浙江省自然科学基金(Y2080915)
- 作品数：13 被引量：36H指数：3
- 相关作者：傅红兴李慧李校堃朱雁林周贤用更多>>
- 相关机构：温州医学院温州医学院附属第一医院温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 采用冰冻切片和冷场发射电镜构建APA微囊的膜厚度及膜表面测定的方法研究
- 2013年
- 目的:建立一种APA微囊的膜厚度以及表面结构的检测方法,并测定微囊在湿状态的膜厚度和干燥后的膜表面结构。方法:采用亚甲蓝染色、冰冻切片结合光学显微镜观察微囊的膜厚度,并将囊膜在37℃孵育30 d后再次观察厚度的变化;对微囊进行冷冻干燥和冷场发射观察囊膜表面和断面结构。结果:APA-Ca和APA-Ba微囊的囊膜厚度并不均匀,孵育1个月后囊膜厚度变化差异无统计学意义(P>0.05);冷场发射扫描电镜下显示,两种微囊表面均光滑、致密;冻干后APA-Ca囊膜厚度达450～690 nm,而APA-Ba的囊膜厚度约为350 nm。结论:建立了一种简单、可靠的微囊膜厚度和表面检测方法,为进一步研究APA微囊的质量奠定了基础。
- 傅红兴李慧朱雁林赵应征吴岚岚江玲
- 关键词：微囊冰冻切片
- 几种ACA复式微囊的制备及药物释放研究
- 2013年
- 目的 :通过考察不同处方和工艺制备的吲哚美辛-海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)复式微囊的体外释放,研究复囊中药物释放的特点。方法:以吲哚美辛为模型药物,采用不同的交联剂CaCl2、BaCl2的制备工艺,结合液化囊心、冻干工艺制备复式微囊,考察复囊中药物在体外的释放。结果:药物在ACA复式微囊中释放比在单囊中缓慢,ACA-Ba-Ba复囊中药物释放最慢(释放90%药物要18～21 h);液化囊心后药物释放略有加快,冻干工艺使药物释放减慢;复囊中药物在人工胃液中2 h释放低于20%,在人工肠液中1 h释放超过90%。结论:ACA复式微囊能较好地控制药物达到缓释效果,有望成为一种新型药物缓释剂型。
- 潘仁彪傅红兴李慧朱雁林刘丛铭
- 关键词：海藻酸钠壳聚糖吲哚美辛缓释
- 微胶珠化胰岛肌肉内移植治疗小鼠1型糖尿病
- 2013年
- 背景:前期实验证明海藻酸钡微胶珠具有免疫隔离作用,并且不会引起免疫排斥反应。目的:观察包裹胰岛海藻酸钡微胶珠对1型糖尿病小鼠的治疗作用。方法:分离纯化SD大鼠胰腺单个胰岛细胞团,并包裹于海藻酸钡微胶珠内。以腹腔注射链脲佐菌素诱导建立C57BL/6小鼠1型糖尿病模型,随机分组:实验组小鼠股二头肌内多点注射包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠,对照组小鼠股二头肌内多点注射胰岛,糖尿病对照组及正常对照组小鼠股二头肌内多点注射生理盐水。术后观察小鼠血糖及胰岛微胶珠在肌肉内存在状况。结果与结论:分离纯化后获得高纯度胰岛,每只供体可获得(905.4±34.5)个,并具有良好生物活性。实验组小鼠血糖降为正常的时间约为6.3d,移植胰岛存活时间大于30d,对照组小鼠血糖一直未降至正常,移植胰岛存活时间约为4d。实验组降糖速率明显快于对照组和糖尿病对照组(P<0.05)。表明包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠镶嵌在肌肉组织中可良好存活,治疗小鼠1型糖尿病。
- 李慧傅红兴朱雁林李校堃
- 关键词：异种胰岛1型糖尿病C57BL小鼠
- 糖尿病犬模型造模前后血液生化指标的比较及治疗分析被引量：1
- 2012年
- Beagle犬1型糖尿病模型的建立对于开展糖尿病大动物模型的治疗研究有重要意义,但药物诱导的犬糖尿病模型如果护理不当,依然存在死亡率高的特点。本研究采用链脲佐菌素和四氧嘧啶联合静脉注射对Beagle犬进行了糖尿病造模,并对造模前后的血液生化和血常规指标进行比较,进行了相应的药物治疗。但采用常规的护肝和胰腺炎治疗方法并未取得治疗效果,多脏器功能的损伤可能是导致犬造模后死亡的重要原因。
- 叶圣涛傅红兴朱靓靓徐逸
- 关键词：BEAGLE犬糖尿病模型血液生化
- 1例Beagle犬的糖尿病建模分析被引量：3
- 2011年
- 糖尿病模型的建立是糖尿病治疗研究的重要内容,本研究根据文献报道的方法,采用链脲佐菌素和四氧嘧啶联合给药进行Beagle犬糖尿病造模的建立。结果造模后Beagle犬血糖呈先下降后升高变化,血糖由于饮食变化而有较大波动,体重持续下降,最后造模26日后因长期不进食死亡。采用文献方法建模药物的剂量可能偏大,建议可分剂量多次注射,以降低药物对犬机体的损伤。
- 周贤用傅红兴刘云西李慧徐逸朱靓靓
- 关键词：BEAGLE犬糖尿病
