国家自然科学基金(C03031101)
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 相关作者：梅陵宣赵春晖操小马周巍张嘉更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学附属口腔医院南京医科大学附属口腔医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨保护素基因修饰的Beagle犬骨髓基质细胞在牙周组织再生中的作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察骨保护素(OPG)基因修饰的骨髓基质细胞(BMSCs)复合PLGA材料移植对牙周骨缺损的修复作用。方法4只成年Beagle犬,选其24颗前牙丝线结扎饲以高糖饮食构建牙周病模型。翻瓣检查修整近中牙槽骨缺损至3mm,实验牙分为3组:实验组(缺损处植入OPG基因修饰的BMSCs复合PLGA)、阴性对照组(缺损处植入BMSCs复合PLGA)、空白对照组(常规牙周翻瓣治疗)。6周后临床、X线片观察,切片组织学观察,统计学分析相关数据。结果OPG基因修饰的BMSCs明显促进骨缺损的修复,组织学评分与两对照组相比差异有显著性(P<0.01)。结论OPG能有效促进犬牙周骨缺损的骨组织再生。
- 张嘉梅陵宣
- 关键词：骨髓细胞
- 老年人牙菌斑中变形链球菌临床分离株的基因型分析
- 2009年
- 目的:探讨老年高龋和无龋人群牙菌斑中变形链球菌临床分离株基因型与龋病的关系。方法:将79例老年人分为高龋组(55例)和无龋组(24例),从两组个体口腔牙菌斑中分离鉴定出263株和102株变形链球菌(血清型c),用细菌DNA提取盒提取细菌染色体DNA,经多次实验自行确定AP-PCR反应条件,对获得的变形链球菌(血清型c)临床分离株进行遗传型分析。结果:两组同一个体临床分离株共发现了101种不同基因型。高龋组同一个体口腔中定植不同基因型菌株的数量与无龋组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:不同个体分离出的变形链球菌菌株间具有明显的遗传多态性;个体携带不同基因型菌株的数量与其致龋性有密切关系。
- 方会清吴补领沈卫赵红萍邓爱停
- 关键词：牙菌斑变形链球菌基因老年人龋病易感性
- 骨保护素基因修饰联合细胞移植技术促进牙周组织再生的实验研究被引量：6
- 2010年
- 目的观察骨保护素(OPG)基因修饰的自体骨髓基质细胞(BMSCs)联合细胞移植技术促进Beagle犬牙周组织再生的情况,为探索基因治疗牙周病提供依据。方法将真核分泌表达穿梭载体pSecTag2/B-opg瞬时转染第3代自体犬BMSCs后,采用免疫化学和Westernblot的方法检测OPG蛋白的表达,倒置相差显微镜和扫描电镜观察转染后的BMSCsOPG在聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架上的黏附、聚集情况。选用4只成年Beagle犬,将其下颌双侧第2、3、4前磨牙作为实验牙,在每颗牙的颊侧构建牙槽骨缺损4mm×4mm×3mm,并随机分为4组,即BMSCsOPG-PLGA(转染后细胞复合支架组)、BMSCs-PLGA(未转染细胞复合支架组)、PLGA(支架对照组)、空白对照组。术后6周处死动物,组织学观察,测量新生牙槽骨(NB)、新生牙骨质高度(NC)、新生结缔组织的附着(CT)量。测量结果以SPSS15.0软件包进行q检验。结果免疫细胞化学和Westernblot鉴定结果证实,转染细胞内有OPG蛋白的高表达。扫描电镜显示BMSCs可以在材料表面、孔洞中良好地黏附、迁移,术后6周组织学观察可见转染后细胞复合支架组新生牙槽骨接近正常骨结构;未转染细胞复合支架组可见少量新生牙槽骨,胶原纤维丰富;支架对照组和空白对照组无明显硬组织形成。新生组织测量结果显示:转染后细胞复合支架组NB、NC、CT较对照组均显著增加(P<0.05)。结论 BMSCsOPG-PLGA细胞支架复合物联合细胞移植技术能显著促进犬牙周缺损的组织再生,为基因治疗联合组织工程治疗牙周缺损提供可能性。
- 周巍赵春晖梅陵宣
- 关键词：骨保护素基因治疗牙周缺损
