细胞倍增时间由18 h增加到24 h;CNE2/cDDP细胞体积较CNE2为小,常呈克隆聚集现象。结论CNE2/cDDP具有多药耐药性,是一个理想的用于鼻咽癌的多药耐药研究的细胞系。
- 唐三元黄卫国朱媛苏菊陈琳殷耒兰李跃华
- 关键词:顺铂鼻咽癌
- miR-142-3p通过靶向CD_(133)抑制鼻咽癌细胞和鼻咽癌干细胞生长的效果研究被引量:3
- 2017年
- 目的明确miR-142-3p能否通过靶向CD_(133)的表达进而抑制鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力,探讨miR-142-3p在抑制肿瘤生长中的分子机制。方法于2015年7月—2016年9月,构建CD_(133)mRNA 3'-UTR荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统观察miR-142-3p对CD_(133)mRNA 3'-UTR荧光素酶活性的影响。将对照control、CD_(133)siRNA及miR-142-3p模拟物各40μmol/L分别转染至鼻咽癌CNE2细胞,采用Western blotting法检测其对CD_(133)表达水平的影响;设立阴性对照组[瞬时转染对照control(40μmol/L)]、阳性对照组[瞬时转染CD_(133)siRNA(40μmol/L)]、miR-142-3p组[瞬时转染miR-142-3p模拟物(40μmol/L)]、联合组[瞬时共转染miR-142-3p模拟物(40μmol/L)和pc DNA3.1(+)-CD_(133)0.8μg],MTS法检测4组对CNE2细胞增殖活性的影响,Transwell法检测4组对CNE2细胞侵袭能力的影响,干细胞成球实验检测阴性对照组和miR-142-3p组对CNE2干细胞成球能力的影响。结果单光子荧光素酶活性检测结果显示,无miR-142-3p转染的p CD_(133)-Wt型细胞荧光素酶活性为(0.924±0.107),miR-142-3p转染的p CD_(133)-Wt型细胞荧光素酶活性为(0.535±0.035),两者比较,差异有统计学意义(t=7.924,P=0.022)。Western blotting法检测结果显示,阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组CD_(133)表达水平比较,差异有统计学意义(F=12.44,P<0.05);其中阳性对照组和miR-142-3p组CD_(133)表达水平低于阴性对照组(P<0.05)。阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组、联合组CNE2细胞数量比较,差异有统计学意义(F=16.78,P<0.05);其中阳性对照组和miR-142-3p组CNE2细胞数量低于阴性对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验检测结果显示,阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组、联合组穿过基质胶的CNE2细胞数量比较,差异有统计学意义(F=13.19,P<0.05);其中阳性对照组和miR-142-3p组穿过基质胶的CNE2细胞数量低于阴性对照组(P<0.05)。阴性对照组和miR-142-3p组干细胞成球数量比�
- 汤国辉张志伟黄卫国谢运杰刑佼涛贺修胜
- 关键词:鼻咽肿瘤肿瘤干细胞细胞侵袭
- 微小RNA-150对鼻咽癌细胞放疗抵抗的影响研究
- 2016年
- 目的探讨微小RNA(miR)-150对于鼻咽癌细胞放疗抵抗的影响,并分析其机制。方法 2014年1月—2015年6月,建立放疗抵抗的鼻咽癌细胞株CNE-2R。取CNE-2和CNE-2R,通过克隆形成实验计算不同放疗剂量下(0、3、6 Gy)的克隆形成率(PE)、细胞存活率,采用MTS法检测照射1、2、3、4、5 d时的细胞增殖活性,实时定量荧光聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测miR-150、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)mRNA水平,Western blotting法检测GSK3β水平。将CNE-2随机分为miR-150模拟物组(转染miR-150模拟物)、微小RNAs(miRs)无关序列组(转染miRs无关序列),通过荧光素酶报告载体实验检测荧光素酶活性。结果 0 Gy放疗剂量时,CNE-2与CNE-2R的PE、细胞存活率比较,差异无统计学意义(P〉0.05);3 Gy、6 Gy放疗剂量时,CNE-2R的PE、细胞存活率高于CNE-2(P〈0.05)。照射1-5 d时,CNE-2R的细胞增殖活性高于CNE-2(P〈0.05)。CNE-2R中miR-150水平高于CNE-2,GSK3βmRNA水平低于CNE-2(P〈0.05)。CNE-2R中GSK3β水平低于CNE-2(P〈0.05)。转染GSK3β野生型质粒后,miR-150模拟物组荧光素酶活性低于miRs无关序列组(P〈0.05);转染GSK3β突变型质粒后,miRs无关序列组与miR-150模拟物组荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论miR-150参与了鼻咽癌细胞的放疗抵抗,GSK3β是miR-150的直接靶基因,miR-150-GSK3β轴可能成为一种新的用于合理治疗鼻咽癌的策略。
- 张先锋黄远见肖娟张志伟黄卫国
- 关键词:鼻咽肿瘤放射疗法
- circFIP1L1海绵吸附miR-1253调控SFN影响鼻咽癌放疗敏感性
- 目的:揭示circFIP1L1在鼻咽癌(NPC)放疗中的作用,阐明circFIP1L1-miR-1253-SFN信号轴在NPC放射治疗中的分子机制,为逆转NPC放射抗性,提高放疗效果,为临床NPC放射治疗提供有效的靶点。...
- 姜涛
- 关键词:鼻咽癌
- 环状RNA与头颈部肿瘤被引量:1
- 2019年
- 环状RNA是一类共价闭合的环状非编码RNA,在各种组织和细胞中丰富且稳定,具有高度的组织特异性。研究发现,环状RNA分子具有microRNA(miRNA)海绵,RNA结合蛋白(RBP)海绵和调节蛋白质的转录和翻译的功能,从而在疾病的发生和发展中起重要作用。头颈部肿瘤(HNC)部位的特异性和治疗的复杂性导致HNC患者的生活质量普遍较低。为了提高对HNC的认识,寻求更好的治疗方法,提高患者的生活质量,因此本文综述了近年来环状RNA的研究进展及其在HNC中的作用,为HNC的治疗提供了新的思路。
- 姜涛雷芳红黄蕴黄卫国
- 关键词:头颈部肿瘤