云南省科技攻关计划云南省科技攻关计划项目(2002NG-18)
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 相关作者：王剑松徐鸿毅颜汝平李翀谢蜀生更多>>
- 相关机构：昆明医学院第二附属医院北京大学中国科学院更多>>
- 发文基金：云南省科技攻关计划云南省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 凋亡抑制基因Survivin与膀胱癌
- 2006年
- Survivin属于凋亡抑制蛋白家族之一,在人类肿瘤中都有不同程度的表达,其中以膀胱移行细胞癌为著,有抑制细胞凋亡和参与细胞周期的调节作用,对膀胱肿瘤的发生发展起重要作用。他们的高表达也许能为临床诊断和将来靶向治疗提供潜在价值,本文就其生物学特点及在膀胱癌中的研究现状作一概述。
- 王丽军王剑松
- 关键词：膀胱肿瘤凋亡基因SURVIVIN
- 中华眼镜蛇毒膜毒素诱导膀胱癌细胞凋亡的检测被引量：5
- 2006年
- 目的研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT-12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法。方法MT-12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoechest33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率。结果3种形态学检测方法均能观察到细胞凋亡的形态学变化。3μg/mLMT作用2、4、8、12、24h和36h,双染法流式细胞术检测的细胞凋亡率分别是46.94%、51.2%、28.85%、20.43%、6.03%和5.19%,阴性对照组凋亡率为0.77%。DNA电泳未能检测到细胞凋亡的DNAladder。结论MT-12能诱导体外培养的BIU-87细胞凋亡,且具有时间依赖性。透射电镜观察凋亡细胞的形态特征最可靠。AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡,其特异性、敏感性、重复性和准确性高。
- 颜汝平王剑松李翀谢蜀生王婉瑜徐鸿毅
- 关键词：膀胱肿瘤凋亡
- 荷人膀胱癌原位移植瘤Balb/c裸小鼠动物模型的建立被引量：6
- 2005年
- 目的建立一种简便、可靠的荷人膀胱癌原位移植瘤动物模型,核磁共振成像(MRI)评价成瘤过程。方法常规培养人膀胱癌E-J细胞株细胞,Balbc裸小鼠膀胱穿刺后腔炮灌注E-J细胞悬液,建立荷人膀胱癌原位移植瘤动物模型,核磁共振成像(MRI)监测肿瘤的生长,45～50天处死动物,标本常规行HE染色,并使用抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1通过免疫组化鉴定移植瘤。结果20只动物有19只荷瘤,成瘤率为95%;接种后10～14天MRI检查可发现明显的充盈缺损。肿瘤病理分级为Ⅰ～Ⅱ级,T1期65%(13只),T2期20%(4只),T3期10%(2只),T4期5%(1只),所有动物无远处转移。HE染色示移行细胞癌,免疫组化(S-P法)染色检测瘤细胞表面抗原的表达呈阳性,与体外培养的E-J细胞免疫组化染色结果一致。结论膀胱穿刺腔内灌注法建立荷人膀胱癌原位移植瘤裸小鼠动物模型十分简便,成瘤率高,有助于研究膀胱癌的生物学行为和腔内灌注治疗。
- 颜汝平王剑松李翀杨德林谢蜀生徐鸿毅
- 关键词：膀胱癌动物模型原位移植瘤裸小鼠
- 膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin表达的临床意义被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨Survivin对膀胱癌早期发现、常规筛选且无损伤的方法,研究其与肿瘤病理分级(期)的相关性。方法:留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病、10例健康志愿者新鲜中段晨尿,同上53例术后癌组织。利用巢式RT-PCR、实时定量PCR技术检测Survivin的表达,同时行尿脱落细胞学及膀胱镜病检。结果:53例膀胱癌患者尿及癌组织中Su rvivin均有表达,敏感性为100%,特异性为90%。与尿脱落细胞学敏感性比较两者差异有统计学意义(P<0.05),与膀胱镜检比较差异无统计学意义。三种方法特异性比较差异无统计学意义(P>0.05)。癌组织中Survivin的量与肿瘤病理分级(期)正相关(P<0.01)。结论:检测尿脱落细胞中Survivin的表达有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法。Survivin在膀胱的演进过程中可能起重要作用,可望作为检测膀胱癌恶化进展的指标。
- 袁龙王剑松徐本玲袁鹏韩广森吴惠泽
- 关键词：移行上皮癌实时定量PCR
- 尿及癌组织中Survivin的表达对膀胱癌的早期诊断价值被引量：2
- 2006年
- 目的通过对膀胱移行上皮癌患者尿脱落细胞及癌组织中抑制凋亡相关基因Survivin的检测,探讨早期发现、常规筛选膀胱癌且无损伤的方法。方法留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病患者及10例健康志愿者新鲜中段晨尿200 mL,对53例膀胱移行上皮癌患者术后癌组织,用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)检测Survivin的表达,同时行尿脱落细胞学检查及膀胱镜取材病检。结果用巢式RT-PCR检测53例膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin均有表达,所有样本尿中Survivin的表达敏感性为100%,特异性为90%。尿脱落细胞学敏感性为37.7%,特异性为100%。膀胱镜病检敏感性、特异性均为100%。尿及癌组织中Survivin与尿脱落细胞学敏感性比较有显著差异(P<0.05),与膀胱镜检相同。而特异性分别为90%、100%、100%,P>0.05,无差异。结论用巢式RT-PCR方法检测膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin的表达,其敏感性、特异性相同。尿脱落细胞Survivin表达敏感性、特异性高。尿取材无损伤、方便,敏感性优于尿脱落细胞学检查,与膀胱镜检相当,特异性与尿脱落细胞学检查及膀胱镜病检无差别,且对膀胱癌前病变的归转有一定价值。检测尿中Survivin有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法。
- 袁龙王剑松卢永伟左毅刚石永福杨德林徐鸿毅
- 关键词：膀胱肿瘤巢式逆转录聚合酶链反应
- 中华眼镜蛇毒膜毒素诱导人膀胱癌细胞凋亡的实验研究
- 2008年
- 目的研究中华眼镜蛇毒膜毒素12(MT-12)诱导人膀胱癌细胞凋亡的作用.方法不同浓度的MT作用于体外培养的BIU-87和E-J细胞,分别在12、24和36h用HE染色、透射电镜观察细胞的形态变化,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率.结果倒置显微镜和透射电镜下观察到凋亡细胞的核固缩、染色体边集、核碎裂和凋亡小体等形态学变化.MT-12浓度分别为1、2和3μg/mL时,双染法流式细胞术均检测到2株细胞凋亡率,实验组凋亡率和对照组比较有统计学意义(P<0.05).MT-12剂量和作用时间相同时,BIU-87细胞的凋亡率明显高于E-J细胞(P<0.01).结论MT-12能诱导体外培养的BIU-87和E-J细胞凋亡,2株细胞凋亡率存在差异,可能与肿瘤细胞的生物学行为、MT-12诱导2株细胞凋亡机制的不同有关.
- 王剑松颜汝平李翀丁明霞王婉瑜徐鸿毅
- 关键词：膀胱肿瘤凋亡
- 膀胱癌原位移植瘤动物模型
- 2006年
- 颜汝平王剑松徐鸿毅
- 关键词：膀胱癌动物模型原位移植瘤
