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国家科技重大专项(2014ZX10001001-002)

作品数：4 被引量：9H指数：2
相关作者：梁华李丹贾曼雪赵阳阳沈弢更多>>
相关机构：中国疾病预防控制中心北京大学更多>>
发文基金：国家科技重大专项国家重点实验室开放基金北京市自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 2篇单核
  • 2篇单核细胞
  • 2篇人类免疫
  • 2篇人类免疫缺陷
  • 2篇人类免疫缺陷...
  • 2篇缺陷病
  • 2篇免疫缺陷
  • 2篇免疫缺陷病
  • 2篇免疫缺陷病毒
  • 2篇核细胞
  • 2篇感染者
  • 2篇病毒
  • 1篇单克隆
  • 1篇体外
  • 1篇体外扩增
  • 1篇配体
  • 1篇细胞表型
  • 1篇细胞毒
  • 1篇细胞毒效应

机构

  • 4篇中国疾病预防...
  • 1篇北京大学

作者

  • 4篇梁华
  • 3篇李丹
  • 1篇赵阳阳
  • 1篇沈弢
  • 1篇贾曼雪
  • 1篇李亚锋
  • 1篇鞠斌
  • 1篇范瑾
  • 1篇王硕

传媒

  • 4篇中华微生物学...

年份

  • 3篇2015
  • 1篇2014
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
CD137分子在 HIV 特异性 T 淋巴细胞单克隆分选和扩增中的应用
2015年
目的：建立通过CD137分子对HIV特异性T淋巴细胞进行单克隆分选和体外扩增的方案，对扩增后T细胞的数量和表型进行鉴定。方法分离HIV感染者外周血单个核细胞，采用多色流式细胞染色技术，分离HIV Gag特异性CD3＋CD8＋CD137＋T细胞，单个细胞分选入96孔板，在体外加入饲养细胞和细胞因子进行培养，克隆扩增后14 d对扩增的细胞进行表型鉴定，14 d和28 d分别计算扩增倍数。结果 CD137分子在未接受抗原刺激的状态下表达量很低， Gag肽库刺激后， CD137表达升高，并且表达CD137的CD8细胞均分泌IFN-γ。体外扩增14 d可以获得106的CD8 T细胞，28 d可获得107～108的 CD8 T细胞。在 Gag 肽库刺激后可达到接近100％的活化。结论CD137可替代IFN-γ等传统的细胞因子对HIV抗原特异性T细胞进行筛选和体外扩增，扩增后的T细胞仍保持非常好的活性状态。
李丹梁华鞠斌范瑾李亚锋王硕邵一鸣
关键词：CD137HIV体外扩增
基于流式细胞术评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的方法学建立和应用被引量：2
2015年
目的：建立基于流式细胞术的评价单核细胞介导的抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应的检测方法。方法 PKH26和CFSE染色的P815细胞为靶细胞，与P815特异性抗体孵育形成抗原抗体复合物，加入外周血单个核细胞作为效应细胞，共同孵育后流式细胞术检测 CD3－CD14＋PKH26＋CFSE－细胞群的百分比，并确定最佳效靶比及效应细胞和靶细胞的孵育时间。运用上述方法对23例HCV慢性感染者和22例健康人的单核细胞介导的抗体依赖性细胞毒作用（ antibody depend-ent cellular cytotoxicity ， ADCC）进行比较分析。结果可通过流式细胞技术检测CD3－CD14＋PKH26＋CFSE－细胞群来评价单核细胞介导的ADCC效应，最佳效靶比为10∶1，最佳杀伤孵育时间为4 h。慢性HCV感染者单核细胞介导的ADCC效应较健康对照明显降低（ P＝0．009）。结论本研究建立了基于流式细胞术的单核细胞介导的ADCC效应的检测方法，为病毒感染及药物研发中免疫学评价提供快速、敏感、安全的检测手段。
梁华黄向博沈弢邵一鸣
关键词：单核细胞流式细胞术
早期 HIV-1感染者单核细胞对 TLR 配体反应性研究被引量：3
2014年
目的：探讨HIV-1早期感染者体内单核细胞的成熟状态和对TLR配体的反应特点，了解HIV-1感染早期单核细胞功能状态和与疾病进展状态的相关性。方法选取35例HIV-1早期感染者和13例HIV阴性的健康人，采血分离外周血单个核细胞（ PBMC ）后纯化出单核细胞，流式细胞术检测单核细胞表面活化／抑制分子表达。用脂多糖（ LPS）和Pam3CSK4分别刺激单核细胞，培养20 h后，流式细胞术检测单核细胞表面活化／抑制分子表达，ELISA方法检测培养上清中促炎细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌水平。结果 HIV-1早期感染者，单核细胞表面活化分子CD80、CD86、CD40和抑制分子PD-L1表达均升高（除CD86 P＝0．01外，P均＜0．001），CD40表达水平与血浆病毒载量正相关（P＜0．001，r＝0．553）。单核细胞受LPS和Pam3CSK4刺激后，活化成熟能力降低，HLA-DR、CD80、CD86、PD-L1表达增加均较健康对照低（P＜0．001），而促炎细胞因子 TNF-α（LPS：P＝0．004，Pam3CSK4：P＝0．012）和IL-6分泌（LPS：P＝0．006）增加。结论在HIV-1感染早期，单核细胞即处于免疫活化状态，受TLR配体刺激后促炎细胞因子分泌增加可能与HIV-1感染后的微生物移位和免疫活化相关。
梁华赵阳阳李丹邵一鸣
关键词：人类免疫缺陷病毒单核细胞
HIV-1早期感染者外周血中CD56＋T细胞表型和功能特征分析被引量：4
2015年
目的探讨HIV-1早期感染者外周血中CD56＋T细胞表型和功能变化特点，了解该变化与疾病进展状态的相关性。方法采集HIV-1早期感染者样品53例，HIV-1阴性健康对照31例，分离外周血单个核细胞（PBMC）后，流式细胞术检测CD56＋T细胞数量及细胞表面分子CD16、CD161、NKB1、NKG2A、NKp46、NKG2D、NKG2C、CD158a表达水平。将PBMC与K562细胞共孵育，检测CD56＋T细胞分泌细胞因子IFN．吖和TNF—d的水平，以及细胞毒效应分子CD107a的水平。结果HIV-1早期感染者外周血中CD56＋T细胞数量较健康对照明显减少（P=0．025），且与血浆病毒载量呈负相关（P=0．021，r=-0．316）。CD56＋T细胞表面分子CD16（P=0．003）、CD161（P=0．023）、NKBl（P=0．023）、NKp46（P=0．021）表达较健康对照显著降低，其中NKB1的表达水平与CD4＋T细胞数量呈正相关（P=0．007，F=0．364），而与病毒载量呈负相关（P=0．030，r=-0．299）。HIV-1早期感染者CD56＋T细胞自发分泌IFN-1和TNF-d以及细胞毒效应分子CD107a水平明显低于健康对照（P均〈0．001），在靶细胞K562存在情况下，其杀伤能力也显著低于健康对照（IFN-γ和TNF-α：P均〈0．001，CD107a：JP=0．016）。结论HIV-1早期感染者CD56＋T细胞数量下降，表型发生改变，分泌细胞因子和细胞毒效应分子能力下降，提示在HIV-1感染早期CD56’T细胞即受到损伤，且与疾病进展相关。
梁华贾曼雪李丹邵一鸣
关键词：人类免疫缺陷病毒表型细胞毒效应
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