国家自然科学基金(31070992) 作品数:5 被引量:7 H指数:2 相关作者: 廖英俊 金亚平 于海洋 李婷婷 崔琰 更多>> 相关机构: 中国医科大学 泸州医学院 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
铅暴露对不同发育阶段子代小鼠海马中谷氨酸转运体表达的影响 被引量:1 2015年 目的探讨铅暴露对不同发育阶段子代小鼠海马中谷氨酸转运体GLAST、GLT-1表达的影响。方法将24只清洁级妊娠昆明小鼠随机分为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组,每组6只。母鼠从妊娠第1天至断乳前(出生后21 d)、仔鼠从断乳至出生后40 d(postnatal day,PND40),采用自由饮水方式进行染毒。分别于PND10、PND20和PND40,测定脑组织中铅含量及海马组织中GLAST和GLT-1 m RNA和蛋白的表达水平。结果与对照组比较,2.0 g/L乙酸铅暴露组PND10仔鼠和1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组PND20仔鼠及各浓度乙酸铅暴露组PND40仔鼠脑组织中的铅含量均较高,仅1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组PND40仔鼠海马组织中GLAST m RNA的表达水平均较低,仅2.0 g/L乙酸铅暴露组PND40仔鼠海马组织中GLT-1 m RNA的表达水平较低,仅1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组PND20和PND40仔鼠海马组织中GLAST蛋白的表达水平均较低,仅2.0 g/L乙酸铅暴露组PND10仔鼠及1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组PND20和PND40仔鼠海马组织中GLT-1蛋白的表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。随着乙酸铅暴露浓度的升高和暴露时间的延长,不同发育阶段仔鼠的脑组织中的铅含量均呈上升趋势,海马组织中GLAST和GLT-1 m RNA和蛋白的表达水平均呈下降趋势。结论饮水铅暴露可通过抑制不同发育阶段仔鼠海马中GLAST和GLT-1的表达,干扰发育早期仔鼠海马中Glu的转运与代谢,进而可影响突触信号的转导过程,这可能是铅导致学习记忆损伤的机制之一。 李婷婷 于海洋 廖英俊 金亚平关键词:谷氨酸转运体 铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸受体亚单位表达的影响 被引量:2 2016年 目的探讨铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期各阶段海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)亚单位表达的影响。方法将24只清洁级妊娠昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天起开始饮用含铅水,仔鼠于出生后(PND)21天断乳,继续饮含铅水至实验结束。水迷宫测定PND 40仔鼠学习记忆能力;并分别于PND10、PND20和PND40,测定海马组织中NMDA各受体亚单位(NR1、NR2A、NR2B)蛋白和m RNA的表达水平。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平均较低,除PND 10的0.5 g/L乙酸铅暴露组外,差异有统计学意义(P<0.05);且随着乙酸铅暴露剂量的升高,仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平呈下降趋势。与对照组比较,PND 10时各剂量乙酸铅暴露组及PND 20时1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05);而PND 40时各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均无明显改变。且随着乙酸铅暴露剂量的升高,PND 10、PND 20时仔鼠海马组织中NR2A蛋白的表达水平均呈下降趋势。各剂量乙酸铅暴露不同发育阶段仔鼠海马组织中NR2B m RNA的表达水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论发育早期铅暴露可损伤仔鼠的学习记忆能力,并且抑制仔鼠海马组织中NMDA受体各亚单位的表达。 李婷婷 廖英俊 于海洋 崔琰 金亚平关键词:铅暴露 海马组织 铅暴露对不同发育阶段仔鼠海马中谷氨酰胺合成酶活力及蛋白表达的影响 2014年 目的探讨铅暴露对不同发育阶段仔鼠海马中谷氨酰胺合成酶(GS)活力及蛋白表达的影响。方法将24只孕鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天至仔鼠断乳(出生后21 d左右);仔鼠从断乳后至出生后(PND)40 d。分别在PND10、20和40 d,测定仔鼠脑组织中铅含量、海马组织中GS活力及其蛋白表达。结果随着铅暴露浓度的升高,仔鼠脑组织中的铅含量呈上升趋势,海马组织中GS活力及其蛋白表达呈下降趋势。结论饮水铅暴露可通过抑制不同发育阶段仔鼠海马中GS蛋白的表达,导致海马中GS活力下降。 李婷婷 廖英俊 于海洋 金亚平关键词:海马 谷氨酰胺合成酶 铅对星形胶质细胞调控神经元突触形成的影响 被引量:1 2014年 目的 探讨染铅星形胶质细胞条件培养液(ACM)对神经元突触形成影响,为揭示铅神经毒性的机制提供参考数据.方法 星形胶质细胞在含50、100、200、400和800 μmol/L醋酸铅的培养液中培养72 h后,AlamarBlue法测细胞活力并收集ACM.将原代培养的神经元分成纯培养组、非谷氨酸诱导的ACM处理组、谷氨酸诱导无染铅ACM处理组和谷氨酸诱导的50、100和200 μmol/L染铅ACM处理组,分别在培养的24、48和72 h后,收集神经元,用蛋白质印迹法(Western blot)法检测神经元内突触素蛋白含量,采用免疫荧光法测定培养72 h后神经元内SYP的表达.结果 各染铅组的细胞活力随染铅浓度的升高而明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot法检测分析结果显示,与纯培养组比较,各时段的非谷氨酸诱导的ACM处理组和谷氨酸诱导无染铅ACM处理组的神经元内突触素蛋白含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),与非谷氨酸诱导的ACM处理组比较,谷氨酸诱导的ACM处理组神经元内突触素蛋白表达显著减少,差异有统计学意义(P<0.05),与谷氨酸诱导无染铅ACM处理组比较,培养72 h的各铅暴露的ACM处理组的神经元内突触素蛋白含量随染铅剂量升高而明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),培养48 h的200 μmol/L染铅ACM处理组的神经元内突触素蛋白含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),培养24 h的各染铅的ACM处理组的神经元内突触素蛋白含量未见明显改变.突触素免疫荧光双标染色结果显示,培养72 h的各染铅的ACM处理组的神经元内突触素荧光颗粒数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 星形胶质细胞对神经元的突触形成具有促进作用,染铅可抑制星形胶质细胞对突触形成的促进作用. 崔琰 李婷婷 于海洋 廖英俊 金亚平关键词:铅 星形细胞 神经元 突触 突触蛋白类 铅对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响 被引量:3 2014年 目的探讨铅暴露对星形胶质细胞(AS)中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养,以胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色鉴定细胞纯度后,进行0(对照组)、50、100、200及400μmol/L乙酸铅染毒,染毒时间为72h。倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像;以AlamarBlue法检测细胞活力;以Westernblot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达;以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能。结果50和100μmol/L铅暴露组的细胞形态与对照组相比,未见明显改变;200μmol/L铅暴露72h后,少量细胞开始脱壁,细胞间隙增大;400μmol/L铅暴露组细胞变大,突起变短或消失,脱壁细胞数量明显增多。与对照组相比,各浓度铅暴露组的AS活力均降低(P〈0.05),100、200和400μmol/L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降(P〈0.05),但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变。100、200和400μmol/L铅暴露组的3FI—Glu放射性低于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达,并导致AS的Glu转运体功能下降。 林琳 廖英俊 赵凤红 王艳 唐漫 许亚婷 王达 金亚平关键词:星形胶质细胞 铅 谷氨酸