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国家自然科学基金(30270510)

作品数：19 被引量：42H指数：4
相关作者：王应雄潘卫黎刚何俊琳刘学庆更多>>
相关机构：重庆医科大学四川省妇幼保健院重庆医科大学附属第一医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 19篇中文期刊文章

领域

  • 14篇医药卫生
  • 4篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 9篇蛋白
  • 9篇胚泡
  • 9篇子宫
  • 9篇子宫内膜
  • 9篇小鼠
  • 9篇内膜
  • 9篇宫内
  • 9篇宫内膜
  • 8篇着床
  • 7篇蛋白质
  • 7篇白质
  • 6篇蛋白质组
  • 6篇鼠胚
  • 5篇小鼠胚泡
  • 4篇胚胎
  • 3篇电泳
  • 3篇生殖
  • 3篇小鼠子宫
  • 3篇小鼠子宫内膜
  • 2篇粘附分子

机构

  • 19篇重庆医科大学
  • 1篇重庆医科大学...
  • 1篇四川省妇幼保...

作者

  • 18篇王应雄
  • 9篇黎刚
  • 9篇潘卫
  • 7篇何俊琳
  • 7篇刘学庆
  • 6篇翁亚光
  • 5篇陈雪梅
  • 5篇余秋波
  • 3篇刘孝云
  • 2篇徐以民
  • 2篇李茂萍
  • 2篇李红梅
  • 2篇杨戎
  • 2篇刘芳
  • 1篇杨曦
  • 1篇黄金园
  • 1篇曾兰
  • 1篇施琼
  • 1篇丁裕斌
  • 1篇范才波

传媒

  • 4篇生殖与避孕
  • 2篇中国优生与遗...
  • 2篇实验生物学报
  • 2篇重庆医科大学...
  • 2篇中国生物工程...
  • 2篇西南大学学报...
  • 1篇生殖医学杂志
  • 1篇细胞生物学杂...
  • 1篇贵阳医学院学...
  • 1篇四川大学学报...
  • 1篇国外医学（计...

