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国家自然科学基金(81120108021)
作品数:
4
被引量:10
H指数:2
相关作者:
孙凌云
张卓亚
孔玮
陈纬纬
姚根宏
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相关机构:
南京大学医学院附属鼓楼医院
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医药卫生
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转化生长因子
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转化生长因子...
机构
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南京大学医学...
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南京医科大学
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北京协和医院
作者
4篇
孙凌云
3篇
姚根宏
3篇
陈纬纬
3篇
孔玮
3篇
张卓亚
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王丹丹
2篇
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中华风湿病学...
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2016
2篇
2015
1篇
2013
共
4
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脐带间充质干细胞移植调节Th17/调节性T细胞平衡延缓MRL/lpr鼠狼疮进展
被引量:5
2015年
目的探讨脐带MSCs移植对MRL/lpr鼠狼疮发病是否有预防作用及可能的机制。方法14只10周龄的雌性MRL/lpr小鼠应用随机数字表法分为2组:脐带MSC组每只尾静脉注射1×10^6脐带MSCs,对照组尾静脉注射等量的PBS;每4周Bradford法检测尿蛋白;28周龄时处死小鼠,ELISA检测血清抗dsDNA抗体及IL-17,流式细胞术检测脾脏Th17及调节性T细胞百分率。采用t检验及Pearson相关性分析。结果脐带MSC组小鼠出现蛋白尿的时间比对照组延迟4周。28周龄时,脐带MSCs组小鼠尿蛋白定量(24h)和脾脏质量显著小于对照组[(1.78±0.17)mg与(4.77±0.98)mg,t=2.99,P〈0.05和(0.149±0.009)g与(0.273±0.052)g,t=2.33,P〈0.05];血清抗dsDNA抗体及IL-17水平与对照组相比也有下降趋势。脐带MSC组小鼠脾脏Th17细胞的百分率和绝对数与对照组相比均显著减少[(0.90±0.19)%与(2.81±0.50)%,t=3.54,P〈0.01和(3.7±0.8)×10^5与(19.3±3.7)×10^5,t=4.12,P〈0.01];而脾脏调节性T细胞的百分率在脐带MSCs移植之后则升高。脐带MSC组小鼠脾脏Th17/调节性T细胞比例显著低于对照组(0.11±0.03与0.50±0.09,t=4.23,P〈0.01)。MRL/lpr小鼠脾脏Thl7调节性T细胞比例与尿蛋白定量(24h)(r=0.73,P〈0.01)及血清抗dsDNA抗体水平呈正相关(r=0.59,P〈0.05);血清IL-17水平也与尿蛋白定量(24h)(r=0.78,P〈0.01)及血清抗dsDNA抗体水平呈正相关(r=0.56,P〈0.05)。结论脐带MSCs移植可能通过调节Th17调节性T细胞平衡延缓MRL/Ipr小鼠发病和疾病进展。
张卓亚
孔玮
陈纬纬
姚根宏
冯学兵
孙凌云
关键词:
间质干细胞
红斑狼疮
TH17细胞
调节性
脐带间充质干细胞上调系统性红斑狼疮患者调节性T细胞的机制研究
被引量:5
2013年
目的探讨脐带间充质干细胞(UC-MSC)上调系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血调节性T细胞(Treg)的作用机制。方法20例SLE患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC)分别与UC-MSC以不同比例共培养72h,流式细胞术检测PBMC中CIM’CD25’Foxp3’Treg细胞比例。分别以SLE患者及正常人PBMC及血清刺激UC-MSC,实时荧光定量聚合酶链反应检测UC-MSCTGF-B1mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养上清TGF-p1表达水平。并构建TGF-B1小干扰RNA(siRNA)干扰UC-MSCTGF-p1表达及在共培养体系中加入TGF-B1抑制剂,探讨UC-MSC对SLE患者Treg细胞的调节作用。结果UC-MSC呈剂量依赖性上调SLE患者外周血Treg细胞,且不依赖细胞直接接触,而对正常人外周血Treg细胞无调节作用。与无刺激组及健康志愿者PBMC刺激组相比,SLE患者PBMC显著促进UC-MSCTGF-β1mRNA表达(1.00±0.09,1.95±0.62,4.20±2.34,P〈0.05),细胞培养上清TGF-β1水平显著升高。SLE患者血清(5%)促进UC-MSC表达TGF-β1mRNA(12.19±4.49),显著高于胎牛血清及正常人血清培养组(1.33±0.06,2.53±0.72),P〈0.01。TGF-β1siRNA干扰的UC-MSC对SLE患者外周血Treg细胞无上调作用(SLEPBMC+TGF-β1siRNAUC-MSC组2.33%±0.99%,SLEPBMC组1.80%±0.65%,P〉0.05)。此外,TGFN特异性抑制剂SB431542显著抑制UC-MSC对SLE患者外周血Treg细胞的调节作用(UC-MSC+SIM31542组4.58%±2.10%,UC-MSC组7.85%±3.54%,P〈0.05)。结论SLE患者免疫微环境可显著刺激UC-MSC表达TGF-β1,后者在UC-MSC上调SLE患者Treg细胞中发挥重要作用。
