兰州军区医药卫生科研基金(LXH-2005013)
- 作品数：8 被引量：40H指数：4
- 相关作者：吴涛白海路继红王茜欧剑锋更多>>
- 相关机构：兰州军区兰州总医院第四军医大学甘肃省妇幼保健院更多>>
- 发文基金：兰州军区医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血间充质干细胞抑制异体T淋巴细胞反应的实验及临床意义被引量：4
- 2007年
- 目的:研究人脐血间充质干细胞(MSCs)对异体外周血T淋巴细胞抑制的影响.方法:分离、扩增脐血MSCs,流式细胞术检测表面标志以鉴定.取分离培养的脐血MSCs,与经分离的异体淋巴细胞共培养,在植物血凝素(PHA)刺激下,用MTT还原法测定细胞增殖,观察脐血MSCs对PHA刺激的T淋巴细胞转化抑制作用.采用ELISA检测培养上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平.结果:脐血MSCs在PHA刺激下可抑制T淋巴细胞增殖,且其培养上清也具有抑制异体淋巴细胞增殖转化能力.ELISA检测7d共培养上清中IFN-γ和IL-4两种细胞因子的含量,发现IFN-γ分泌水平下调、IL-4分泌水平部分上调.结论:脐血MSCs具有抑制异体淋巴细胞免疫反应,降低移植物抗宿主反应(GVHD)的作用.具有研究价值和应用潜能.
- 王茜杨琨白海吴涛路继红
- 关键词：间质干细胞外周血T淋巴细胞白细胞介素4
- 骨髓间充质干细胞体外分离培养及其生物学特性的初步研究被引量：9
- 2007年
- 目的建立成人骨髓间充质干细胞(MSCs)体外培养和扩增的方法,探讨其生物学特性,建立稳定的MSCs体外培养扩增体系。方法取正常成人骨髓5 ml,用Percoll分离液(密度1.073 g/ml)经密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以2×10~5个细胞/cm^2的密度接种于含10%新生牛血清的LG-DMEM培养液。经培养、扩增后,应用倒置相差显微镜观察其形态,MTT法测定生长曲线,流式细胞仪行细胞表面抗原及细胞周期的检测,并在透射电镜下观察其超微结构。结果培养扩增获取的成人骨髓MSCs形态均一,为梭形或纺锤形的成纤维细胞样外观,生长曲线示其增殖能力强。流式细胞仪检测显示有90%以上的细胞处于G0/G1期,表面标记物中CD44表达阳性,而造血细胞表面标志CD3、CD4、CD7、CD13、CD14、CD15、CD19、CD22、CD33、CD34、CD45和与移植排斥发生密切相关的HLA-DR表达阴性。超微结构显示细胞内有丰富的粗面内质网,细胞器发达。结论所建立的分离和培养方法可获取骨髓粘附细胞中一组独特的细胞群,具有MSCs的生物学特性,可作为组织工程中的种子细胞。
- 吴涛白海王存邦路继红欧剑锋王茜
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养流式细胞术
- 骨髓间充质干细胞对异体淋巴细胞增殖的负调控作用及其机制的探讨被引量：4
- 2006年
- 目的:研究成人骨髓间充质干细胞(m esenchym al stem cells,MSCs)的免疫调节作用及其作用机制。方法:从成人骨髓中分离、培养间充质干细胞,并通过其形态的均一性及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度。将分离培养的间充质干细胞培养上清置于96孔板中,与经分离的异体淋巴细胞共培养3 d,以单独培养的异体淋巴细胞为对照组,加入植物凝血素(PHA)刺激72 h,用MTT还原法测定细胞增殖,观察成人骨髓MSCs培养上清对异体淋巴细胞增殖转化的影响。结果:成人骨髓MSCs培养上清抑制异体淋巴细胞增殖转化,两者差异有显著性(P<0.05),其增殖转化抑制率为9.00%。在有PHA刺激淋巴细胞增殖的情况下,细胞增殖活性进一步下降,两者差异显著(P<0.01),其增殖转化抑制率达20.91%。结论:成人骨髓MSCs抑制异体淋巴细胞增殖转化,其作用机制部分为非细胞接触作用所致,推测可能是MSCs通过分泌某些可溶性细胞因子而发生作用。
- 吴涛石静云白海王茜王存邦路继红欧剑锋
- 关键词：骨髓间充质干细胞免疫调控淋巴细胞
- 成人骨髓间充质干细胞培养上清对人脐血间充质干细胞体外培养及扩增的支持作用被引量：5
- 2006年
