浙江省科技厅科技计划项目(2012C33126)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：薛向阳叶璐璐章慧娣黄茜茜陈静更多>>
- 相关机构：温州医科大学金华职业技术学院温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅科技计划项目浙江省自然科学基金金华市科技局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微RNA-92a在系统性红斑狼疮血浆中的表达及临床意义被引量：1
- 2017年
- 目的分析微RNA（miR）-92a在SLE患者血浆中的表达及临床意义。方法收集44例SLE患者、16例RA患者和20名健康对照血浆标本，抽提血浆中小RNA，逆转录后，以cel-miR．39为外参，通过定量PCR检测血浆miR-92a的表达，通过实时荧光定量PCR和琼脂糖凝胶电泳对miR-92a和cel．miR-39的特异性分析；受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析血浆miR-92a作为SLE诊断的敏感性和特异性。采用Mann．WhitneyU检验、Kruskal．Wallis检验、r检验和Pearson相关分析进行统计分析。结果miR．92a在SLE患者49．20（5．33，95．17）、健康者411．30（320．84，504．69）和RA患者25．59（11．20，30．54）血浆中的相对表达量差异有统计学意义（x2=40．77，P〈0．01）。与健康对照相比，SLE患者血浆中miR-92a表达水平明显下调（49．20和411．30，P〈0．01），RA患者血浆中miR-92a相对表达水平较健康人，也明显下调（25．59与411．30，P〈0．01）。SLE患者血浆miR-92a区分健康对照及RA患者血浆miR-92a区分健康对照的ROC曲线下面积（AUC）分别为0．958和1．00。血浆miR-92a表达水平以198．59区别SLE患者和健康对照的特异性和敏感性达90％，93．2％；以85．35临界值区别RA患者与健康对照的特异性和敏感性达100％和100％。血浆miR-92a的表达水平在低补体c3，高血肌酐、高血尿素氮，高ALT及高LDH的SLE患者进一步降低（P均〈o．05）。结论SLE患者血浆中下调表达的miR-92a可能与其发病和病情进展相关，是SLE及终末期肾功能损害临床诊断一个新的生物学指标。
- 黄茜茜叶璐璐范超凡郭刚强章慧娣尤小寒林巧爱薛向阳孙莉
- 关键词：红斑狼疮微小RNA
- 系统性红斑狼疮患者外周血人巨细胞病毒感染状态分析及意义被引量：3
- 2014年
- 目的检测SLE患者外周血人巨细胞病毒（HCMV）的感染状况，探讨HCMV感染在SLE发病中的作用。方法采集并抽提60例已确诊的SLE患者和111名健康人外周血白细胞DNA，利用巢式PCR技术检测HCMV糖蛋白gB（UL55）基因以确定HCMV感染情况。应用2个独立样本t检验、非参数检验、χ2检验及Fisher确切概率法统计分析。结果琼脂糖凝胶电泳及测序显示建立的巢式PCR能特异地检测HCMV．UL55基因，SLE患者外周血中HCMV检出率明显高于对照组[分别为41．7％（25／60）和1．8％（2／111），χ2=46．551，P〈0．01]。与外周血HCMV阴性组SLE患者相比，HCMV阳性组SLE患者抗核糖体P蛋白抗体（Rib．P）阳性率[分别为26％（9／35），56％（14／25），χ2=5．659，P=0．017]、直接Coomb’s试验阳性率[分别为37％（13／35），72％（18／25），χ2=7．096，P=-0．008]及抗β2糖蛋白1（GP1）抗体水平[分别为21．3（9．9，51．8）U/ml，13．6（5．9，23．1）U／ml；U=2．017，P=0．044]明显升高，血液系统相关指标中的红细胞[分别为（3．65±0．10）×10^12／L，（3．17±0．17）×10^12／L；t=2．574，P=0．013]、淋巴细胞[分别为（1．37±0．14）×10^12／L，（0．90±0．13）×10^12；t=2．456，P=0．017]、血红蛋白[分别为（110±19）g／L，（98±5）g／L；t=2．034，P=0．048]明显减少；肾损害相关指标中的血尿阳性率[分别为40％（14／35），72％（18／25）；χ2=6．000，P=0．014]、尿蛋白定量（24h）水平[分别为0．80（0．53，2．37）g，0．48（0．13，1．21）g；U=2．140，P=0．032]明显上升。结论外周血细胞HCMV感染可能参与SLE发生、发展过程。
- 陈静熊江彪叶文静朱小春章慧娣张丽芳薛向阳
- 关键词：巨细胞病毒聚合酶链反应