- cdt基因亚基cdtA的克隆及其原核表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- 目的:进行伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)cdtA基因的克隆并构建其原核表达载体,为进一步研究CdtA蛋白功能以及CDT全毒素的功能做准备。方法:从AaATCC29522中通过PCR获得cdtA基因片段,克隆到中间载体pMD19-TVector中,再经双酶切得到cdtA片段克隆到原核表达载体pET-15b中,得到融合表达载体pET-15b-cdtA。结果:成功构建pET-15b-cdtA,经PCR鉴定以及测序鉴定插入cdtA基因序列正确,阅读框架完整,未发现突变。结论:成功克隆了cdtA基因,并在原核载体上得以表达。
- 李璐徐艳王晓茜杨迷芳段君兰
- 关键词：原核表达载体
- 骨保护素基因修饰的大鼠骨髓基质细胞系的培养与鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的培养经骨保护素OPG修饰的大鼠骨髓基质细胞系并检测其表达能力,鉴定表达产物,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础。方法利用已构建的pSecTag-OPG真核分泌表达穿梭载体,用脂质体法将目的基因转染至大鼠骨髓基质细胞,应用免疫组织化学和Westernblot方法证实转染的细胞表达骨保护素。结果经免疫组织化学和Westernblot方法检测,在转染OPG的大鼠骨髓基质细胞中有OPG表达。结论本实验成功培养出分泌表达OPG的大鼠骨髓基质细胞系。
- 吴迪赵春晖梅陵宣
- 关键词：成骨细胞骨髓细胞基因
- 骨保护素修饰的Beagle犬骨髓基质细胞表达体系的建立与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的利用pSecTag2/B-OPG真核分泌表达穿梭载体,建立经骨保护素基因(OPG)修饰的Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)瞬时表达体系并检测其表达能力,为基因工程与组织工程联合治疗牙周病提供细胞基础。方法体外分离、培养Beagle犬BMSC,通过脂质体法将已鉴定的目的基因瞬时转染至BMSC,并用RT-PCR鉴定OPG是否有转录,同时通过Westernblot方法检测OPG在6周内的表达水平。结果重组质粒pSecTag2/B-OPG经HindⅢ单酶切及EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,电泳显示切下的片段均与预期大小相符,经测序证实此基因与GeneBank中[gi:33878056]提供的序列一致;鉴定正确的重组质粒在BMSC中有转录,并且在39d内都明显有OPG表达。结论建立了骨保护素基因修饰的骨髓基质细胞瞬时表达体系。
- 赵春晖操小马梅陵宣
- 关键词：成骨细胞骨髓基质细胞基因表达
- 重组质粒pSecTag2/B-OPG在Beagle犬骨髓基质细胞中表达与鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的转染骨保护素（OPG）基因至Beagle犬骨髓基质细胞（BMSCs）中，并检测其表达能力，为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础。方法穿刺抽取成年Beagle犬骨髓2～3ml，通过全骨髓贴壁法获取BMSCs。传代至第3代，脂质体瞬时转染经鉴定的重组pSecTag2／B-OPG，并用RTPCR、Western blot检测OPG的表达水平。结果重组质粒pSecTag2／B-OPG经HindⅢ单酶切及EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切，电泳显示切下的片段均与预期大小相符，经测序证实此基因与GenBank中提供的序列[gi：33873056]一致；RTPCR、Western blot结果显示：重组pSecTag2／B-OPG在骨髓基质细胞中有表达。结论成功建立了OPG基因修饰的骨髓基质细胞瞬时基因表达体系。
- 操小马赵春晖梅陵宣
- 关键词：骨髓细胞骨保护素BEAGLE犬
