国家自然科学基金(31070878)
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
- 相关作者：李春义赵海平孙红梅褚文辉王大涛更多>>
- 相关机构：中国农业科学院特产研究所江苏科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 鹿茸发育的组织来源及其相互作用机制研究进展被引量：5
- 2014年
- 本综述介绍了鹿茸发育的组织来源及其相互作用机制的研究进展,阐明了鹿茸发育的组织细胞特性,进一步分析了鹿茸发育机制中待解决的问题。
- 鲁晓萍王大涛孙红梅褚文辉赵海平章秀婷李春义
- 关键词：鹿茸皮肤骨膜干细胞
- DNA甲基化修饰与干细胞分化被引量：1
- 2012年
- 干细胞自我更新及分化潜能一方面是内源性转录因子相互协调控制的结果,另一方面表观遗传修饰也起着重要的作用。该文综述了DNA甲基化修饰的机理、哺乳动物DNA甲基化的特点以及干细胞分化的DNA甲基化修饰。
- 孙红梅刘琳玲丛波李春义
- 关键词：干细胞分化表观遗传DNA甲基化
- 梅花鹿生茸区骨膜细胞基因片段测序分析
- 2013年
- 在已经构建的梅花鹿生茸区骨膜细胞cDNA表达文库的基础上对文库中的噬菌斑进行随机挑取筛选,对筛选出来的噬菌斑进行质粒亚克隆、鉴定及表达序列标签序列测定和生物信息学分析。通过随机筛选及生物信息学分析的方法发现,在梅花鹿生茸区骨膜细胞中有特殊意义的基因或者基因片段。随机挑选表达频率比较高的11个基因片段中有6个基因片段具有重要意义,对这6个基因片段进行了生物信息学分析,为进一步的鹿茸生物学研究打下了基础。
- 鲁晓萍孙红梅褚文辉王大涛赵海平李春义
- 关键词：鹿茸CDNA文库基因克隆
- 草原红牛胰岛素样生长因子结合蛋白6基因外显子2的遗传多态性及遗传效应分析
- 2014年
- 本试验旨在研究草原红牛不同基因型与屠宰肉用性状的关联性。选用草原红牛作为试验群体,采用PCR-SSCP方法检测胰岛素样生长因子结合蛋白6(insulin-like growth factors binding proteins 6,IGFBP6)基因外显子2的多态性,采用最小二乘法拟合线性模型将突变位点的不同基因型与牛屠宰肉用性状进行关联分析。结果表明,在IGFBP6基因外显子2上发现1个多态性位点A180G,具有3种基因型:AA、AB和BB。SPSS 13.0统计分析结果表明,IGFBP6基因外显子2AB和BB基因型净肉重极显著高于AA基因型(P<0.01);眼肌面积和骨重显著高于AA基因型(P<0.05),而在宰前活重、胴体重、肾脂重和肋脂重方面3种基因型个体之间差异不显著(P>0.05)。结果显示,IGFBP6基因的多态性与屠宰肉用性状具有一定的关联性,可为今后草原红牛的育种保种工作提供理论依据,并对草原红牛肉用性状的改善提供参考。
- 杨春刘振李春义
- 关键词：草原红牛遗传多态性
- 高通量测序技术及其在鹿茸生物学领域的应用被引量：1
- 2011年
- 随着测序技术的快速发展,各种新方法层出不穷,其测序数据量也在呈几何级数增长。文章对目前最具有代表性的4种高通量测序技术———焦磷酸(GS FLX)测序法、单分子阵列技术(Solexa)测序法、连接酶(SOLiD)测序法和单分子(HeliScope)测序法的测序原理、基本操作流程和测序能力作一综述,并对高通量测序技术在鹿茸生物学研究方面的应用进行了分析。
- 赵海平杨福合邢秀梅吴琼李春义
- 关键词：高通量测序
- 东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建被引量：1
- 2013年
- 构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,为进一步研究galectin-1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。
- 秦欣欣孙红梅褚文辉王大涛郭倩倩章秀婷李春义
- 关键词：RNAI
- 梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液抗血清的制备
- 2013年
- 为了制备高质量的兔抗梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液血清,用于免疫学筛选cDNA表达文库,试验采用淋巴结注射和背部皮下注射的方法制备了兔抗梅花鹿生茸区骨膜细胞裂解液血清。结果表明:制备的抗血清效价是1∶128,质量较高。
- 鲁晓萍褚文辉孙红梅王大涛刘琳玲赵海平李春义
- 关键词：血清
- 梅花鹿角柄骨膜蛋白质组学初步研究被引量：2
- 2011年
- 为了利用蛋白质组学技术探索鹿茸研究模型中的特异性蛋白,本试验探索了一套完整的梅花鹿角柄骨膜蛋白提取及纯化方法。角柄是雄鹿头上着生的永久性骨桩,鹿茸每年由该骨桩上脱落和再生。本试验采集了梅花鹿角柄骨膜,利用冷冻液氮研磨法提取蛋白样品。蛋白样品分别经过丙酮沉淀和TCA-丙酮沉淀处理。结果显示,TCA-丙酮沉淀处理后电泳图谱斑点清晰,分辨率较高,是双向电泳蛋白提取样品的较优处理方法。
- 徐代勋王桂武赵海平杨颖宁浩然李春义
- 关键词：梅花鹿双向电泳
- 梅花鹿鹿茸S100A4融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化
- 我们前期的研究表明,鹿茸发生和再生都是依赖干细胞的过程。鹿茸的干细胞存在于鹿未来鹿茸发生区的骨膜中,即生茸骨膜。AP细胞表达特有的分子S100A4,推测为鹿茸发生的关键调节分子。进一步从分子水平阐述S100A4在鹿茸发生...
- 刘东邢秀梅赵海平褚文辉鲁晓萍王大涛李春义
- 关键词：S100A4蛋白表达
- 文献传递
- 梅花鹿鹿茸S100A4融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化
- 2011年
- 我们的前期研究表明,鹿茸发生和再生都是依赖干细胞的过程。鹿茸的干细胞存在于鹿未来鹿茸发生区的骨膜中,即生茸骨膜。AP细胞表达特有的分子S100A4,推测为鹿茸发生的关键调节分子。进一步从分子水平阐述S100A4在鹿茸发生中的调节机制需要高质量S100A4的纯品。为了解决这一问题,我们针对已从梅花鹿AP细胞反转录出的S100A4基因序列,设计了含有EcoR I和BamH I酶切位点的上下游引物,并扩增出了目的片段。其后将S100A4基因片段和PGEX-6P-1载体酶切并进行了连接,转入Top10F’感受态细胞中,涂板筛选出了阳性克隆,进行了菌液PCR及双酶切鉴定,再将重组质粒转入了BL21(DE3)pLys S表达菌株进行了IPTG诱导表达。用聚丙烯酰胺凝胶电泳及western blot鉴定表明融合蛋白成功表达,随后对融合蛋白进行了纯化。本研究成功地实现了鹿本身特有的S100A4基因的体外表达。
- 刘东邢秀梅赵海平褚文辉鲁晓萍王大涛李春义
- 关键词：S100A4蛋白表达