- 目的:研究人骨髓间充质干细胞培养上清对人脐带血(HUCB)中所含有间充质干细胞(MSCs)的影响。方法:取脐带血,肝素抗凝,Percoll淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,低糖DMEM培养获得贴壁细胞层。与人骨髓间充质干细胞培养上清共孵育。流式细胞仪检测表面抗原。结果:脐带血的单个核细胞与人骨髓间充质干细胞培养上清共孵育经体外培养贴壁后出现形似纤维状细胞形态并表达与MSCs相关的抗原(CD13,CD44,CD71,CD166),但不表达造血细胞抗原(CD34,CD45),这与源于骨髓的MSCs一致。结论:人脐血间充质干细胞与骨髓间充质干细胞培养上清共孵育,对脐血间充质干细胞体外分离培养及扩增有支持作用。
- 王茜哈小琴白海吴涛路继红杨小亮司志刚薛志文
- 关键词：人脐带血间充质干细胞体外培养
- 骨髓间充质干细胞在神经系统疾病中的应用现状
- 2006年
- 骨髓间充质干细胞是一群存在于骨髓中的非造血干细胞,具有较强的自我更新能力和多向分化潜能,在体外不同的诱导条件下可分化为骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞、神经细胞、平滑肌细胞等多种细胞。骨髓间充质干细胞的应用是目前国际上神经系统疾病领域中重要的研究内容,具有广泛的临床应用前景。近年来,许多实验室从分子、生化、物理等水平对其向神经细胞分化调控进行了深入研究,取得了较大的进展。
- 吴涛王景昌白海
- 关键词：间充质干细胞骨髓细胞分化
- 成人骨髓间充质干细胞抑制异体淋巴细胞增殖的实验研究被引量：16
- 2006年
- 目的研究成人骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的免疫调节作用。方法从成人骨髓中分离和培养间充质干细胞,并通过形态的均一性及流式细胞术检测其表面标志以鉴定纯度。将分离培养的间充质干细胞接种于96孔板中,经丝裂霉素处理后,与异体淋巴细胞共同培养3d;并以单独培养的异体淋巴细胞作为对照组。各组经培养后加入植物血凝素(PHA)刺激72h,用MTT还原法测定细胞增殖率,观察成人骨髓BMMSCs对异体淋巴细胞增殖转化的影响。结果成人BMMSCs与PHA诱导的异体淋巴细胞共同培养组抑制了细胞增殖,其增殖转化抑制率为对照组的60.68%,配对t检验结果显示,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论成人BMMSCs可以抑制PHA诱导的异体淋巴细胞增殖转化,对同种异体免疫反应具有负调节作用。
- 吴涛白海王存邦路继红欧剑锋
- 关键词：骨髓间质干细胞细胞培养技术
- 骨髓基质干细胞及其在骨组织工程中的应用
- 2005年
- 骨髓基质干细胞(BMSCs)是一群存在于骨髓中的非造血干细胞,具有较强的自我更新能力和多向分化潜能,在体外不同的诱导条件下可分化为骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞、神经细胞、平滑肌细胞等多种细胞。BMSCs的应用是目前国际上骨组织工程领域的重要研究内容,具有广泛的临床应用前景。近年来,许多实验室从分子、生化、物理等水平对其成骨分化调控进行了深入研究,取得了较大的进展。
- 吴涛白海刘传芳
- 关键词：骨髓基质干细胞骨组织工程成骨分化生物学特性光学显微镜
- 成人骨髓间充质干细胞对K562细胞生长的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:研究成人骨髓间充质干细胞(MSCs)对K562细胞生长的影响。方法:从成人骨髓中分离、培养MSCs,并通过其形态的均一性及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度,观察其电镜下的超微结构。将分离培养的MSCs置于24孔板中,72 h待其贴壁后,以丝裂霉素处理,与K562细胞共培养,计数法测定细胞增殖,观察成人骨髓MSCs对K562细胞生长的影响。结果:和单独的K562细胞生长曲线相比,与骨髓MSCs共孵育的K562细胞生长缓慢,无明显的指数生长期。结论:成人骨髓MSCs抑制K562细胞的生长,提示其可能有潜在的抗肿瘤作用,但其作用机制如何有待于进一步探讨。
- 吴涛白海王存邦路继红欧剑锋王茜
- 关键词：骨髓间充质干细胞K562细胞