鲁琳
王丹丹
李霞
曾小峰
孙凌云
关键词:
间充质干细胞
调节性T细胞
转化生长因子Β1
骨髓间充质干细胞对骨髓细胞诱导狼疮样症状的作用研究
被引量:2
2015年
目的研究SLE骨髓细胞(BMC)移植能否传递疾病,明确BMC在SLE发病中的作用;比较SLE骨髓间充质干细胞(MSC)和正常骨髓MSC对SLE来源BMC移植诱导的狼疮样症状的作用,阐明MSC在治疗SLE中的作用。方法选取19只6周龄雌性C57BL/6鼠,采用随机数字表法分为3组:移植30周龄B6.MRL—Fas^lpr狼疮鼠BMC组、联合移植30周龄B6.MRL—Fas^lpr狼疮鼠BMC和30周龄B6.MRL—Fas^lpr狼疮鼠骨髓MSC组、联合移植30周龄B6.MRL—Fas^lpr狼疮鼠BMC和30周龄C57BL/6鼠骨髓MSC组。细胞移植前用致死剂量X线对移植受体C57BL/6鼠进行清髓处理,并在1h内完成细胞移植。移植后每4周取血和尿,分别检测血清ANA水平及尿蛋门;记录小鼠生存情况;移植后18周处死小鼠,采用流式细胞术检测脾脏浆细胞、Th1、Th2以及Th17细胞亚群变化。2组间比较采用独立样奉t检验分析,多组间比较采用单因素方差分析。结果细胞移植后第8周,3组鼠血清中ANA均呈阳性,但组问差异无统计学意义(P〉0.05);各组小鼠均未出现蛋白尿;联合移植狼疮鼠BMC和狼疮鼠骨髓MSC组较其他2组其浆细胞、Th1、Th2、Th17细胞百分率呈升高趋势,浆细胞[(1.05±0.16)%,(0.58±0.11)%,t=2.53,P〉0.05;(1.05±0.16)%,(0.71±0.18)%,t=1.45,P〉0.05],Th1[(6.6±2.2)%,(5.7±1.0)%,t=0.38,P〉0.05;(6.6±2.2)%,(4.0±1.7)%,t=0.96,P〉0.05],Th2[(3.3±0.4)%,(2.1±0.6)%,t=1.76,P〉0.05;(3.3±0.4)%,(2.2±0.6)%,t=1.51,P〉0.05],Th17[(2.30±0.71)%,(131±0.31)%,t=1.27,19〉0.05;(2.30±0.71)%,(1.12±0.27)%,t=1.67,P〉0.05]。移植狼疮鼠BMC组、联合移植狼疮鼠BMC和狼疮鼠骨髓MSC组及联合移植狼疮鼠BMC和C57BL/6鼠骨髓MSC组移植后生存率分别为(43
孔玮
张卓亚
黄赛赛
陈纬纬
唐小军
姚根宏
孙凌云
关键词:
间质干细胞
脐带间充质干细胞对狼疮鼠免疫细胞亚群的调节作用
被引量:1
2016年
目的探讨脐带间充质干细胞(UC-MSCs)移植治疗狼疮鼠后免疫细胞亚群变化,为阐明UC-MS(3s治疗SLE机制提供依据。方法将B6-MRL-Fas虹狼疮鼠采用随机数字表法随机分成3组:UC-MSCs治疗组、成纤维样滑膜细胞(FLs)治疗组与未治疗组;经尾静脉分别输注1×10^6UC-MSCs或FLS;治疗4周后,计算小鼠脾脏指数,苏木精.伊红(HE)染色观察小鼠肾脏病变,ELISA试剂盒检测IgG水平,流式细胞仪检测脾脏中各淋巴细胞亚群及腹腔和肾脏巨噬细胞比例,统计学方法采用方差分析。结果UC.MSCs治疗组狼疮鼠脾脏指数[(79±9)mg/10g]、血清IgG水平[(7.5±1.5)mg/ml]均较FLS组[(147±23)mg/10g,t=2.78,P〈0.01][(17.0±2.8)mg/ml,t=3.00,P〈0.01]及未治疗组[(156±16)mg/10g,t=4.29,P〈0.01][(16.7±1.6)mg/ml,t=4.01,P〈0.01]显著下降;FLS组[(2.412±0.297)%]及未治疗组[(2.612±0.318)%]脾脏浆细胞B220-CD138+的比例显著高于UC—MSCs治疗组[(0.306±0.017)%](t=7.07,P〈O.01;与t=7.22,P〈0.01);UC—MSCs治疗组脾脏调节性T细胞(CD25+Foxp3+/CD4+调节性T细胞)比例[(15.08±0.81)%]显著高于FLS组[(8.80±0.23)%,t=7.39,P〈0.01]及未治疗组[(8.02±0.47)%,t=7.45,P〈O.01];UC—MSC组脾脏滤泡辅助T细胞(CXCR5+PD1+/CD4+Tfh)比例[(14.3±1.5)%]及IFNγ+/CD4+Th1细胞比例[(1.78±0.27)%)]显著低于FLS组[(28.8±2.2)%,t=5.49,P〈0.01;(4.88±0.81)%,t=3.61,P〈0.01]及未治疗组[(31.5±3.3)%,拉5.25,P〈0.01;(5.93±1.56)%,t=2.60,P〈O.05];UC—MSC治疗后,狼疮鼠肾脏巨噬细胞F4/80+比例[(3.52±0.37)%]显著高于未治疗组[(1.58±0.29)%,t=3.25,P〈O.01],但是与FLS组[(3.08±0.18)%,t=O.40�
黄赛赛
王丹丹
邓伟
张卓亚
陈纬纬
孔玮
姚根宏
孙凌云
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