国家自然科学基金(81160321) 作品数:13 被引量:38 H指数:3 相关作者: 韦薇 刘剑仑 杨华伟 蒋奕 唐玮 更多>> 相关机构: 广西医科大学附属肿瘤医院 广西医科大学 柳州市人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
同时性双侧原发性乳腺癌的临床病理特征、分子分型及预后分析 被引量:8 2019年 目的分析同时性双侧原发性乳腺癌(SBPBC)的临床病理特征、分子分型及预后特点。方法 SBPBC患者44例(SBPBC组,根据肿瘤组织体积大小分为第一癌和第二癌),单侧原发性乳腺癌(UPBC)患者132例(UPBC组),对两组患者的临床病理资料、分子分型、治疗随访结果作对比分析。结果 SBPBC组44例患者中,年龄≤50岁者32例,有家族史者30例,绝经者9例(9/44); UPBC组132例患者中,年龄≤50岁者45例,有家族史者34例,绝经者81例;两组相比,P均<0. 05。SBPBC组第一癌、第二癌和UPBC组T2期患者分别为27、16和51例,SBPBC组第一癌与第二癌、UPBC组相比,P均<0. 05。SBPBC组第一癌、第二癌N2~N3期患者分别为10、3例,两者相比,P <0. 05; SBPBC组第二癌、UPBC组N0~N1期患者分别为41、106例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌、UPBC组组织学分级为Ⅱ~Ⅲ级的患者分别为40例、121例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌、UPBC组病理学分期为Ⅲ期+Ⅳ期的患者分别为17、37例,两者相比,P <0. 05; SBPBC组第二癌、UPBC组病理学分期为Ⅱ~Ⅳ期的患者分别为27、117例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌、UPBC组Ki-67阳性率≥14%的患者分别为39、87例,两者相比,P <0. 05。SBPBC组第一癌乳腺导管(Luminal) A型17例、Luminal B型23例、Her-2过表达型3例、基底样型1例,第二癌Luminal A型22例、Luminal B型19例、Her-2过表达型2例、基底样型1例; UPBC组Luminal A型45例、Luminal B型46例、Her-2过表达型13例、基底样型28例; SBPBC组第一癌、第二癌与UPBC组相比,P均<0. 05。SBPBC组、UPBC组患者中位无病生存时间分别为45个月和59个月,两组相比,P <0. 05。结论与UPBC相比,SBPBC的发病年龄低且大多数发生在绝经之前,患者多有家族史,病理分级和分期较高,以浸润性导管癌为主,分子分型以Luminal B型为主,无病生存时间较短。 韦常宏 韦薇 林思彤 陈肖瑜 陈军关键词:乳腺癌 原发性乳腺癌 双侧原发性乳腺癌 PDCD4与乳腺癌关系的研究进展 被引量:2 2016年 程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD 4)是近年来新发现的与细胞捌亡有关的肿瘤抑制基因,研究发现多种恶性肿瘤组织中PDCD4的表达呈下调或缺失,与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关,在乳腺癌的诊断和治疗中具有重要作用,本文就PCD4与乳腺癌关系的研究现状进行综述。 胡鑫 韦薇 刘剑仑关键词:PDCD4 乳腺肿瘤 抑癌基因 细胞凋亡 干扰赖氨酰氧化酶基因对乳癌 MDA-MB-231细胞生物学的影响 2013年 目的观察抑制赖氨酰氧化酶(LOX)基因表达后对MDA-MB-231细胞的生物学特性的影响。方法将细胞分为实验组、空白对照组和阴性对照组,采用病毒转染法,应用噻唑蓝(MTT)法、细胞集落形成实验、流式细胞仪和细胞侵袭迁移实验检测结果。结果24、48、72、96h3 组细胞抑制率分别是(12. 73 ±3. 30)% .(33.93 ± 1. 99)% ,(52. 63 ± 1.04)% ,(63. 80 ±0. 70)%;0、0、0、0;(7. 60 ±6. 27)%、( 10. 30 ± 1. 49)%、(9.10 ±2. 