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国家教育部博士点基金(20070286042)

作品数：10 被引量：28H指数：4
相关作者：高峰程坚陈宝安高冲丁家华更多>>
相关机构：东南大学江苏大学附属人民医院医学部更多>>
发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金江苏省科技计划项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 9篇细胞
  • 7篇K562/A...
  • 6篇耐药
  • 5篇K562/A...
  • 4篇多药
  • 4篇多药耐药
  • 4篇基因
  • 4篇白血
  • 4篇白血病
  • 3篇尼洛替尼
  • 3篇甲素
  • 3篇汉防己
  • 3篇汉防己甲素
  • 3篇防己
  • 2篇柔红霉素
  • 2篇逆转
  • 2篇细胞多
  • 2篇细胞多药耐药
  • 2篇细胞耐药
  • 2篇纳米

机构

  • 10篇东南大学
  • 5篇江苏大学附属...
  • 2篇医学部
  • 1篇江苏大学

作者

  • 10篇陈宝安
  • 10篇程坚
  • 10篇高峰
  • 9篇丁家华
  • 9篇高冲
  • 8篇夏国华
  • 7篇王雪梅
  • 7篇鲍文
  • 6篇许文林
  • 6篇赵刚
  • 5篇王骏
  • 5篇宋慧慧
  • 4篇孙耘玉
  • 4篇王飞
  • 3篇仲悦娇
  • 3篇单学赟
  • 3篇吴玮玮
  • 2篇刘莉洁
  • 2篇毛沛沛
  • 2篇陈文姬

传媒

  • 6篇中国实验血液...
  • 2篇江苏医药
  • 1篇中国中西医结...
  • 1篇中华血液学杂...