- 潜伏相关抗原UL138蛋白的制备及其用于人巨细胞病毒感染血清学检测的评价被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨基于人巨细胞病毒(HCMV)潜伏相关抗原UL138蛋白的ELISA方法用于HCMV感染血清学检测的意义。方法:生物信息学分析HCMV UL138蛋白的跨膜区结构,选择胞内区序列,经原核密码子优化后全基因合成,克隆至p ET21a(+)原核载体,将成功构建的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),诱导蛋白表达后,SDS-PAGE及Western blot法鉴定目的蛋白表达,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。将纯化的UL138蛋白包被ELISA板,检测173例人血清UL138特异性抗体,并与临床上使用的罗氏公司cobas 8000分析系统及配套试剂盒进行血清HCMV Ig G抗体检测比较,评价UL138蛋白作为HCMV感染血清学检测工具的效能。结果:利用原核表达系统成功表达了UL138蛋白,经镍柱亲和纯化后获得高纯度的目的蛋白;健康成人血清UL138特异性抗体的ELISA法检测结果显示,几乎所有的健康成人都存在UL138特异性抗体,与罗氏公司的化学发光(CLIA)法Ig G检测结果比较,灵敏性为100.0%,符合率为98.8%,差异无统计学意义(x2=0.5,P>0.05),而且具有较好的一致性(Kappa=0.496,P<0.001)。结论:潜伏相关抗原UL138是HCMV感染血清学检测重要候选抗原,可望为基于此蛋白的HCMV血清学检测试剂的研制提供依据。
- 陈文静黄崇安陈静郭刚强谢旺凯林刻智沈贤薛向阳
- 关键词：人巨细胞病毒血清学检测酶联免疫吸附试验
- miR-29a在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及意义被引量：2
- 2015年
- 目的 分析microRNA-29a（miR-29a）在系统性红斑狼疮（SLE）患者血浆中的表达水平及与SLE临床特征的相关性.方法 建立检测miR-29a的实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法,分析48例SLE患者和20例健康体检者血浆中miR-29a的表达水平,ROC曲线评估其作为SLE诊断标记物的意义,统计分析其表达与SLE患者临床特征的相关性.结果 与健康体检者比较,SLE患者血浆miR-29a表达水平明显上调（Z=3.476,P=0.0009）;血清miR-29a诊断SLE的ROC AUC为0.794 （95％Cl：0.689～0.898）,具较好诊断SLE的效能;抗β 2GP1抗体＞20RU/ml患者的血浆miR-29a水平明显升高（P=0.033）,Pearson相关分析显示,SLE患者血浆miR-29a表达水平与抗β2GP1抗体水平呈正相关（r=0.584,P=0.001）,而与不同SLEDAI评分及其他SLE活动相关指标等差异均无统计学意义（均P ＞0.05）. 结论 miR-29a在SLE患者血浆中的表达水平明显上调,且血浆miR-29a上调与SLE患者自身抗体水平相关,其调节机制尚待进一步的研究.
- 徐玲娟叶璐璐陈阿琼黄茜茜章慧娣陈朝生薛向阳
- 关键词：系统性红斑狼疮
- microRNA-16在系统性红斑狼疮患者血浆中的表达及意义被引量：3
- 2013年
- 目的:分析microRNA-16(miR-16)在系统性红斑狼疮(SLE)患者血浆中的表达水平及其临床意义。方法:用茎环RT实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测48例SLE患者和20例健康人血浆中miR-16的表达水平,并分析其与SLE各种临床资料的相关性。结果:茎环RT-PCR可以特异性扩增血浆中的miR-16。miR-16在SLE患者血浆中表达水平下调,和健康人相比差异有统计学意义(其Ct值分别为19.40±0.85和18.89±0.66,t=2.386,P=0.02)。血浆miR-16表达水平与SLE患者活动程度的SLEDIA评分呈负相关(r=0.313,P=0.03),SLE疾病活动度越高,miR-16水平越低。结论:SLE患者血浆miR-16下调表达与SLE疾病活动度有关。
- 陈阿琼薛向阳章丽和陈静王晓冰章慧娣张丽芳吴淑珍朱小春
- 关键词：系统性红斑狼疮微RNA血浆检测
- 趋化因子CXCL14在SLE患者外周血单个核细胞中的表达及启动子甲基化分析被引量：7
- 2017年
- 目的:分析趋化因子CXCL14在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其启动子甲基化特征。方法:收集28例SLE患者和20名健康人外周血单个核细胞(PBMC)标本,抽提细胞中RNA,逆转录后,以GAPDH为内参,通过定量PCR检测PBMC中CXCL14的表达,统计分析CXCL14表达水平与SLE各种临床资料的相关性,探讨PBMC中CXCL14表达与SLE的关系,通过重亚硫酸盐修饰的全基因组DNA用以BSP测序来明确不同标本中CXCL14启动子中甲基化位点的甲基化率。结果:CXCL14在SLE患者和正常人PBMC中的表达量存在显著差异(P<0.05)。与健康人PBMC中CXCL14的含量相比较,CXCL14在SLE患者PBMC中表达量显著降低。与进一步CXCL14表达水平与SLE各种临床资料的相关性分析显示,CXCL14表达水平与SSB抗体(干燥综合征B抗体)、蛋白尿及血小板计数相关。与SSB抗体阴性SLE患者比较,SSB抗体阳性患者CXCL14表达水平更低(P<0.05);与蛋白尿阴性SLE患者相比,蛋白尿阳性患者CXCL14表达水平更低(P<0.05);而血小板升高患者的CXCL14表达水平更高(P<0.05)。CXCL14表达水平与SLE活动、肾损害指标、抗ds-DNA、C反应蛋白(CRP)、补体C3水平等指标未见显著相关性。CXCL14启动子区甲基化分析显示,SLE患者Cp G岛甲基化明显高于正常对照。结论:PBMC中低表达的CXCL14与SLE发生发展相关,其启动子区Cp G岛过度甲基化是SLE患者CXCL14低表达的重要机制。
- 王金丹黄茜茜叶璐璐范超凡郭刚强徐玲娟薛向阳盛秀胜
- 关键词：趋化因子甲基化