- 家兔胰岛的分离纯化研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨家兔胰岛分离、纯化的方法及其计数和活性的测定。方法选用日本大耳自家兔。予V型胶原酶于38℃内水浴外消化。采用Ficoll 400不连续密度梯度离心法对胰岛进行纯化，并对获得的胰岛进行DTZ染色计数。同时计算胰岛当量（IEQ）数。予台盼蓝染色法分析胰岛活性。结果DTZ染色纯化前每只家兔胰腺收获胰岛细胞数为15046±2733。IEQ数为：4635±554；化后胰岛数量为：5300±609，IEQ数为：1213±218；胰岛细胞活率〉90％，胰岛纯度为〉60％。结论家兔胰腺消化分离后得到胰岛的数量和IEQ均较多，且动物来源广泛、实验成本较低，预示其在胰岛移植中可作为胰岛来源。
- 姜尚超傅红兴徐艳艳汪大望薛圣留周贤用
- 关键词：家兔胰岛纯化活性
- 裸鼠糖尿病模型的建立及皮下异种胰岛移植研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨链脲左菌素(STZ)建立BALB/c nu/nu裸鼠Ⅰ型糖尿病模型的方法,及将大鼠胰岛分离纯化后移植至糖尿病裸鼠皮下,对移植后裸鼠进行疗效评价。方法选用Balb/c裸鼠分为三组:糖尿病且胰岛移植组、糖尿病胰岛未移植组和正常组;用STZ对裸鼠进行糖尿病建模,大鼠胰岛分离、纯化后移植至糖尿病裸鼠背部皮下,进行血糖、体重和HE染色考察,以糖尿病未移植组和正常组作对照。结果STZ浓度175 mg/kg时,腹腔注射裸鼠糖尿病造模成功率高,纯化的大鼠胰岛活性较好,但移植后疗效平均维持时间约5 d,移植第5 d的OGTT结果显示胰岛皮下移植组和糖尿病组血糖均较正常组高,移植3 d时HE染色显示胰岛在皮下存活,但胰岛中心部位细胞有坏死。结论本研究建立了一种免疫排斥缺陷宿主异种胰岛皮下移植治疗糖尿病的方法,为进一步探索改进胰岛移植研究提供参考。
- 傅红兴李慧江玲朱雁林赵应征
- 关键词：BALB胰岛异种移植皮下
- 小鼠自体胰岛肌肉移植及疗效评价
- 2013年
- 目的探讨小鼠自体胰腺部分切除及自体胰岛的肌肉移植方法,并对术后小鼠进行疗效评价。方法选用C57BL/6小鼠,分为三组,胰腺部分切除后移植组为麻醉后切除十二指肠部沿胃大弯至脾部位的胰腺组织,并将胰岛纯化后移植至自体肌肉组织;以切除部分胰腺后未移植组和正常组作对照。结果小鼠自体胰腺部分切除和自体胰岛肌肉移植术后存活率较高,但在饲养过程中均出现持续体重下降和血糖不稳定,OGTT显示两组术后小鼠20、40 min的血糖均较正常组高,肌肉移植7 d后HE染色显示胰岛在肌肉中存活,但胰岛中心部位细胞有坏死。结论本研究建立了一种无免疫排斥下研究小鼠胰岛移植的方法,可为进一步探索改进胰岛移植研究提供参考。
- 李慧傅红兴江玲徐燕妮潘仁彪李校堃
- 关键词：C57BL胰岛自体移植肌肉
- 载红细胞海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠微囊的制备及质量评价被引量：8
- 2010年
- 目的:制备载红细胞海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠微囊(APA微囊)并进行质量评价。方法:采用高压静电成囊技术制备海藻酸钙微胶珠,与聚左赖氨酸反应后再包覆海藻酸钠形成三层膜结构,柠檬酸钠液化囊心后得APA微囊;光学显微镜下检测微囊的粒径,振摇法考察微囊的机械强度,不同酸碱度溶液测定微囊的化学强度,同时紫外分光光度法检测透过微囊膜血红蛋白的吸光度来评价囊膜的通透性,小鼠腹腔移植观察微囊生物相容性。结果:在成囊电压4kV,推进速度50mL·h-1,针头直径0.7mm的条件下制得的微囊表面圆整光滑,95%以上微囊的粒径集中分布于1.5～2.1mm;72h内机械振摇破损率约为5%,在pH4.2～9.4的磷酸缓冲液中稳定;小鼠腹腔内移植于2周后回收的微囊外形圆整、光滑,无破损及明显结缔组织包绕。结论:本方法制备得到的APA微囊具有良好的机械、化学强度及生物相容性,可以作为微囊化细胞移植的载体。
- 徐艳艳傅红兴赵应征王浙明周贤用蔡娟娟李校堃
- 关键词：APA微囊红细胞药物载体粒径生物相容性
- 几种小鼠胰岛的分离纯化方法比较被引量：7
- 2012年
- 目的探讨几种小鼠胰岛的分离纯化方法及进行纯化后胰岛的计数和完整性的分析。方法选用ICR小鼠,采用不同胶原酶消化方法和不同的胶原酶种类,并用Ficoll-PaqueTMPLUS密度梯度离心法对胰岛进行纯化,并对获得的胰岛进行DTZ染色计数和计算当量,扫描电镜考察胰岛的完整性。结果采用胶原酶V和P胰管灌注、内外消化结合,消化需时较短,胶原酶V和P在胰岛纯化前后每只小鼠收获的胰岛细胞数量和当量无差别(P>0.05);扫描电镜结果显示消化较好的胰岛表面被膜完整,消化过度的胰岛导致被膜不完整,易致外层细胞损伤。结论小鼠逆行胰管灌注胶原酶、内外消化相结合的胰岛消化方法所需时间较短,但同时要注意防止消化过度。
- 刘云西傅红兴缪海霞李慧吕超林倩刘丛铭
- 关键词：ICR小鼠胰岛胶原酶完整性
