国家自然科学基金(30270561)
- 作品数：7 被引量：5H指数：2
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- 花生四烯酸表氧化酶代谢产物促进内皮细胞趋化和迁移
- 2005年
- 目的研究花生四烯酸表氧化酶代谢产物环氧二十碳四烯酸(epoxyeicosatrienoicacids,EETs)对牛主动脉内皮细胞(bovineaorticendothelialcells,BAECs)趋化和迁移的影响及机制。方法BAECs给予EETs和(或)信号转导抑制剂,以刮痕修复、Boyden小室方法检测细胞趋化和迁移的改变。结果EETs均显著促进BAECs的趋化和迁移,并呈剂量依赖效应,而一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)抑制剂、胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellularsignal regulatedkinase,ERK)抑制剂和磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol3kinase,PI3K)抑制剂可显著抑制上述效应。结论EETs可显著促进BAECs的趋化和迁移,其作用由MAKP和PI3K介导,部分由EETs上调的内皮NOS介导。
- 王炎陈积雄蒋建刚宁耀贵王涛王家宁汪道文
- 关键词：细胞运动趋化因子主动脉
- 细胞色素P450表氧化酶通过PI3K/AKT及ERK/MAPK途径抗内皮细胞凋亡的机制
- 2012年
- 目的:研究细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导内皮细胞抗凋亡的机制。方法:在原代培养的牛主动脉内皮细胞(BAECs)中,分别转染细胞色素P450表氧化酶基因rAAV-F87V2周,证实其在内皮细胞中高效表达。用TNF-α(10ng/ml)和放线菌素D(ActD)(5ng/ml)诱导凋亡,流式细胞计数观察其凋亡变化,用Western blot法检测蛋白激酶B(AKT)及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)的磷酸化水平,用流式细胞计数的方法观察空白组及转染F87V组加入AKT抑制剂、LY294002、芹菜素及PD98059后的细胞凋亡比例。结果:与对照组比较,转染细胞色素P450表氧化酶基因后BAECs能高效表达P450表氧化酶基因F87V(P<0.05);流式计数凋亡细胞数,转染表氧化酶较对照组明显减少(P<0.05);转染CYP P450表氧化酶后,AKT及ERK的磷酸化增加;磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和MKK的抑制剂后转染F87V组较对照组凋亡细胞比例明显减少(P<0.05)。结论:细胞色素P450表氧化酶基因rAAV-F87V能通过MAPK(ERK1/2)与PI3K/AKT途径发挥抗凋亡作用。
- 陈积雄黄晓燕郑茵吴智勇汪道文
- 关键词：细胞色素P450表氧化酶内皮细胞凋亡
- 苯扎贝特对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响
- 2004年
- 目的 探讨苯扎贝特对体外培养的牛血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells,VSMC)增殖的影响 ,以及可能的信号转导通路。方法 采用改良的贴块法培养小牛胸主动脉VSMC ,α actin单克隆抗体免疫组织化学染色鉴定培养细胞。以MTT法反映VSMC增殖情况 ;用WesternBlot方法检测与细胞增殖有关的丝裂原激动蛋白激酶 (MAPK)信号传导通路。结果 苯扎贝特呈剂量依赖性抑制VSMC增殖 ,其抑制增殖的作用主要是通过MAPK传导途径。结论 苯扎贝特通过抑制VSMC增殖可能参与延缓动脉粥样硬化及经皮冠状动脉腔内成行术 (percutaneoustransluminalcoronaryangioplasty ,PT CA)术后再狭窄的发生、发展。
- 赵荫涛赵春霞汪培华汪道文
- 关键词：苯扎贝特主动脉血管平滑肌细胞增殖动脉粥样硬化
