中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(无)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
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- 高温纤维素降解菌的筛选及内切酶基因的克隆表达被引量：7
- 2014年
- 以滤纸条作为唯一碳源从以牛粪和砻糠为原料的堆肥样品中分离到了8株具有纤维素降解特性的微生物,其中菌株T1和T2在刚果红培养基上培养48 h后的水解圈明显大于其他菌株。对菌株T1和T2进行了生理生化和16S rRNA序列分析,克隆了菌株T2的内切酶基因并对该基因进行了结构域分析,同时构建了表达载体p28-egB并将其转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中进行表达。研究结果表明:(1)菌株T1和T2可分别鉴定为Bacillus cereus和Bacillus subtilis;(2)菌株T2的内切酶基因片段大小为1500 bp,编码499个氨基酸,结构域分析显示该酶由两个不连续的结构域组成,其一为N端催化结构域,由糖基水解酶家族5组成,其二为C端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成;(3)在E.coli BL21中成功表达了菌株T2的内切酶基因,SDS-PAGE电泳图谱显示该蛋白大小约为50 KD,浓度约为93.14 mg·L-1。
- 田伟王磊李刚汪贞李妍张纪兵
- 关键词：纤维素降解菌克隆结构域
- 牛粪高温堆肥过程中木质纤维素降解及相关生物学特性研究被引量：10
- 2014年
- 为探明木质纤维素在堆肥过程中的降解情况，以牛粪和砻糠为原料，进行为期112 d的小型堆肥试验，在不同堆肥阶段测定物料的木质纤维素含量及相关降解酶活性，并在高温和降温阶段从物料中分离鉴定纤维素降解菌。结果表明，堆肥过程中物料的纤维素与半纤维素含量逐步降低，总降解率分别为56.26％和61.47％；而木质素的相对含量略有增加；与木质纤维素降解相关的纤维素酶和木聚糖酶的活性均呈现先增高后降低的趋势，其酶活均在第42天达到峰值，分别为85.75μg glucose·g-1·DW·h-1和165.65μg·reducing sugar·g-1·DW·h-1，而β-葡聚糖苷酶的活性在22～42 d之间维持在较高水平（2.79～3.30μmol pNPG·g-1·DW·h-1）；此外，在堆肥的高温和降温腐熟阶段均分离并鉴定出Pseudoxanthomonas，Bacillus，Paenibacillus， Ureibacillus和Geobacillus等5个属的可培养高温纤维素降解菌。
- 田伟张振华汪贞王霞李妍刘振华
- 关键词：堆肥木质纤维素纤维素降解菌
