国家自然科学基金(30270610)
- 作品数：15 被引量：80H指数：7
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- 安博维拮抗肝纤维化的实验研究
- 2005年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ受体阻断剂安博维对四氯化碳(CCl4)诱导的实验性肝纤维化大鼠纤维化水平的影响。方法大鼠肝实质损伤性纤维化模型由CCl4诱导。36只雄性Wister大鼠被随机分为3组:对照组、模型组及治疗组,每组12只。除对照组外所有大鼠均给予皮下注射40%CCl4(精致橄榄油配制,每3天1次,共6周)。对照组注射等体积的精制橄榄油。治疗组同时给予血管紧张素Ⅱ受体阻断剂灌胃。每天1次,至6周。实验结束后处死大鼠收取肝组织及血清标本。利用HE和VG染色对肝组织胶原表达及纤维化程度进行评价。血清学检测包括层粘连蛋白(LN),透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原检测(放射免疫法)。结果与模型组相比,血管紧张素Ⅱ受体阻断剂安博维可显著降低肝纤维化大鼠血清LN,HA,PCⅢ及Ⅳ型胶原水平,并显著改善肝纤维化程度(P<0.05)。结论安博维对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有良好的防治作用。
- 王卫卫田野詹纯列杨传红
- 关键词：肝纤维化药物治疗肾素血管紧张素系统安博维
- 醛固酮对肝星状细胞激活蛋白-1通路调控的体外研究被引量：2
- 2005年
- 目的探讨醛固酮(Aldo)对肝星状细胞(HSC)激活蛋白-1(AP-1)信号转导通路的影响。方法采用HSC-T6细胞株,分别予Aldo 1μmol/L处理10、30、60、120、180 min,蛋白质印迹法检测磷酸化P42/44蛋白的表达。另外,观察细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂-U0126,抗氧化剂-乙酰半胱氨酸(NAC)(均先预处理60 min,再予Aldo刺激)和肿瘤坏死因子α(TNF α)对磷酸化P42/44蛋白表达的影响。Aldo在干预30、60、120、240 min后,电泳迁移率变更分析(EMSA)检测AP- 1 DNA结合活性的变化;予U0126和NAC干预后,EMSA检测AP-1 DNA结合活性;逆转录聚合酶链反应检测α1-1型前胶原基因的表达。结果Aldo可诱导磷酸化P42/44的表达,并呈时间依赖性,10min 达到峰值,之后逐渐减低。U0126可抑制磷酸化P42/44的表达。Aldo可增强HSC的AP-1的DNA结合活性。U0126可以显著抑制Aldo诱导的AP-1的活化,NAC部分抑制Aldo诱导的AP-1的活化。Aldo可诱导α1-1型前胶原mRNA的表达。U0126和NAC可显著抑制Aldo诱导的α1-1型前胶原mRNA表达增强。结论Aldo可经ERK通路诱导HSC AP-1结合活性增强。Aldo可经AP-1通路调控α1-1型前胶原基因的表达。
- 李旭孟莹蔡绍曦杨希山吴平生
- 关键词：醛固酮激活蛋白-1肝星状细胞聚合酶链反应检测
- 培哚普利和氯沙坦抗实验性肝纤维化的研究被引量：13
- 2003年
- 目的 探讨血管紧张素转化酶抑制剂 (ACE I)培哚普利和血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT 1受体 )阻滞剂氯沙坦对实验性肝纤维化的影响。方法 Wistar大鼠 6 0只 ,随机分为 4组 ,模型组 :4 0 %CCl4油 0 2 5ml/10 0mg皮下注射 ,每周 2次 ;培哚普利治疗组 :培哚普利 2mg/kg灌胃 ,每日 1次。氯沙坦治疗组 :氯沙坦 5 0mg/kg灌胃 ,每日 1次。对照组 :橄榄油皮下注射。于第 4、6周取材。光镜下动态观察组织学改变 ;RT PCR检测AT 1受体的表达 ;免疫蛋白质印迹检测AT 1受体、转化生长因子 β1(TGF β1)和血小板衍生生长因 BB(PDGF BB)蛋白的表达 ;明胶酶法测定金属蛋白酶 2(MMP 2 )的活性 ;放免检测血清透明质酸 (HA)、层粘蛋白 (LN)的含量。结果 培哚普利组和氯沙坦组肝纤维化程度和血清HA、LN含量低于模型组 ;培哚普利组和氯沙坦组AT 1受体mRNA和蛋白质表达水平、TGF β1和PDGF BB蛋白质的表达低于模型组 ;模型组MMP 2活性高于培哚普利组和氯沙坦组。结论 培哚普利和氯沙坦对实验性大鼠肝纤维化具有抑制作用。
- 李旭孟莹张振书杨希山吴平生
- 关键词：培哚普利氯沙坦肝纤维化动物实验血管紧张素转化酶抑制剂
- 血管紧张素Ⅱ对库普弗细胞核因子-κB及血小板衍生生长因子等表达的影响被引量：1
- 2005年
- 研究旨在证实库普弗细胞是否具有血管紧张素Ⅱ1受体(AT1R);观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对体外培养的库普弗细胞核因子-κB(NF-κB)表达的影响,以及对库普弗细胞分泌血小板衍生生长因子(PDGF-BB)、转化生长因子β1(TGFβ1)的影响.