- 细胞色素P450表氧化酶抑制肿瘤坏死因子诱导内皮细胞凋亡的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:研究细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞凋亡可能的机制。方法:原代培养的牛主动脉内皮细胞分为4组,分别转染细胞色素P450表氧化酶基因rAAV-GFP、rAAV-2J2、rAAV-2C11、rAAV-F87V病毒液,2周后用肿瘤坏死因子?α(TNF?α)(10ng/mL)和放线菌素D(ActD)(5ng/mL)诱导凋亡,GFP组不加TNF?α和ActD作为对照,另设空白对照组,用Western blot法检测Bcl-2和Bax的表达,并用酶标法检测Caspase-3的活性。结果:Western blot结果表明转染CYP P450表氧化酶的各组后Bcl-2表达升高,Bax表达下降,Caspase-3的活性下降,较空白对照组及GFP对照组差异有统计学意义(P均<0.01)。结论:细胞色素P450抗内皮细胞凋亡的机制可能与上调Bcl-2表达,下调Bax表达及抑制Caspase-3活性有关。
- 陈积雄黄晓燕汪道文
- 关键词：内皮细胞凋亡BAXCASPASE-3
- 花生四烯酸表氧化酶代谢产物EETs促内皮细胞的增殖被引量：2
- 2005年
- 目的研究花生四烯酸表氧化酶及其代谢产物环氧二十碳烯酸(EETs)对牛主动脉内皮细胞 (BAECs)增殖的影响及机制。方法BAECs使用腺相关病毒介导的表氧化酶转染或给予EETs,或同时给予信号转导抑制剂,分别行细胞计数、噻唑蓝比色法(MTT)检测、流式细胞仪检测。结果表氧化酶转染或EETs刺激均显著促进BAECs的增殖并呈剂量依赖效应,而氧化亚氮合酶抑制剂、胞外信号调节蛋白激酸 1 /2 (extracellularsiynal regulatedkinase,ERK)和磷脂酰肌醇 3 -激酸 (phosphatidyli nositol3 kinase,PI3K)均可显著抑制上述效应。结论EETs可显著促进BAECs增殖,其作用由ERK和PI3K介导,部分由EETs上调的NO介导。
- 王炎王家宁汪道文
- 关键词：EETS内皮细胞细胞增殖
- 细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞凋亡的影响
- 2005年
- 目的研究细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞(bovineaorticendothelialcells,BAECs)凋亡的影响。方法在原代培养的BAECs中,分别转染构建在腺相关病毒载体内的细胞色素P450表氧化酶基因2J2,2C11,F87V两周后,用肿瘤坏死因子(TNF-α)(10ng/ml)和放线菌素D(ActD)(5ng/ml)诱导内皮细胞凋亡,通过细胞形态学和流式细胞计数观察其凋亡变化,同时采用Westernblot分析检测Bcl-2和P38和丝裂原激动蛋白激酶ERK的表达水平。结果与对照相比,转染细胞色素P450表氧化酶基因后BAECs凋亡细胞数减少,Bcl-2表达增加,P38表达减低,ERK的磷酸化水平增加。结论细胞色素P450表氧化酶能明显的抑制肿瘤坏死因子诱导的BAECs凋亡,并可能通过上调Bcl-2、下调P38的表达水平和通过增加ERK的磷酸化水平发挥抗凋亡作用。
- 陈积雄蒋建刚汪道文
- 关键词：肿瘤坏死因子内皮细胞凋亡
- 细胞色素P450表氧化酶对内皮细胞凋亡及NF-κB表达的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究细胞色素P450表氧化酶对肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞凋亡及NF-κB活性的影响。方法在原代培养的牛主动脉内皮细胞中,分别转染细胞色素P450表氧化酶基因rAAV-2J2,rAAV-2C11,rAAV-F87V两周后,用肿瘤坏死因子(TNF-α)(10ng/ml)和放线菌素D(ActD) (5ng/ml)诱导凋亡,通过DNA ladder观察细胞凋亡,同时ELISA法测定NF-κB的活性。结果与对照组相比,转染细胞色素P450表氧化酶基因后能抑制内皮细胞的凋亡,同时诱导细胞凋亡后,转染CYP450各基因组NF-κB中P65的活性较对照组明显降低。结论细胞色素P450表氧化酶能明显的抑制肿瘤坏死因子诱导的内皮细胞凋亡,并通过抑制NF-κB的核转位发挥抗凋亡作用。
- 陈积雄黄晓燕吴智勇汪道文
- 关键词：细胞色素P450表氧化酶内皮细胞凋亡NF-ΚB
