您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(31172095)

作品数:5 被引量:5H指数:1
相关作者:周勇志周金林龚海燕曹杰张厚双更多>>
相关机构:中国农业科学院上海兽医研究所新疆农业大学上海师范大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 6篇农业科学
  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 4篇镰形扇头蜱
  • 2篇克隆
  • 2篇基因
  • 2篇TAT
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白转导
  • 1篇电转化
  • 1篇印迹
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光标记
  • 1篇特性分析
  • 1篇转导
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫印迹
  • 1篇活性
  • 1篇活性分析
  • 1篇功能分析
  • 1篇RNA_IN...
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇SALIVA...

机构

  • 6篇中国农业科学...
  • 2篇新疆农业大学
  • 1篇华南农业大学
  • 1篇上海师范大学

作者

  • 5篇周金林
  • 5篇周勇志
  • 5篇龚海燕
  • 4篇张厚双
  • 4篇曹杰
  • 2篇张玉婷
  • 1篇李国清
  • 1篇秦顺晴
  • 1篇路鹏云
  • 1篇巴音查汗
  • 1篇王亚楠

传媒

  • 3篇中国畜牧兽医...
  • 2篇中国预防兽医...
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇寄生虫与医学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 6篇2015
  • 2篇2012
5 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
镰形扇头蜱P0基因的克隆、表达及初步鉴定
P0蛋白是真核生物一种核糖体蛋白,具备多功能,不仅有助于RNA结合域与28srRNA相互结合,还与延伸因子eEF2相互作用有关,在细胞核内P0可调控嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE)的DNA修复活动。如果P0蛋白缺失后,会...
张玉婷龚海燕周勇志巴音查汗周金林
关键词:镰形扇头蜱克隆免疫印迹
RNA interference and the vaccine effect of subolesin homolog from the tick Rhipicephalus haemaphysaloides
Subolesin is a well-characterized protective antigen in many ticks,and thus,is potentially useful in the devel...
Pengyun LuJie CaoYingfang YuYongzhi ZhouHoushuang ZhangHaiyan GongGuoqing LiJinlin Zhou
关键词:RHIPICEPHALUSRNAIVACCINE
Identification of Differentially Expressed Genes in the Salivary Gand of Rhipicephalus haemaphysaloides by the Suppression Subtractive Hybridization Approach被引量:1
2012年
For the purpose of screening and analyzing the differentially expressed genes from the salivary gland of Rhipicephalus haemaphysaloides, two salivary gland-subtracted cDNA libraries of partially fed female ticks and fed male ticks were constructed using suppression subtractive hybridization (SSH). A total of 247 female expression sequence tags (ESTs) and 168 male ESTs were obtained from the two SSH cDNA libraries. It is predicted that 25 female ESTs and 44 female ESTs contain the 5" and 3" ends, respectively, and that 53 male ESTs and 74 male ESTs contain the 5" and 3" ends, respectively. To identify the subtraction rate of the two SSH cDNA libraries, the RT-PCR method was used to test 24 female ESTs and 21 male ESTs selected randomly but not repeatedly. The results showed that there were 13 upregulated or differentially expressed genes in the partially fed salivary gland of the female R. haemaphysaloides and that the differentially expressed rate was 54%. In addition, they indicated that