年份

  • 1篇2008
  • 2篇2007
  • 5篇2006
  • 3篇2005
  • 7篇2004
  • 1篇2003
共 19 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
早孕小鼠子宫内膜ICAM-1的表达及意义被引量：10
2007年
探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因及蛋白在早孕小鼠子宫内膜的表达及其意义方法:收集妊娠1-5d的早孕小鼠子宫内膜,利用RT-PCR、免疫组织化和Western-blot方法检测ICAM-1基因及蛋白的表达及分布;着床期小鼠单侧宫角注射ICAM-1单抗,观察胚胎着床变化.结果:1·ICAM-1 mRNA孕D1到D3逐渐增高,D4达最高,D5开始降低;2·子宫内膜上皮细胞,基质细胞,血管上皮细胞均有ICAM-1的表达,阳性细胞数量、表达强度和表达时间呈现一定规律性;3·ICAM-1D1、D2、D3略有升高,D4有强表达,D5略有下降;4·单侧宫角注射ICAM-1单抗后,该侧胚胎发生流产.结论:ICAM-1在早孕小鼠子宫内膜的表达变化及分布,提示ICAM-1参与了胚泡着床,ICAM-1可能起调节子宫内膜的局部免疫作用.
余秋波何俊琳李红梅黄金园王应雄
关键词：细胞间粘附分子-1胚泡着床子宫内膜小鼠
蛋白质组技术在鼠胚胎早期发育研究中的应用被引量：3
2003年
人类基因组大规模测序 ,揭示基因组精细结构的同时 ,还显示出基因数量的有限性和结构的相对稳定。随分析仪器和生物技术的飞速发展 ,创立了与基因组相对应的蛋白质组学 ,将精力集中于从生命功能的执行体———蛋白质水平研究基因的表达及功能。生殖技术的研究已取得了惊人的进展 ,但人们对生殖尤其是人类生殖的分子机制了解仍很贫乏。鼠胚胎发育过程蛋白质组的研究 。
潘卫王应雄黎刚
关键词：蛋白质组技术早期发育蛋白质组生殖
小鼠胚泡黏附时子宫内膜Galectin-1的变化被引量：5
2004年
目的:探讨小鼠胚胎黏附时子宫内膜Galectin-1的变化。方法:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析妊娠d 5小鼠胚泡黏附时着床点、着床旁子宫内膜总蛋白,以同龄未交配鼠子宫内膜为对照,差异蛋白质组学显示pI约5.1、分子量约15 ku的蛋白点在着床点、着床旁子宫内膜表达上调,且在着床点更明显。对此蛋白点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)。结果:Mascot: PMF在SWISS-PROT数据库查询为鼠源性Galectin-1。RT-PCR结果显示d 5孕小鼠子宫内膜Galectin-1 mRNA水平也明显增加。结论:Galectin-1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。
潘卫王应雄黎刚翁亚光刘孝云
关键词：GALECTIN-1着床蛋白质组肽质量指纹谱
抗rmNDPK-B抗体的制备、纯化、鉴定及应用
2007年
为制备抗rmNDPK-B多克隆抗体,以纯化后的rmNDPK-B为抗原,改良法免疫新西兰兔,琼脂双向扩散法分析抗体滴度,SDS-PAGE和Western-blot鉴定纯化后的抗体,结果发现,已获得高效价、高纯度的抗rmNDPK-B多克隆抗体;再分别以此抗体和抗rhNDPK-B抗体为一抗,Western-blot和免疫组织化学法检测小鼠子宫内膜组织中的NDPK-B的表达和分布.结果提示,在检测妊娠小鼠子宫内膜组织NDPK-B的表达时,抗rmNDPK-B抗体的特异性明显高于抗rhNDPK-B抗体.妊娠小鼠子宫内膜组织NDPK-B的表达显著高于非妊娠鼠.这表明用改良法制备的抗rmNDPK-B多克隆抗体具有高特异性、高效价和较高的灵敏性.nm23-M2/NDPK-B可能参与了胚泡着床过程.
李茂萍何俊琳王应雄刘学庆陈雪梅翁亚光
关键词：多克隆抗体
小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A的表达被引量：1
2004年
nm23家族除与肿瘤转移抑制有关,它还参与调节正常细胞的发育、增殖、分化及凋亡等过程。运用RT-PCR、Western blot 和免疫组织化学技术,分析小鼠胚泡黏附时子宫内膜着床点和着床旁组织nm23-M1/NDPK A 的表达,以未交配鼠作对照,为进一步阐明胚泡着床的机制提供有意义的实验依据。RT-PCR 结果显示,小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A mRNA 表达明显高于对照组,并且着床点明显高于着床旁,Western blot 和免疫组织化学分析nm23-M1/NDPK A 蛋白表达,也得到一致的结果。提示nm23-M1/NDPK A 参与胚泡着床这一重要生命活动过程。
潘卫王应雄黎刚杨戎何俊琳刘学庆
关键词：着床RT-PCR小鼠胚泡子宫内膜胚胎
肿瘤抑制基因Nm23-M1原核表达载体的构建和表达
2006年
目的:构建鼠Nm23-M1基因的原核表达载体并进行表达。方法:应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术扩增Nm23-M1基因,将其克隆于pQE30质粒中,测序正确后,构建重组体pQE30-Nm23-M1,在大肠杆菌中诱导NM23-M1蛋白表达。结果:SDS-PAGE凝胶电泳分离显示,在分子量大约17.5kD处有一诱导表达蛋白带,表达蛋白量占菌体蛋白量的15%,通过Westernblot证实,表达产物与抗人Nm23-H1单克隆抗体有特异性免疫反应。经Ni-NTA柱纯化,获得电泳均一性为92%的重组蛋白。结论:成功构建Nm23-M1表达载体,并获得了重组NM23-M1蛋白。
刘芳王应雄翁亚光何俊琳刘学庆杨曦黎刚
关键词：基因表达
小鼠胚泡黏附时已黏附侧与未黏附侧子宫内膜蛋白质组差异的研究被引量：2
2004年
目的 :用蛋白质组相关技术分析小鼠胚泡黏附时已粘附侧与未黏附侧子宫内膜蛋白质组的差异 ,探讨小鼠胚泡在双侧子宫黏附不同步现象发生的可能机制。方法 :用固相 pH梯度双向凝胶电泳 (2D -PAGE)分别分离妊娠五天 (D5)小鼠胚泡已黏附侧与未黏附侧子宫内膜的蛋白质组。银染显色 ,PDQuest 2DE软件分析。结果 :图像分析测得两种胶的匹配率达 82 .5 % ,在等电点pI4～ 7、分子量 14 .0～ 75 .4kD范围内分离得胚泡黏附侧小鼠子宫内膜蛋白点大约 76 0个 ,胚泡未黏附侧小鼠子宫内膜蛋白点大约 72 0个 ,其中至少 6 0个蛋白点在两种子宫内膜间有 2倍以上的量变。结论 :小鼠双侧子宫内膜蛋白质的差异表达 。
潘卫王应雄杨戎
关键词：蛋白质组双向凝胶电泳胚泡着床
着床期小鼠子宫内膜Trophinin基因表达研究被引量：3
2004年
目的 :研究细胞粘附分子Trophinin在着床期小鼠子宫内膜的表达。方法 :收集孕 1～ 6天的小鼠子宫内膜 ,采用RT-PCR技术测定TrophininmRNA的表达水平。 结果 :未孕鼠及孕D1、D2未检测到其表达 ,孕D3、D4、D5大量表达 ,D6仅有少量表达或不表达。结论 :TrophininmRNA在小鼠子宫内膜的表达时间与胚泡着床时间一致 ,提示Trophinin可能参与了胚泡对子宫内膜的粘附。
施琼余秋波王应雄
关键词：TROPHININ子宫内膜胚泡着床
nm23-M2cDNA的克隆、表达及抗体制备被引量：2
2006年
目的:通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。方法:构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织化学法比较它与抗NM23-H2抗体的特异性。结果:nm23-M2cDNA序列完全正确,表达的17kD可溶性融合蛋白占菌体总蛋白45%,纯化后纯度97%以上,抗血清效价为1∶64-128,提纯后纯度在90%以上,特异性高于抗NM23-H2抗体。结论:成功构建了pQE30/nm23-M2质粒,获得高纯度重组nm23-M2蛋白(rNM23-M2),并制备了高效价、高度特异性的抗血清,为进一步研究nm23-M2基因功能和蛋白作用奠定了基础。
李茂萍何俊琳王应雄翁亚光刘学庆陈雪梅
关键词：克隆抗体
精液蛋白质组研究进展
2005年
后基因组时代的主要研究任务之一即是蛋白组研究。蛋白质组学方法发展迅速 ,已被广泛应用于寻找生理状态与疾病相关的差异表达蛋白质。生殖技术已取得了很大的进展 ,但人们对生殖尤其是人类生殖的分子机制了解仍很贫乏。受精是雌雄配子发育向新的合子个体发育转变的枢纽。利用蛋白质组研究技术分析精液 ,可从蛋白质分子整体水平了解受精的机制。
黎刚潘卫王应雄
关键词：蛋白质组精子精液受精
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