北京市科技新星计划(2006B22)
- 作品数：4 被引量：120H指数：3
- 相关作者：罗晖常雁红肖宝清熊莲刘灵芝更多>>
- 相关机构：北京科技大学清华大学更多>>
- 发文基金：北京市科技新星计划国家科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- CPC酰化酶基因的人工合成与重组表达被引量：8
- 2008年
- 7-氨基头孢烷酸(7-ACA)是头孢菌素类抗生素的中间体,在医药工业中具有重要的应用价值。该文通过人工设计、合成并在重组大肠杆菌中表达头孢菌素C(CPC)酰化酶基因来实现7-ACA的一步酶法催化合成。以Pseudomonassp.SE83菌株的CPC酰化酶蛋白质序列为模板,对CPC酰化酶基因分两段进行了全局优化设计,包括密码子替换、鸟嘌呤和胞嘧啶含量调整以及酶切位点修改等。通过装配聚合酶链式反应方法最终获得了目标基因,并克隆至表达载体pET-28a,成功构建了诱导型重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET28-acy。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,在Luria-Bertani培养基中,新建重组大肠杆菌所表达的可溶CPC酰化酶占菌体总蛋白的75%以上;经优化培养基摇瓶发酵,重组菌的CPC酰化酶酶活高达2956U/L。采用上述方法获得的CPC酰化酶,在一步酶法合成7-ACA的工业化生产中具有广阔的应用前景。
- 安明于慧敏罗晖宋文斯沈忠耀
- 关键词：7-氨基头孢烷酸重组大肠杆菌基因合成
- 过氧化氢酶的研究与应用新进展被引量：104
- 2009年
- 过氧化氢酶是一种广泛存在于好氧微生物和动、植物体内、催化效率较高且具有重要工业应用价值的酶。在论述过氧化氢酶的类型划分、结构特点和功能的基础上,阐述了过氧化氢酶的分离纯化和极端环境下微生物产过氧化氢酶的研究进展,并对过氧化氢酶在食品、环保、造纸、纺织等行业中的应用进行了介绍。
- 刘灵芝钟广蓉熊莲常雁红肖宝清罗晖
- 关键词：过氧化氢酶极端微生物
- 一步酶法生产7-氨基头孢烷酸的研究进展被引量：8
- 2013年
- 7-氨基头孢烷酸是合成头孢类抗生素的重要中间体,一般由头孢菌素C通过化学法或生物酶法裂解脱去侧链分子制备得到。综述了头孢菌素C酰化酶的来源、特性及其基因的克隆和改造,表达与纯化,固定化及其催化工艺的研究,并展望了一步酶法生产7-氨基头孢烷酸的应用前景。
- 姚舜罗晖常雁红于慧敏李强沈忠耀
- 关键词：7-氨基头孢烷酸
- 产耐热过氧化氢酶菌株的筛选和培养被引量：2
- 2010年
- 过氧化氢酶能催化过氧化氢的分解,在食品、环保、纸浆和造纸业、以及纺织行业具有重要的工业应用价值。研究从堆肥中分离了一株产过氧化氢酶的嗜热菌。该菌最适生长温度为55℃,最适生长pH值为7.0,最适NaCl浓度为1.5%。通过16S rDNA编码基因序列分析,该菌和环状芽孢杆菌有较高的同源性,命名为Bacillus sp.SHT2。通过对培养基中的碳、氮源进行优化,酶活达到196.9 U/mL。酶学性质研究表明该菌产生的过氧化氢酶具有良好的热稳定性、pH稳定性和储存稳定性。
- 刘灵芝常雁红罗炜熊莲肖宝清罗晖
- 关键词：过氧化氢酶嗜热菌