- 李旭孟莹陈琪杨希山周高速吴平生
- 关键词：库普弗细胞血小板衍生生长因子核因子-ΚB转化生长因子Β1体外培养
- 血管紧张素Ⅱ和醛固酮对肝星状细胞核因子κB信号转导通路的影响被引量：13
- 2005年
- 目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮对肝星状细胞(HSC)核因子κB信号转导通路的影响。方法 体内研究部分: Wistar大鼠 60只,分为 4组,每组 15只鼠。模型组: 40% CCl4油0 .25ml/100mg皮下注射,每周 2次;培哚普利治疗组: 40% CCl4油 0 25ml/100mg皮下注射,每周2次;培哚普利 2mg/kg灌胃,每日 1次。氯沙坦治疗组: 40% CCl4油 0 .25ml/100mg皮下注射,每周2次;氯沙坦 10mg/kg灌胃,每日 1次。对照组:橄榄油皮下注射。于第 4、6周取材。Masson三色染色检测胶原,进行纤维化分级。电泳迁移率变更分析 (EMSA)检测肝组织核因子κB的DNA结合活性。Western印迹检测抑制性核因子κBα(IκBα)的表达。体外研究部分:采用HSC T6细胞株,分别予AngⅡ1μmol/L和醛固酮 1μmol/L处理 0 .5、1、2、4h,观察对核因子κBDNA结合活性的影响。另外,观察AT 1受体阻断剂irbesartan、细胞外信号调节激酶 (ERK)特异性抑制剂U0126、抗氧化剂 乙酰半胱氨酸(NAC)、血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对核因子κBDNA结合活性的影响。Western印迹检测IκBα的表达;免疫组织化学检测核因子κB表达的核转移;逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测TNF-αmRNA的表达。结果 培哚普利和氯沙坦对实验性肝纤维化具有抑制作用;
- 李旭孟莹姜泊杨希山王卫卫郭丹赖卓胜张振书
- 关键词：核因子ΚB醛固酮培哚普利氯沙坦DNA结合活性IΚBΑ
- N-乙酰半胱氨酸对肝星状细胞核因子κB的影响被引量：8
- 2005年
- 目的 阐明N乙酰半胱氨酸(NAC)对肝星状细胞(HSC)核因子κB(NF-κB)结合活性和环氧合酶 2(COX-2)表达的影响机制。方法 体外培养大鼠 HSC-T6 细胞株,MTT法检测 NAC对HSC增殖的抑制作用。分别予NAC(1 mmol/L)处理 1 h;NAC和肿瘤坏死因子(TNF)α联合干预(先予 NAC处理1 h,再予TNFα干预1 h);TNFα100 ng/ml处理1 h。凝胶电泳移动抑制实验检测NF κB的结合活性。免疫蛋白质印迹检测相应的胞质内NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达。免疫组化观察 HSC-T6NF-κB表达的核转移。激光共聚焦检测NAC对 HSC-T6 中 COX-2 表达的影响。结果 NAC对 HSC具有明显的抑制作用。TNFα可诱导 NF-κB结合活性,而 NAC可显著抑制 TNFα诱导的 NF-κB结合活性。TNFα处理后 IκBα表达减弱,NAC处理后 IκBα表达增强。TNFα刺激 1 h后,NF κB表达从细胞质转移至细胞核内。NAC预处理后再予TNFα刺激,NF κB表达主要位于细胞质,很少发生核转移。HSC T6经TNFα处理后细胞内COX 2表达明显高于NAC和TNFα联合处理组以及正常对照组(P<0.05);NAC和TNFα联合处理组与正常对照组差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 NAC可抑制HSC增殖,抑制HSC-NF κB结合活性和COX-2表达。
- 李旭孟莹杨希山何敬东张振书
- 关键词：NACHSC-T6COX-2表达N-乙酰半胱氨酸肝星状细胞IΚBΑ
- 血管紧张素Ⅱ和醛固酮对肝星状细胞细胞外通路调控的体外研究被引量：9
- 2005年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(Aldo)对肝星状细胞(HSC)细胞外调节蛋白激酶(ERK)和激活蛋白1(AP1)信号转导通路的影响。方法采用HSCT6细胞株,分别予AngⅡ1μmol/L和Aldo1μmol/L处理,免疫Western印迹检测磷酸化P42/44蛋白水平。另外,观察AngⅡ1型受体(AT1受体)阻断剂伊贝沙坦(irbesartan),细胞外调节蛋白激酶(ERK)特异性抑制剂U0126,抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)、血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)和肿瘤坏死因子α(TNFα)对磷酸化P42/44蛋白水平的影响。