江苏省自然科学基金(BK2005153)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 缺氧诱导因子-1α基因沉默对食管鳞癌细胞体外生长的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨食管鳞癌细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因与食管鳞癌细胞增殖活力和细胞周期的关系。方法:以RNA干扰方法构建出HIF-1α基因沉默食管鳞癌细胞株,通过Westernblot检测HIF-1α基因在细胞中的表达,通过流式细胞术分析了解HIF-1α基因沉默后细胞周期的变化,通过细胞增殖实验观察HIF-1α基因沉默细胞与对照细胞、模拟缺氧细胞增殖活性的差异。结果:细胞增殖实验发现沉默HIF-1α基因后的Eca-109细胞增殖活力较对照细胞明显低下,为对照细胞的62.6%(0.4768±0.1743vs0.7611±0.2165,P=0.012),流式细胞仪分析表明,HIF-1α基因沉默后的Eca-109细胞与对照细胞相比,G1/G0期细胞明显增加(P<0.05),G2/M期细胞变化不大,S期细胞比例明显减少。结论:核糖核酸干扰HIF-1α的表达后,能抑制鳞癌细胞的增殖活力,并可能阻滞肿瘤细胞周期,抑制HIF-1α的表达,有可能导致肿瘤生长的抑制。
- 肖斌施瑞华郝波林艳
- 关键词：食管肿瘤RNA干扰缺氧诱导因子-1Α
- 氯化钻对RNA干扰食管鳞癌细胞HIF-1α基因表达及功能的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究氯化钴模拟缺氧对RNA干扰的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因表达及功能的影响，观察在人食管鳞癌细胞系Eca-109中RNA干扰抑制HIF-1α的效果。方法选择4组细胞分别为食管癌Eca-109细胞和3株稳定转染HIF-1αSiRNA的Eca-109细胞（本实验室编号分别为H2／14号、H3／15号、H2／20号细胞），分别用200、400、600、800μmol／L氯化钴模拟缺氧，缺氧培养时间分别为12、24．48、72h，采用Western印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测HIF—1α蛋白及mRNA表达，同时Western印迹检测血红素加氧酶（HO-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、葡萄糖转运体-1（Glut-1）、P53等相关基因的表达。结果4组细胞HIF-1α蛋白表达均随氯化钴浓度加大而增加，常氧与400μmol／L氯化钴处理24h后筛选出H3／15号细胞HIF-1α蛋白表达最少，与其它3组相比差异有统计学意义（P〈0．05），mRNA检测差异无统计学意义；干扰细胞常氧下HO-1、MMP-2、Glut-1、P53表达不同程度减少，缺氧后HO-1、P53表达增加，MMP-2、Glut-1表达无明显变化。结论RNA干扰能抑制Eca-109细胞的HIF-1α基因表达，从而不同程度减少HO-1、MMP-2、Glut-1、P53等相关基因表达；经氯化钴模拟缺氧筛选出干扰效果较好的一株细胞，为进一步研究HIF-1α的功能奠定了基础。
- 张捷施瑞华肖斌杜琰萍张国新郝波
- 关键词：小分子干扰缺氧诱导因子1Α亚基食管肿瘤细胞缺氧
- HIF-1α基因沉默对食管鳞癌细胞功能性基因的影响
- 2008年
- 目的观察食管鳞癌细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因与血管内皮生长因子(VEGF)、血红素加氧酶(HO-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因之间的关系及其对细胞周期的影响。方法以HIF-1α基因沉默的Eca-109细胞、化学模拟缺氧细胞及未干预细胞为研究对象,通过Western blot检测VEGF、HO-1、MMP-2基因在三种细胞中的表达差异以了解其与HIF-1α基因的关系,并通过流式细胞术分析了解HIF-1α基因沉默后细胞周期的变化。结果Western blot检测发现,同空白及模拟缺氧组比较,HIF-1α基因沉默后HIF-1α蛋白表达明显下调,同时VEGF、HO-1、MMP-2的蛋白表达均出现了明显下降。流式细胞分析表明,HIF-1α基因沉默后的Eca-109细胞组同对照组相比G1、G0期细胞明显增加,G2、M期细胞变化不大,S期细胞比例明显减少。结论HIF-1α与上述三种基因存在明显相关性,进而可能影响着食管鳞癌的血管生成、侵袭、应激保护等生物学行为,HIF-1α沉默可将食管鳞癌细胞阻滞于G、G期。
- 肖斌施瑞华杜琰萍郝波林艳
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α血红素加氧酶基质金属蛋白酶-2
