国家自然科学基金(81160314)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 相关作者:周洁王光文刘云龙梁宪玲王启辉更多>>
- 相关机构:广西医科大学第一附属医院内蒙古医学院附属人民医院广西医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶联物的制备及活性鉴定被引量:2
- 2013年
- 目的制备穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶联物并鉴定其穿膜活性和酶活性。方法采用异型双功能交联剂N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫)-丙酸酯(SPDP)将穿膜肽—增强型绿色荧光蛋白融合蛋白(CPPs-EGFP)、β-葡萄糖苷酶进行共价交联,经Ni-NAT Superflow Cartridge、Sephadex G-75层析柱分离纯化。采用还原型和非还原型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对偶联物进行鉴定;偶联物与膀胱癌EJ细胞共同孵育,置于荧光显微镜下观察,鉴定其穿膜活性;采用β-葡萄糖苷酶测试盒(DBGD-100)鉴定其酶活性。结果偶联物SDS-PAGE非还原型电泳高分子量端可见明显条带,而还原型电泳分别在穿膜肽和β-葡萄糖苷酶分子量相应位置可见明显条带;在荧光显微镜下与偶联物共同孵育后的膀胱癌EJ细胞内可见明显绿色荧光;用β-葡萄糖苷酶测试盒(DBGD-100)测定,偶联物仍然保持良好的酶活性,约为同等浓度β-葡萄糖苷酶活性的80%。结论应用SPDP成功制备了穿膜肽-β-葡萄糖苷酶偶联物,并且偶联物保持良好穿膜活性和酶活性。该方法有助于解决酶—前药系统药物难以进入细胞内的问题。
- 王光文周洁王启辉刘云龙
- 关键词:穿膜肽Β-葡萄糖苷酶偶联物
- 预见性护理在膀胱手术患者中的应用价值被引量:6
- 2013年
- 目的探讨膀胱手术患者的预见性护理措施和临床疗效。方法选取我院2006年2月~2011年2月收治的膀胱手术患者70例,并按患者入院时间随机分为A、B组,每组各35例,对A组患者给予各种预见性护理措施(包括对患者手术前的心理护理、术后病情及并发症的护理、患者出院后的护理指导及随访调查等一系列护理措施);对B组患者则不进行预见性护理。结果实施预见性护理措施的患者与没进行护理措施的患者相比,患者的恢复情况好,采取预见性护理的患者术后并发症的总发生率明显低于未采取预见性护理的患者,且采取预见性护理的患者均具有良好的自理能力。其中A组中有3例患者出现术后并发症,而B组患者中出现术后并发症的有14例。A组中仅有1例患者术后行动能力恢复差,其余患者的听、说及行动能力恢复好,B组中有11例患者恢复较差,恢复好的患者24例,差异有统计学意义(P<0.05)。结论预见性护理对膀胱手术患者具有重要的应用价值,值得在临床推广。
- 梁宪玲周洁
- 关键词:预见性护理膀胱手术
- 西妥昔单抗-β葡萄糖苷酶偶联物的制备及鉴定
- 2014年
- 目的制备西妥昔单抗-β葡萄糖苷酶偶联物并鉴定其酶活性与抗体活性。方法采用4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(Sulfo-SMCC)将西妥昔单抗、β-葡萄糖苷酶进行共价交联。采用非还原型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、比色法、间接免疫荧光法对偶联物进行鉴定并检测β-葡萄糖苷酶、西妥昔单抗的活性。结果在电泳图上可分别见到β葡萄糖苷酶、西妥昔单抗、西妥昔单抗-β葡萄糖苷酶偶联物的清晰条带。比色法测定结果显示,西妥昔单抗-β-葡萄糖苷酶偶联物的酶活性低于β-葡萄糖苷酶(U/L:672.97±46.19 vs869.50±57.28,t=5.972,P<0.05),但仍保持良好的酶活性。在荧光显微镜下可见到与偶联物共同作用的人膀胱癌EJ细胞带有红色荧光。结论 Sulfo-SMCC可成功将西妥昔单抗、β-葡萄糖苷酶偶联,且偶联物仍能保持良好的酶活性与抗体活性。
- 刘云龙周洁王光文聂振
- 关键词:西妥昔单抗Β-葡萄糖苷酶偶联物膀胱肿瘤