69)%、(6. 03 ± 1. 21)%,差异有统计学意义(P 〈0.05)。细胞周期时相差异无统计学意义(P〉0.05)。细胞侵袭实验结果分别为47±2、100±1、88±2,差异有统计学意义(P〈0.05);细胞迁移实验结果分别为63 ±2,118 ±2,96 ±2,差异有统计学意义(P〈0. 05) 0结论干扰LOX基因的表达可抑制MDA-MB-231细胞的生物学特性。 李德全 李景涛 刘剑仑 杨华伟关键词:乳癌 RNA干扰 生物学特性 串联亲和标签LOX蛋白慢病毒表达载体的构建及在乳腺癌细胞中的表达 被引量:1 2015年 目的:为了研究赖氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase,LOX)及其相互作用蛋白质在乳腺癌中的功能,构建带StrepⅡ/FLAG串联亲和标签的重组LOX蛋白慢病毒表达载体并在乳腺癌细胞MDA-MB-231中表达。方法:设计引物通过聚合酶链式反应获得带StrepⅡ/FLAG串联亲和标签的LOX蛋白(LOX-SF)的亲本质粒,双酶切后鉴定测序克隆至GV303表达载体,连同慢病毒包装质粒共同转染293T得到GV303/LOX-SF慢病毒,将其转染MDA-MB-231细胞,使用荧光定量PCR和蛋白质印迹实验对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测。结果:通过串联亲和纯化获得LOX-SF重组蛋白,使用标签抗体成功鉴定到LOX-SF重组蛋白在MDA-MB-231细胞内稳定表达。结论:GV303/LOX-SF的构建,使带StrepⅡ/FLAG融合标签的LOX蛋白在MDA-MB-231中成功表达及纯化,为筛选和研究LOX及其相互作用蛋白在乳腺癌细胞内的功能奠定了实验基础。 刘侠 刘剑仑 蒋奕 唐玮 杨华伟 韦薇关键词:串联亲和纯化 赖氨酰氧化酶 慢病毒载体 相互作用蛋白质 乳腺癌组织中LOX的表达变化及其与MMP-2、MMP-9、HIF-1α的关系 被引量:3 2013年 目的观察赖氨酰氧化酶(LOX)在乳腺癌组织中的表达变化,探讨其与基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的关系。方法分别应用RT-PCR和免疫组化法检测120例乳腺癌组织、癌旁乳腺组织及30例乳腺良性病变组织中的LOX mRNA和蛋白,分析乳腺癌组织中LOX表达与淋巴结转移的关系;用免疫组化法检测上述组织中的MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白,分析其在乳腺癌组织中表达与LOX的相关性。结果乳腺癌组织中LOX mRNA相对表达水平为0.44±0.08、LOX蛋白表达率为67.5%(81/120),均高于相应癌旁组织及乳腺良性病变组织(P均<0.05);伴腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中,LOX表达高于无腋窝淋巴结转移者(P=0.000);MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白在乳腺癌中的表达阳性率为70.0%(84/120)、68.3%(82/120)、61.7%(74/120),均高于相应癌旁组织及乳腺良性病变组织(P均<0.05);相关分析显示,LOX蛋白表达与MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白之间呈显著正相关(r分别为0.450、0.423、0.462,P均<0.05)。结论LOX在乳腺癌中高表达,并与淋巴结转移密切相关;它可能与MMP-2、MMP-9和HIF-1α相互作用,共同促进乳腺癌的侵袭、转移。 韦薇 刘剑仑 唐玮 杨华伟 蒋奕 刘起鹏关键词:赖氨酰氧化酶 基质金属蛋白酶 低氧诱导因子 乳腺癌组织LOX、XRCC5表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系 被引量:2 2018年 目的探讨赖氨酰氧化酶(LOX)及其相互作用蛋白X射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)在乳腺癌发生、发展中的作用。