教育部“春晖计划”(z2004-2-65019)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：石国庆张寒莹王锋丁晓麟许欣更多>>
- 相关机构：新疆农垦科学院南京农业大学更多>>
- 发文基金：教育部“春晖计划”江苏省国际科技合作项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 睾丸网注射法建立转基因小鼠被引量：7
- 2008年
- 目的为了研究睾丸网注射法建立转基因小鼠的可行性。方法本试验应用显微注射仪将脂质体包裹的质粒pEGFP-N1通过睾丸网注射到4周龄昆明(KM)小白鼠睾丸生精小管内。注射后6周,与自然发情雌鼠交配,用PCR法检测仔鼠基因组中的外源DNA。结果共注射4只雄性小鼠,3只存活,并且具有交配,受精能力,共获仔鼠63只,其中2只为PCR阳性仔鼠。结论用睾丸网注射法制备转基因动物是可行的。
- 丁晓麟张寒莹许欣石国庆王锋
- 关键词：小鼠转基因
- 利用精原干细胞法生产转基因动物的研究进展被引量：2
- 2007年
- 综述了利用精原干细胞生产转基因动物的发展历程、方法以及最新研究进展.重点从精原干细胞移植法和曲细精管微注射法两个方面,系统分析了利用精原干细胞生产转基因动物的优缺点,以及当前存在的问题.
- 丁晓麟张寒莹石国庆王锋
- 关键词：精原干细胞转基因动物
- 小鼠精原干细胞冷冻保存被引量：4
- 2009年
- 目的探索小鼠精原干细胞（SSCs）冷冻保存方法以及解冻后体外快速增殖的条件。方法实验以6d龄雄性昆明小白鼠为材料,两步酶消化法分离小鼠睾丸生殖细胞,Percoll非连续密度梯度离心法富集小鼠精原干细胞,随后加入不同的冷冻液以及采用不同的降温速率冷冻小鼠精原干细胞。以MEMα为基本培养基,加入10%胎牛血清和100μg/L的胶质细胞源性神经营养因子,WST-8比色法分析培养SSCs复苏后的增殖率,运用碱性磷酸酶细胞化学染色和RT-PCR技术,对培养的SSCs进行鉴定。结果冷冻液中添加10%二甲基亚砜、10%胎牛血清0、.07mol/L蔗糖时,以1℃/min程控降温方式冷冻小鼠SSCs,细胞解冻后活率最高,达84%以上;采用非程控降温方式冻存SSCs,尽管细胞解冻后活率相对于程控降温方式略低,但具有方法简单、易于操作、无需昂贵仪器的优点,复苏后SSCs贴壁时间为8~12h,24h可见细胞分裂,48h细胞出现迅速增殖,96h可见较多含20~25细胞的细胞团,此时精原干细胞增殖近5倍。结论本实验所用培养条件,可以使经长期冷冻的SSCs短期快速增殖。
- 丁晓麟张寒莹王子玉张艳丽许欣石国庆王锋
- 关键词：冷冻保护剂细胞培养精原干细胞小鼠
- 哺乳动物早期胚胎表观遗传的非对称性研究进展
- 2008年
- 在哺乳动物发育早期,双亲基因组间及胚胎细胞系间均存在表观遗传非对称性,这对胚胎发育调控有重要意义。本文综述了受精卵、囊胚的表观遗传非对称性现象及目前对其机制的研究进展。克隆胚胎的表观遗传非对称性有所丢失,它们中的大部分有发育缺陷,尤其是胚胎和胚外组织发育失衡,这也说明了保持表观遗传非对称性对于胚胎发育的重要性。
- 张寒莹丁晓麟王锋石国庆
- 关键词：表观遗传早期胚胎