年份

  • 2篇2011
  • 6篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
尼洛替尼联合5-溴汉防己甲素逆转K562/A02细胞耐药的研究被引量：4
2010年
目的 探讨尼洛替尼、5-溴汉防己甲素（BrTet）及其联合应用对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用及其机制.方法 尼洛替尼、BrTet单独或联合作用于K562/A02细胞,应用MTY法检测细胞增殖抑制率、流式细胞术检测细胞凋亡率、RT-PCR检测mdr1 mRNA的表达及Western blot分析P糖蛋白（P-gp）的表达的情况.结果 5 nmol/L尼洛替尼和0.5μmol/L BrTet单独使用48 h后,柔红霉素（DNR）对K562/A02细胞的IC50分别为4.52 mg/L和5.41 mg/L,联合使用后,DNR对K562/A02细胞的IC50降为2.98 mg/L.单用DNR、尼洛替尼和BrTet均不能增加K562/A02细胞凋亡率（P〉0.05）,DNR联合尼洛替尼和BrTet后细胞凋亡率明显增高.单用5 nmol/L尼洛替尼和0.5μmol/L BrTet 48 h后,K562/A02细胞mdr1 mRNA灰度值为0.48±0.04、0.64±0.01,两者合用K562/A02细胞mdr1 mRNA灰度值下降为0.35±0.04.单用5 nmol/L尼洛替尼作用48 h,P-gp的表达水平为0.61±0.05;单用0.5μmoL/L BrTet作用48 h,P-gp的表达水平为0.52 ±0.02;两者合用K562/A02细胞P-gp的表达水平降为0.44±0.03.结论 单独应用尼洛替尼和BrTet均可部分逆转K562/A02细胞的耐药,机制可能与降低mdr1 mRNA和P-gp的表达及增加K562/A02细胞凋亡有关,并且两药联用具有明显的协同作用.
陈宝安单学赟程坚王飞丁家华高冲赵刚王雪梅许文林高峰夏国华Michael Schmitt
关键词：尼洛替尼糖蛋白类
Mdr-1基因siRNA表达载体联合磁性纳米Fe_3O_4对转染率的影响
2010年
目的探讨磁性纳米Fe3O4颗粒(Fe3O4-MNPs)对Mdr-1基因siRNA表达载体转染白血病耐药细胞株K562/A02细胞转染效率的影响。方法构建靶向Mdr-1基因的PGCsilencer-U6-neo-GFPsiRNA表达载体(PGY1-1),分别与10、15、20μg/mlFe3O4-MNP置于37℃、5%CO2条件下共孵育,荧光显微镜下计数48h细胞的转染效率。结果 PGY1-1对K562/A02细胞转染率未见明显变化。结论 PGY1-1对K562/A02细胞的转染效率不能通过共孵育的方法得到提高。
程坚毛沛沛陈宝安高峰丁家华高冲张伟吴玮玮夏国华王雪梅许文林李小毛
关键词：转染效率
葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂PDMP对K562/A02细胞柔红霉素耐药逆转的研究被引量：4
2010年
本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)hydrochloride对K562/A02细胞株柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的逆转作用及其逆转机制。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度PDMP对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应及其对K562/A02细胞DNR耐药逆转作用;用流式细胞术检测PDMP对K562/A02细胞内DNR浓度及细胞凋亡率的影响;半定量RT-PCR和Western blot方法检测K562及K562/A02细胞mdr1、GCS基因的表达以及PDMP对K562/A02细胞两种基因表达的影响。结果表明:DNR对K562和K562/A02细胞的IC50分别为0.23±0.02和7.15±0.24μg/ml,当PDMP≤20μmol/L时,对K562及K562/A02细胞株无明显生长抑制作用;20μmol/L和10μmol/L PDMP均能增加K562/A02细胞对DNR的敏感性,其耐药逆转倍数分别为2.59和1.69;两种浓度PDMP作用于耐药株48小时后能增加细胞内DNR浓度(p<0.05)和细胞凋亡率(p<0.01)。20μmol/L PDMP处理K562/A02细胞48小时后可在mRNA和蛋白水平下调GCS和mdr1基因的表达(p<0.01)。结论:PDMP可以增强K562/A02细胞对DNR的敏感性,其机制可能与增加细胞内药物浓度及细胞凋亡率、下调GCS和mdr1基因表达有关。
殷莉陈宝安程坚丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚高峰宋慧慧鲍文吴玮玮王飞梁艺琼夏国华王雪梅
关键词：PDMPK562/A02细胞多药耐药
酪氨酸激酶抑制剂逆转K562／A02细胞多药耐药的研究被引量：3
2010年