方法选择乳腺浸润性导管癌患者170例,取手术切除的乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测LOX、XRCC5表达,分析LOX阳性表达与XRCC5阳性表达的关系及二者与患者临床病理参数和预后的关系。结果乳腺癌组织LOX、XRCC5阳性表达率及其相对表达量均高于癌旁正常组织(P均<0.05)。Spearman非参数相关分析显示,乳腺癌组织LOX阳性表达与XRCC5阳性表达呈正相关关系(r=0.536,P<0.01)。LOX相对表达量与乳腺癌腋窝淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、组织病理分级无关(P均>0.05)。XRCC5相对表达量与临床分期有关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤直径、腋窝淋巴结转移、组织病理分级无关(P均<0.05)。LOX阳性表达者和(或)XRCC5阳性表达者总生存率均低于LOX阴性表达者和(或)XRCC5阴性表达者(P均<0.05)。结论乳腺癌组织LOX、XRCC5表达升高,二者表达变化可协同促进乳腺癌侵袭和转移,并有可能作为乳腺癌预后评估的指标。 柳琴 韦薇 张敏敏 杨华伟 唐玮 刘剑仑关键词:乳腺癌 赖氨酰氧化酶 临床病理特征 预后 赖氨酰氧化酶表达干扰对乳腺癌裸鼠移植瘤生长影响及机制研究 被引量:3 2013年 目的:探讨抑制乳腺癌细胞MD-MB-231中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响及可能机制。方法:设计合成特异性LOX基因慢病毒干扰载体(LOX-RNAi-LV)转染乳腺癌细胞MDA-MB-231,采用荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测LOX mRNA和蛋白的表达;建立乳腺癌裸鼠原位移植模型,观察移植瘤的生长情况。采用免疫组化方法检测移植瘤组织中LOX蛋白及肿瘤增殖、转移相关蛋白Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α的表达。结果:转染LOX-RNAi-LV的人乳腺癌细胞MDA-MB-231中LOX mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.102±0.083和0.156±0.004,与空白对照组(0.945±0.158和0.916±0.007)相比,表达率均明显下调,抑制率分别为89.2%和83.0%。裸鼠原位接种癌细胞后6d均有肿瘤生成,40d后接种转染LOX-RNAi-LV的MDA-MB-231细胞的裸鼠移植瘤体积为(108.89±26.61)mm3,质量为(0.117±0.021)g;均明显低于空白对照组(400.15±79.81)mm3,(0.433±0.068)g,以及阴性对照组(380.15±65.81)mm3,(0.404±0.053)g,差异有统计学意义,P值均为0.000。移植瘤组织中LOX、Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白相对表达水平分别为0.198±0.036、0.347±0.054、0.379±0.048、0.335±0.067和0.307±0.073,较空白对照组和阴性对照组明显降低,P值均<0.01。结论:干扰MDA-MB-231中LOX的表达,可抑制乳腺癌裸鼠移植瘤的生长侵袭,LOX可能通过调节Ki-67、MMP-2、MMP-9和HIF-1α蛋白的表达,在乳腺癌的侵袭转移中发挥作用。 韦薇 刘剑仑 李景涛 刘启鹏 蒋奕 唐玮 杨华伟关键词:乳腺肿瘤 赖氨酰氧化酶 RNA干扰 裸鼠 利用免疫共沉淀技术验证LOX与XRCC5在人乳腺癌细胞内的相互作用 2016年 目的:探讨赖氨酰氧化酶(LOX)和XRCC5在人乳腺癌细胞内是否存在相互作用。方法:构建含有LOX全长及插入LOX基因序列C端的2个StrepⅡ和一个Flag标签的慢病毒表达载体GV303/EGFP(LOX-SF),经酶切鉴定正确后,将其转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞,使用荧光定量PCR和蛋白质印迹实验对细胞中重组蛋白LOX-SF进行检测。