there were 9 upregulated or differently expressed genes in the fed salivary gland of the male R. haemaphysaloides and that the differentially expressed rate was 43%. Putative translations of 141 (57%) female ESTs and 125 (74%) male ESTs had similarity to GenBank sequences, and 32 (23%) female ESTs and 29 (23%) male ESTs exhibited similarity to tick proteins, which showed that most of the proteins in the libraries were mainly related to the feeding blood physiology of the ticks.
XIANG Fei-yu ZHOU Yong-zhi ZHOU Jin-lin
蜱组胺结合蛋白与渗透肽TAT在杆状病毒表达体系中的融合表达和功能分析被引量:1
2015年
为真核融合表达亚洲璃眼蜱(H.asiaticum)唾液腺中的组胺结合蛋白(HBP)与渗透肽TAT,并研究其生物学活性,本研究将编码HBP的基因片段与编码渗透肽TAT基因片段通过酶切位点Eco RⅠ酶切连接后克隆至真核表达载体p Fast Bac HTa中,构建重组杆粒r Bac-HBP-TAT,转染至sf9昆虫细胞中,制备重组病毒并进行融合蛋白的表达。经SDS-PAGE、western blot和间接免疫荧光试验检测结果表明,HBP-TAT在Bac-to-Bac杆状病毒系统中获得稳定表达,融合蛋白约为31 ku。此外,组胺结合试验证明HBP-TAT具有与组胺结合的能力。本研究为研制新型蜱源抗组胺药物提供了实验依据。
王亚楠曹杰周勇志张厚双龚海燕周金林
蜱IgG结合蛋白的昆虫细胞表达及结合IgG特性分析被引量:1
2012年
蜱吸食宿主大量血液,其中宿主血液中IgG分子能穿过蜱肠道,进入血淋巴,且能保持其活性。为逃避宿主免疫攻击,蜱唾液腺分泌一种免疫球蛋白结合蛋白(ImmunoglobulinGbindingprotein,IGBP),与蜱体内的宿主IgG结合,抑制宿主IgG对蜱的损害,是蜱唾液腺重要的功能分子,也是抗蜱疫苗候选分子。镰形扇头蜱是我国南方的优势蜱种,其唾液腺免疫球蛋白结合蛋白(RH.IGBP)被鉴定为抗蜱免疫保护性抗原,为进一步了解其生物学功能,本研究应用杆状病毒表达系统,构建出重组杆粒Bacmid.IGBP,并在昆虫细胞中表达出真核重组蛋白RH-IGBP,经免疫荧光实验鉴定和Westernblot分析,重组蛋白大小为23kDa,与预期一致。重组蛋白经纯化,利用ELISA方法,研究重组蛋白与不同哺乳动物宿主(兔、猪、牛羊、鼠、犬)和人的IgG结合能力,发现RH·IGBP与不同宿主IgG结合能力不同,与兔、猪的IgG有明显结合能力。对来自兔源IgG不同酶切片段F(ab’)2和Fc与RH.IGBP结合特性分析表明,蜱IgG结合蛋白主要识别部位是IgG的F(ab’)2片段。这些结果初步揭示了蜱IgG结合蛋白的作用机制和特点。
秦顺晴曹杰周勇志张厚双周金林
关键词:镰形扇头蜱
镰形扇头蜱Subolesin基因的长链dsRNA电转化和干扰效果研究
2015年
为建立针对不同发育阶段蜱的长链dsRNA电转化导入方法,本研究以我国优势流行的硬蜱镰形扇头蜱为对象,以蜱的保守基因Subolesin作为目标基因,将荧光标记的Subolesin-dsRNA对卵、幼蜱以及若蜱3个发育阶段进行电转化监测dsRNA的转化效果,对电转化后不同时间以及不同dsRNA电转化浓度进行优化,并接种小鼠观察电转化Subolesin-dsRNA对幼蜱及若蜱吸血的影响。结果显示,电转化Cy3荧光染料标记dsRNA后,卵、幼蜱及若蜱体内均有点状分布的荧光。若蜱于电转化后放置8h,Subolesin mRNA沉默效果较佳。此外,卵、幼蜱及若蜱分别在dsRNA浓度为10μg/m L、5μg/m L^25μg/mL及10μg/m L^25μg/m L沉默效果较好。Subolesin-dsRNA干扰后蜱的存活率和吸血能力均显著降低。本研究建立的针对各个发育阶段蜱的高效长链dsRNA电转化方法为研究基因功能和沉默特定的基因提供了新的ds RNA导入方法。
路鹏云龚海燕曹杰周勇志张厚双李国清周金林
关键词:电转化RNA干扰DSRNA荧光标记
渗透肽TAT与蜱组胺结合蛋白的融合表达和活性分析
蜱组胺结合蛋白(histamine binding protein,HBP)是由蜱的唾液腺分泌的具有特异性结合组胺的一类功能性蛋白的总称,在止痒和免疫抑制上具有重要作用。本实验室从亚洲璃眼蜱的唾液腺内鉴定出一个ORF大小...
王亚楠曹杰周勇志张厚双龚海燕周金林
镰形扇头蜱P0基因的克隆表达及初步鉴定被引量:2
2015年
P0分子是一种核糖体蛋白,具有抗蜱免疫作用。本文采用RACE技术从镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)中获得了P0全长基因。通过对P0全长基因序列进行分析发现,P0全长基因为1 118 bp,具有一个编码319个氨基酸的开放阅读框,没有信号肽序列。推测P0的蛋白大小约为35 ku。P0与其他蜱种具有很高的同源性,与微小扇头蜱(Rhipicephalus microplus)和长角血蜱(Haemaphysalis longicornis)的P0基因同源性分别为94%和87%。编码区克隆到表达载体p GEX-4T-1中,转化表达宿主菌BL21,可表达出分子量约为60 ku的重组融合蛋白。表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。表达产物经GST树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。抗P0重组蛋白鼠血清可以识别蜱体内的P0蛋白,大小在35 ku。研究结果将为镰形扇头蜱新型防治技术研究提供基础。
张玉婷龚海燕周勇志巴音查汗周金林
关键词:镰形扇头蜱克隆
共1页<1>
聚类工具0