本研究旨在比较酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼(Imatinib)、尼洛替尼(Nilotinib)对K562/A02细胞多药耐药的逆转作用。用RT-PCR法检测各组mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA表达;用Western blot法检测各组P-gp、P210蛋白表达;用流式细胞术检测各组细胞内柔红霉素(DNR)的蓄积。结果表明:0.0625μmol/L伊马替尼、5nmol/L尼洛替尼对K562/A02细胞无明显细胞毒性,伊马替尼和尼洛替尼上述剂量单独作用48小时均下调mdr-1mRNA、bcr-abl mRNA、P-gp、P210蛋白的表达,且尼洛替尼较伊马替尼作用更强。荧光强度检测显示,K562/A02细胞经伊马替尼、尼洛替尼单独处理48小时后,其细胞内DNR浓度分别为K562细胞中的7.85%、12.02%。结论:酪氨酸激酶抑制剂具有很好的逆转细胞耐药作用,且尼洛替尼较伊马替尼逆转作用更强。
单学赟陈宝安夏国华许文林丁家华高冲孙耘玉王骏程坚赵刚鲍文宋慧慧高峰王飞王雪梅
关键词：酪氨酸激酶抑制剂尼洛替尼MDR1基因BCR-ABL基因
载有柔红霉素的磁性纳米Fe_3O_4提高裸鼠异种移植模型中多药耐药K562白血病细胞对化疗效果(英文)被引量：3
2009年
肿瘤的多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,由于载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体外显示了良好的耐药逆转效果,本实验研究了载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体内对白血病多药耐药逆转效果。将裸鼠高成瘤性白血病细胞株K562-n及其相应的多药耐药株K562-n/VCR分别接种于裸鼠的两侧腹股沟皮下,以建立人类白血病移植瘤模型;将双侧成瘤裸鼠随机分为5组,A组给予生理盐水,B组给予磁性纳米Fe3O4颗粒,C组给予柔红霉素,D组给予载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒,E组给予载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒同时在肿瘤表面建立固定磁场。在实验开始后的第1,5,9,13,17,21天分别测量肿瘤体积。实验结束后,分离瘤组织并用RT-PCR,Westernblot检测mdr-1的转录和表达。结果表明:D组、E组的K562-n/VCR肿瘤体积显著小于A、B、C3个组(D或E组相对于A,B或C组p<0.05)。病理检查显示:A组、B组肿瘤细胞生长良好,未见明显细胞坏死;C组肿瘤细胞有散在细胞坏死,部分细胞出现核固缩、核碎裂等;D、E组肿瘤组织内可见细胞明显破碎、坏死、组织的纤维化。D和E组的mdr-1的转录水平明显低于A、B、C3个组,但是P-gp的表达在5个组中无差异。C组、D组、E组3个组K562-n肿瘤平均肿瘤体积显著小于的A、B两组的平均肿瘤体积(C、D或E组相对于A或B组p<0.05)。A组、B组肿瘤细胞生长良好,未见明显细胞坏死;在C、D、E组肿瘤组织内可见细胞明显破碎、坏死、组织的纤维化。结论:载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在体内具有明显的逆转多药耐药的作用,但是相对于单用柔红霉素,载有柔红霉素的磁性纳米Fe3O4颗粒在敏感的K562-n的肿瘤中并不能进一步提高疗效;本实验中外加磁场并未增加疗效。
赖斌斌陈宝安程坚高峰许文林丁家华高冲孙新臣李国宏陈文姬刘莉洁李小毛王雪梅
关键词：柔红霉素多药耐药白血病异种移植模型
DLK1及c-FLIP基因在AML中的表达
2010年
目的探讨急性髓细胞白血病(AML)患者c-FLIPL、c-FLIPS及DLK1基因的表达水平及临床意义。方法应用逆转录-PCR半定量检测8例AML(AML组)及3例非恶性血液病患者(对照组)骨髓单个核细胞中c-FLIPL、c-FLIPS及DLK1 mRNA的表达水平。结果 AML组患者DLK1 mRNA、c-FLIPL mRNA、c-FLIPS mRNA表达均明显高于对照组(P<0.05),且AML各FAB亚型间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DLK1、c-FLIPL及c-FLIPS基因在AML患者中表达异常增高,可能在白血病细胞逃脱凋亡、无限增殖中发挥作用。
张波陈宝安高冲高峰夏国华邵泽叶丁家华赵刚程坚王骏宋慧慧鲍文仲悦娇裴孝平王飞顾忠泽
关键词：急性髓细胞白血病
靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
2010年
本研究构建并鉴定靶向mdr-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。根据Genbank数据库提供的mRNA序列,选择设计3个能转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,体外分别合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经BamHI和HindⅢ双酶切线性化的pGCsilencer人U6启动子质粒载体中;为了确定利用酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确,采用脂质体转染的方法将构建好的3个重组载体(pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3)导入慢性髓系白血病耐药细胞株K562/A02,采用实时PCR方法检测转染细胞的mdr-1基因表达,Western-blot检测P-gp表达量的变化。结果表明:应用PCR电泳图谱和测序证实了克隆RNAi打靶序列完全正确,而且该载体又同时表达GFP标记基因,用于测定转染效率。分别转染pGY1-1,pGY1-2,pGY1-3后K562/A02细胞的mdr-1基因表达和P-gp表达水平下降,证明shRNA可以特异性沉默mdr-1基因。结论:靶向mdr-1基因shRNA真核表达载体构建成功,为进一步研究mdr-1基因在K562/A02细胞中的作用奠定了实验基础。