利用免疫共沉淀技术验证LOX与XRCC5之间的相互作用,并通过间接免疫荧关分析LOX与XRCC5在MDA-MB-231人乳腺癌细胞的定位情况。结果:重组LOX蛋白在MDA-MB-231人乳腺癌细胞中稳定表达。LOX抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中检测到XRCC5,同时XRCC5抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中也检测到LOX。利用间接免疫荧光分析,LOX与XRCC5在细胞核内存在共定位。结论:LOX与XRCC5在人乳腺癌细胞内存在相互作用,并且在细胞核内共定位。 周文婷 刘剑仑 刘侠 杨华伟 韦薇关键词:LOX 免疫共沉淀 相互作用 乳腺癌组织LOX蛋白表达与腋窝淋巴结转移相关性分析 被引量:10 2017年 目的赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)是稳定细胞外基质的关键酶,主要功能是调节细胞黏附、运动及基因转录等。LOX在不同类型肿瘤中可能发挥着不同的作用。本研究通过观察LOX在腋窝淋巴结阳性乳腺癌组织中的表达,分析其与细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞增殖核抗原(nuclcar-associated antigen,Ki-67)、趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4,CXCR4)及E-钙黏素(E-cadherin)的相关性,探讨LOX在乳腺癌腋窝淋巴结转移中的作用及可能机制。方法收集广西医科大学附属肿瘤医院2013-09-01-2015-12-31住院手术切除的227例乳腺癌组织及配对的正常乳腺组织(距离癌组织>5cm)标本。采用免疫组化法检测LOX蛋白在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达,分析LOX蛋白表达与临床病理特征及腋窝淋巴结转移数目的关系,以及Cyclin D1、Ki-67、CXCR4和E-cadherin蛋白与LOX蛋白表达的相关性。结果 LOX蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率64.8%(147/227),显著高于癌旁正常乳腺组织的31.7%(72/227),χ~2=49.621,P<0.001。LOX蛋白表达与乳腺癌组织学分级、原发肿瘤大小、腋窝淋巴结状态、临床分期、ER、PR及HER2状态有关,χ~2值分别为8.312、6.183、10.597、7.950、19.731、5.221和16.648,P值分别为0.016、0.045、0.014、0.019、<0.001、0.022和0.001;而与年龄、月经状态、体质量指数和分子分型无明显相关性,均P>0.05。LOX蛋白表达与腋窝淋巴结转移数目呈正相关,r=0.199,P=0.003。LOX蛋白与Cyclin D1(r=0.476,P<0.001)、Ki-67(r=0.492,P<0.001和CXCR4蛋白(r=0.539,P<0.001)表达呈中度正相关,与E-cadherin蛋白表达呈中度负相关(r=-0.387,P<0.001)。结论 LOX蛋白在乳腺癌组织中表达升高,并与腋窝淋巴结转移相关。LOX蛋白过表达促进乳腺癌侵袭和转移,并可能通过上调Cyclin D1、Ki-67、CXCR4和下调E-cadherin表达促进腋窝淋巴结的转移。 张敏敏 韦薇 刘剑仑 杨华伟 蒋奕关键词:赖氨酰氧化酶 腋窝淋巴结 肿瘤转移 串联亲和纯化技术在研究细胞内相互作用蛋白质中的应用 被引量:1 2014年 为了进一步研究蛋白质功能并建立蛋白质在细胞内的相互作用网络,各种研究相互作用蛋白质的方法应运而生,串联亲和纯化(TAP)技术就是其中之一。TAP利用基因重组技术将标签基因融合入靶蛋白基因,转入细胞系后表达带标签的靶蛋白,使用标签的特异性对靶蛋白进行纯化和相关研究,而该技术在实际运用会遇到标签选择、标签位置的选择和重组表达等一系列问题,该文介绍TAP技术在实际使用中的技术要点。 刘侠 韦薇关键词:串联亲和纯化 相互作用蛋白质 蛋白质组学