北京市自然科学基金(7012011)
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
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- 肺炎支原体P1重组蛋白多克隆抗体与单克隆抗体的制备与比较被引量：1
- 2007年
- 肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，Mp）是引起人类原发性非典型肺炎及其他呼吸道感染性疾病的常见病原微生物，不做病原学检查，很难将Mp与其他病原体引起的呼吸道感染相区别。本研究利用具有抗原特异性的重组P1抗原，研制特异、敏感的抗体，为建立临床标本的怖抗原诊断方法奠定了基础。
- 孙红妹冯燕玲赵汉青张建芝寿成超包怡华张霆
- 关键词：单克隆抗体肺炎支原体多克隆抗体呼吸道感染性疾病抗原特异性原发性非典型肺炎
- 门诊急性呼吸道感染患儿肺炎支原体、衣原体病原学监测及临床意义被引量：11
- 2007年
- 目的了解门诊急性呼吸道感染患儿中肺炎支原体(MP)和肺炎衣原体(CPn)的病原学情况。方法定期选择首都儿科研究所儿内科门诊临床拟诊急性呼吸道感染的患儿行咽拭子MP、CPn的nPCR检测。共纳入314例患儿,其中男183例,女131例,年龄2个月至14岁。结果314例患儿中MP和CPn阳性50例,总阳性率15.9%(50/314)。其中MP感染46例,阳性率14.6%(46/314);CPn感染4例,阳性率1.3%(4/314)。男女感染比例1.3∶1。感染患儿年龄为4个月至12岁。MP感染并发呼吸道病毒感染占MP感染的21.7%(10/46);其中90.0%(9/10)为急性上呼吸道感染。本组MP感染患儿临床表现以发热、咳嗽和流涕为主,个别有头痛、肌痛及胃肠道症状;有8例(17.4%,8/46)患儿仅以发热、扁桃体红肿为体征就诊。4例CPn感染患儿均有发热,伴有咳嗽和流涕。所观察的MP、CPn感染以急性上呼吸道感染为主,占80.0%(40/50)。MP感染以冬、春季节发病较高,并存在混合感染。CPn感染为9、10和12月份散发。结论MP和CPn感染也是儿科急性上呼吸道感染中的重要病原之一。发病年龄有小年龄化趋势。MP、CPn感染与其他病原体所致呼吸道感染在临床上并无特殊之处。采用nPCR的方法,可以提供早期病原学诊断的依据。
- 廖斌曹玲赵汉青孙红妹
- 关键词：呼吸道支原体衣原体
- 肺炎支原体P1蛋白抗原决定簇在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：4
- 2004年
- 目的 得到肺炎支原体主要粘附蛋白 (P1蛋白 )的表达蛋白。材料与方法 用PCR产物限制性片段长度多肽性(RFLP)分析等方法鉴定实验用肺炎支原体菌株。针对P1蛋白基因设计上、下游引物 ,进行PCR扩增。对PCR产物进行回收、纯化 ,克隆入PET - 2 8C(+)表达载体 ,并转化入宿主菌BL2 1。对重组质粒进行酶切及PCR鉴定后 ,IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达 ,并以Ni-Agarose亲和层析柱纯化。结果 1)本实验所用菌株为肺炎支原体 2型。 2 )经PCR扩增得到预期含有BamHI和XhoI的 5 33bp的目的片段。 3)完成目的基因片段的克隆与表达 ,得到 2 0kDa左右表达蛋白。经诱导阳性质粒的蛋白表达 ,得到较大量纯化的目的蛋白。结论 本研究以国际标准株FH为模板 ,成功获得纯化的近 2 0kDa的P1蛋白片段 ,其大小与目的片段理论值相符 ,且此片段在肺炎支原体 1型与 2型中的基因同源性为 98%。为在基因和蛋白水平进一步研究肺炎支原体P1蛋白成分在肺炎支原体粘附和引起机体免疫反应中的作用机制 ,打下了良好的基础。
- 孙红妹包怡华赵汉青吴建新刘哲伟张霆郭章溉曹玉璞
- 关键词：肺炎支原体P1蛋白抗原决定簇大肠杆菌纯化
- 10例SARS患者中肺炎支原体、肺炎衣原体感染的调查
- 2004年
- SARS是由变异的冠状病毒感染所致,肺部可出现片状阴影;而这些症状恰恰与肺炎支原体(Mp)、肺炎衣原体(Cp)感染有类似之处,为SARS的确诊带来困难.我们对10例临床确诊SARS患者进行了Mp和Cp检测,进一步探讨支原体、衣原体感染与SARS的关系.
- 孙红妹赵汉青刘哲伟高星罗会英郭敏陈秋菊梁青肖宗慧张霆
- 关键词：SARS患者肺炎支原体肺炎衣原体细菌感染
- 肺炎支原体重组P1蛋白抗体研究被引量：3
- 2007年
- 目的研制针对肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)主要粘附蛋白-P1蛋白的特异性抗体。方法用纯化后重组P1蛋白免疫BALB/c小鼠,获得多克隆抗体(Polyclonal Antibody,PcAb),通过传统的杂交瘤技术制备抗P1重组蛋白单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb),采用ELISA和IFA法对单抗和多抗进行反应性和特异性检测。结果ELISA法检测P1重组蛋白抗原性显示,P1蛋白与Mp抗血清有较好的反应性,蛋白敏感性大于1ng/ml;在重组P1蛋白免疫小鼠获得的PcAb与Mp的反应中,检测到的抗体滴度可达到1∶1600;获得针对Mp重组P1蛋白的特异性McAbs2株,在ELISA检测中均与P1抗原有较好的反应特异性,抗体滴度可达到1∶800～1600;IFA结果显示,上述PcAb和McAbs均与Mp有较好反应性,与生殖支原体等无交叉反应。结论本研究选取的重组P1蛋白具有较好的免疫原性;其特异性PcAb和McAbs与Mp有较好的特异性,为临床Mp感染的抗原快速、早期诊断方法的建立打下了基础。
- 孙红妹冯燕玲赵汉青张建芝寿成超包怡华张霆
- 关键词：肺炎支原体抗体