毛沛沛陈宝安程坚高峰丁家华高冲孙耘玉王骏赵刚鲍文宋慧慧张伟吴玮玮夏国华许文林王雪梅
关键词：MDR-1基因短发夹RNAK562/A02细胞
白血病K562、K562/A02细胞中mthfr、dpyd基因单核苷酸多态性的检测
2011年
本研究旨在检测白血病细胞株及其耐药株中两种药物代谢相关基因的单核苷酸多态性。培养白血病细胞株K562及其耐药株K562/A02,采用QIAamp DNA Blood Minikit试剂盒提取基因组DNA,设计引物,应用PCR技术扩增相应目的片段;采用基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测mthfr基因rs1801131、rs1801133、rs2274976及dpyd基因rs1801159、rs1801160、rs17376848的单核苷酸多态性。结果表明,在K562和K562/A02两种细胞中,mthfr基因rs1801131基因型均为CA、rs1801133均为CC、rs2274976均为GG;dpyd基因rs1801159基因型均为GG、rs1801160均为GG、rs17376848均为AA。结论:mthfr、dpyd基因上述位点在K562和K562/A02两种细胞中基因表达无差别。
张文静陈宝安程坚鲍文仲悦娇高峰夏国华张孝平许佩佩彭苗新
关键词：K562/A02MTHFR基因单核苷酸多态性
联合应用尼洛替尼和汉防己甲素逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡的研究被引量：4
2011年
本研究旨在探讨联合应用尼洛替尼(nilotinib)和汉防己甲素(tetrandrine,Tet)逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡的相关性及其机制。应用MTT法检测细胞敏感性,计算尼洛替尼和Tet干预后的柔红霉素(DNR)的半数抑制浓度(IC50),用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,RT-PCR检测bax、survivin mRNA的表达及Western blot分析BAX、SURVIVIN蛋白的表达情况。结果表明:5 nmol/L尼洛替尼或1.0μml/L Tet单独作用48小时后,DNR对K562/A02细胞的IC50分别为(5.71±0.72)mg/L和(6.52±0.43)mg/L,两药联合应用时DNR对K562/A02细胞的IC50降为(3.12±0.13)mg/L。单用尼洛替尼或Tet均能增加经DNR作用的K562/A02细胞的凋亡率,两药联合作用时凋亡率增高更明显。单用5 nmol/L尼洛替尼或1.0μml/L Tet 48小时后可上调bax mRNA及其蛋白的表达,且两药联合作用时上调幅度明显。单用5 nmol/L尼洛替尼或1.0μml/LTet48小时后可下调survivin mRNA及其蛋白表达水平,且两药联合作用时下调幅度明显。结论:K562/A02细胞对DNR耐药,单独应用尼洛替尼和Tet均可部分逆转K562/A02细胞对DNR的耐药,并可增加K562/A02细胞的凋亡率,两药联用具有明显的协同作用,其机制可能与上调bax mRNA及其蛋白的表达和下调survivin mRNA及其蛋白的表达有关。
崔婷允陈宝安丁家华高冲程坚鲍文仲悦娇单学赟高峰夏国华Anita SchmittMichael Schmitt
关键词：尼洛替尼汉防己甲素K562/A02细胞耐药逆转
环孢菌素A联合汉防己甲素逆转人白血病耐药细胞株K562/A02细胞多药耐药的分子生物学机制被引量：10
2008年
目的多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致肿瘤化疗失败的主要原因,本研究探讨环孢菌素A(cyclosporine A,CsA)及汉防己甲素(tetrandrine,Tet)联合应用对人白血病耐药细胞株K562/A02细胞MDR的逆转作用及其分子生物学机制。方法K562/A02细胞经CsA和Tet作用后,以流式细胞仪(FCM)检测细胞内柔红霉素(daunorubicin,DNR)浓度和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测多药耐药基因(multidrug resistancegene,mdr1)mRNA表达水平。结果K562/A02细胞内DNR浓度为K562的19%,CsA(1mg/L)及Tet(0.1mg/L)单独及联合作用K562/A02细胞48h后细胞内DNR的浓度分别为K562的60%、65%、98%。K562和K562/A02细胞P-gp荧光强度分别为0.18%和96.51%,K562/A02细胞经CsA(1mg/L)和Tet(0.1mg/L)单独及联合处理后细胞P-gp荧光强度分别为75.32%,76.86%和48.61%。K562/A02细胞经过两药单独作用后耐药株mdr1-mRNA下调微弱,联合用药下调效果明显。结论环孢菌素A和汉防己甲素均可逆转白血病细胞的耐药,且两药联合作用逆转效果增强,具有协同作用。
陈宝安郭晶晶程坚高峰丁家华许文林沈惠玲孙新臣成红艳高冲孙耘玉王骏赵刚宋慧慧鲍文李国宏刘莉洁陈文姬王雪梅
关键词：环孢菌素A汉防己甲素K562/A02细胞多药耐药
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