电泳迁移率变更分析(EMSA)检测AP1DNA结合活性的变化;反转录聚合酶链反应检测α1Ⅰ型前胶原基因的表达。结果AngⅡ和Aldo可诱导磷酸化P42/44蛋白水平的变化,与阴性对照组的比值达4.3±0.1、4.0±0.1,并呈时间依赖性,10min达到峰值后逐渐减低。U0126可抑制磷酸化P42/44蛋白水平。irbesartan可抑制AngⅡ诱导的磷酸化P42/44蛋白水平。AngⅡ和Aldo可增强HSC的AP1的DNA结合活性。irbesartan和ACEI可显著抑制AP1的活性;U0126和NAC可以显著抑制AngⅡ诱导的AP1的活化,部分抑制Aldo诱导的AP1的活化。AngⅡ和Aldo可诱导α1Ⅰ型前胶原mRNA的表达。irbesartan、U0126和NAC可显著抑制AngⅡ诱导的α1Ⅰ型前胶原mRNA表达增强;U0126和NAC可显著抑制Aldo诱导的α1Ⅰ型前胶原mRNA表达增强。结论AngⅡ和Aldo可经ERK通路诱导HSCAP1结合活性增强。AngⅡ和Aldo可经AP1通路调控α1Ⅰ型前胶原基因的表达。
- 李旭孟莹蔡绍曦杨希山张艺军吴平生
- 关键词：醛固酮肝星状细胞体外研究胶原MRNA
- 培哚普利抗实验性大鼠肝纤维化的实验研究被引量：12
- 2004年
- 目的 研究血管紧张素转化酶抑制剂-培哚普利对实验性肝纤维化的影响,并探讨其作用机制。 方法 取雄性大鼠40只,随机分为3组。模型组:40％ CCl4油0.25 g/L皮下注射,每周2次;培哚普利治疗组:40％CCl4油0.25 g/L皮下注射,2次/周,同时予以培哚普利2 mg/kg灌胃,1次/d。对照组:橄榄油皮下注射。于第4、6周取材。光镜下动态观察组织学改变,检测血管紧张素Ⅱ1型受体(A T 1 R)、转化生长因子β1(TGF—β1)、血小板衍生性生长因子-BB(PDGF—BB)蛋白的表达、金属蛋白酶-2(MMP-2)的活性和血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)的含量。 结果 培哚普利治疗组肝组织炎症程度明显减轻,纤维间隔较为细小,血清HA、LN(μg/L)含量分别为82.07±13.66和94.84±3.54,模型组分别为147.86±18.92和113.72±2.14,t=2.27～2.87,P<0.05;培哚普利治疗组AT1R mRNA和蛋白质表达水平、TGF-β1和PDGF—BB蛋白质的表达低于模型组;模型组MMP-2活性高于培哚普利组。 结论 培哚普利对实验性大鼠肝纤维化具有抑制作用。
- 李旭孟莹杨希山张振书吴平生邹峻岭
- 关键词：培哚普利肝纤维化肝组织
- 醛固酮对肝星状细胞早期生长反应因子-1信号通路调控的体外研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨醛固酮(Aldo)对肝星状细胞(HSC)早期生长反应因子-1(EGR-1)信号传导通路的影响。方法采用HSC-T6细胞株,分别给予Aldo 1μmol/L处理10 min、30 min、1h、2h和3h, western blot检测磷酸化p42/44蛋白的表达。另外,观察细胞外信号调节激酶(ERK)1/2特异性阻断剂U0126、抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)(均预先处理60 min,再给予Aldo刺激)和肿瘤坏死因子α对磷酸化p42/44蛋白表达的影响。此外,给予Aldo、U0126和NAC处理后,用电泳迁移率分析(EMSA)检测EGR-1 DNA结合活性的变化;western blot检测血小板衍生生长因子-B(PDGF—B)蛋白的表达。免疫细胞化学检测Aldo对HSC PDGF-B蛋白表达的影响。结果Aldo可诱导磷酸化p42/44的表达,U0126可抑制磷酸化p42/44的表达。EMSA结果显示:Aldo干预HSC 30 min后EGR-1 DNA结合活性开始增加, 1h达到峰值,然后逐渐减低;U0126可显著抑制Aldo诱导的EGR-1活性增强;NAC对Aldo诱导的EGR- 1活性无抑制作用。Aldo可诱导HSC PDGF—B蛋白表达;U0126和NAC对PDGF—B表达无抑制作用。结论Aldo可经ERK1/2通路诱导HSC EGR-1活性增强。Aldo可经EGR-1通路调控PDGF-B的表达。
- 李旭孟莹杨希山吴平生张振书
- 关键词：醛固酮肝星状细胞信号通路HSC
- 1型血管紧张素Ⅱ受体在肝纤维化及正常肝组织中的表达及意义被引量：3
- 2004年
- 通过对人肝组织中1型血管紧张素Ⅱ受体(AT1R)的检测,探讨肝纤维化形成过程中AT1R的表达变化及它的肝纤维化发生发展中可能的作用.
- 王卫卫杨希山王捷李旭
- 关键词：肝纤维化发病机制
