江西省自然科学基金(GZN1923)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
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- 相关机构：南昌大学上海市公共卫生临床中心更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 褶纹冠蚌alpha2巨球蛋白基因的分子克隆与序列分析被引量：5
- 2010年
- alpha2巨球蛋白（α2M）是一类广谱的蛋白酶抑制因子,存在于许多无脊椎或脊椎动物的血浆中[1]。它不仅可以与机体内过量的蛋白酶相结合产生α2M-蛋白酶复合物,清除血液中流动的蛋白酶[2],还能与细菌内毒素脂多糖,
- 胡宝庆谢彦海代功园文春根
- 关键词：褶纹冠蚌基因克隆
- 褶纹冠蚌铜锌超氧化物歧化酶的可溶性表达及其活性分析被引量：6
- 2012年
- 超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,EC1.15.1.1,简称SOD）是机体细胞抵御氧化损伤最重要的酶类之一,广泛存在于需氧生物、耐氧生物及某些厌氧微生物中。目前已知的SOD主要分为三类,即Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD。其中,Cu/Zn-SOD主要存在于包括人类在内的所有真核生物的细胞浆内，是目前研究最多的一类；Mn—SOD主要存在于原核生物和真核生物的线粒体中：
- 徐欢欢范小勇马辉胡宝庆文春根
- 关键词：褶纹冠蚌铜锌超氧化物歧化酶可溶表达活性测定
- 褶纹冠蚌胞内Cu/Zn-SOD的cDNA克隆及蛋白质三维结构预测被引量：5
- 2011年
- 运用兼并引物结合RT-PCR方法从褶纹冠蚌血细胞中克隆出一种细胞内铜锌超氧化物歧化酶(cpSOD)的cDNA,用半定量PCR方法研究了cpSOD的mRNA在褶纹冠蚌不同组织的表达情况。结果表明:cpSOD cDNA全长为891 bp,包含1个468 bp的开放阅读框,编码含155个氨基酸的蛋白。预测蛋白质分子质量为15.8 ku,等电点为5.8。含4个与铜离子结合的保守的氨基酸残基(H46,H48,H63和H120)和4个与锌离子结合的保守的氨基酸残基(H63,H71,H80和D83)及1个保守的分子内二硫键(Cys57-Cys146)。氨基酸序列同源性比较显示cpSOD与海洋贝类太平洋牡蛎Crassostrea gigas及栉孔扇贝Chlamys farreri的胞内Cu/Zn-SOD相似性分别为70%和69%;半定量PCR分析显示在褶纹冠蚌血液、外套膜、鳃、闭壳肌和肝胰腺5种组织中均能检测到cpSOD的基因表达,且在鳃和肝胰腺中表达量较大。嗜水气单胞菌刺激后cpSOD基因在褶纹冠蚌血细胞中表达上调,12 h后达到最大值。由此推断cpSOD可能在机体的免疫防御中起着重要的作用。
- 胡宝庆谢彦海王新生龚贵如文春根
- 关键词：褶纹冠蚌超氧化物歧化酶克隆蛋白质结构
- 褶纹冠蚌α_2M基因的组织分布及原核表达
- 2012年
- α2-巨球蛋白(alpha-2 Macrogloblin,α2M)是存在于无脊椎动物和脊椎动物血浆中的一类广谱性蛋白酶抑制因子。本文利用RT-PCR方法分析了α2M基因mRNA在褶纹冠蚌不同组织的表达及在嗜水汽单胞菌刺激后褶纹冠蚌血细胞中的表达变化。结果表明,α2M仅在血细胞中有表达,而在外套膜、闭壳肌、肝胰腺和鳃组织中均无表达。注射嗜水气单胞菌6h、12h、24h后,褶纹冠蚌血细胞中α2M的mRNA表达水平显著升高,表明α2M是褶纹冠蚌基础免疫系统中的重要组成部分。选择褶纹冠蚌α2M基因包含有受体结合区片段的第1369～1589氨基酸设计含有酶切位点的表达引物,构建重组表达质粒,经过IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE分析表达产物。结果表明重组的α2M在大肠杆菌Escherichia coli Rosetta-gami(DE3)中获得了表达,产物为40.81KDa的融合蛋白。
- 胡晓娟胡宝庆文春根
- 关键词：褶纹冠蚌Α2-巨球蛋白原核表达
- 褶纹冠蚌过氧化物还原酶6基因的克隆及原核表达
- 2012年
- 过氧化物还原酶6具有谷胱甘肽过氧化物酶和磷脂酶A2的双重活性,在机体抗氧化保护及肺表面活性物质代谢中具有重要的作用。研究克隆和分析了褶纹冠蚌Prx6(CpPrx6)基因的cDNA序列特征。结果表明CpPrx6基因的cDNA全长1617 bp;其中5′端非翻译区为71 bp,3′端非翻译区为889 bp,开放阅读框为657bp,可以编码218个氨基酸。CpPrx6氨基酸序列与其他已知贝类Prx6的同源性为70%—72%。CpPrx6蛋白含有1-Cys型Prx共有的保守催化中心"PVCTTE"和脂肪酶基序"GKSWA",三级结构中包含6个α螺旋、12个β折叠,催化中心位于第5个α螺旋内。CpPrx6基因在褶纹冠蚌血细胞、外套膜、闭壳肌、肝胰腺、鳃等组织中均有表达,其中鳃的表达量最大。嗜水气单胞菌刺激后6h和12h时CpPrx6在肝胰腺中的表达量明显增加(6h,P<0.05;12h,P<0.01),在血细胞和鳃组织中12h的表达量增加,24h时恢复到正常水平。将CpPrx6基因亚克隆到pET-32a(+)质粒中构建了重组质粒,SDS-PAGE分析发现重组质粒在大肠杆菌DE3中获得了表达。
- 胡宝庆文春根裴鹏祖谢彦海
- 关键词：褶纹冠蚌原核表达
