广西医学科学实验中心开放基金(KFJJ2011-13)
- 作品数：4 被引量：39H指数：2
- 相关作者：蒋晓山黄岚珍杨飞城阳晶卢菲婷更多>>
- 相关机构：桂林医学院桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：广西医学科学实验中心开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 莪术醇诱导人肝癌HepG2细胞衰老及其机制研究被引量：9
- 2018年
- 为进一步探讨莪术醇的诱导细胞衰老的机制,该研究采用荧光定量PCR技术对莪术醇处理后细胞中81个细胞衰老相关基因差异表达谱进行分析,结果发现TP53及其下游基因p16Ink4a、p21Waf1/Cip1和p27Kip1等的表达水平显著升高,伴随ABL1、ALDH1A3、CHEK2、HRAS、PTEN等多个衰老信号通路启动与效应关联基因的转录显著增强,而CyclinA2、IGFBP3、SIRT1以及TERT等细胞周期进程与衰老信号通路的负性调控基因的表达水平则显著降低。Western印迹检测结果显示,p53及其下游周期素依赖性蛋白激酶抑制物(CKI)分子p21WAF1和p16INK4水平升高,CyclinA2水平降低,与PCR结果一致,并伴野生型p53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)水平显著增高,提示莪术醇可能通过激活p53信号通路诱导HepG2细胞衰老。该研究进一步发现莪术醇能够诱导HepG2细胞发生衰老表型改变,伴G0/G1期周期阻滞。
- 黄岚珍杨飞城杨飞城阳晶
- 关键词：莪术醇HEPG2细胞肝癌细胞周期阻滞
- 莪术醇抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制被引量：29
- 2013年
- 目的:探讨莪术醇在体外对人肝癌HepG2细胞的增殖和细胞周期的影响及其分子机制。方法:体外培养HepG2细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察莪术醇对HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞术分析莪术醇处理后HepG2细胞的周期分布,TaqMan探针实时荧光定量PCR法及Western印迹检测细胞周期调控相关基因的表达水平。结果:莪术醇对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用,且在一定范围内(2.5～10 mg.L-1)呈浓度和时间依赖性;莪术醇诱导HepG2细胞发生G1期阻滞,伴随cyclin D1,CDK2,CDK8,pRB1,p27KIP1 mRNA表达水平增高,而cyclin A1的水平则下调,cyclin E1和CDK4的表达不受影响,p53及其下游调控蛋白p21WAF1和Wip1表达水平增高。结论:莪术醇诱导人肝癌HepG2细胞G1期阻滞、抑制细胞增殖,其作用可能通过激活p53与pRB通路,抑制cyclin A1基因的表达和上调p21 WAF1,p27KIP1以及CDK8基因的表达而实现的。
- 黄岚珍王娟卢菲婷杨飞城陈旭洪雪蒋晓山
- 关键词：莪术醇肝癌肿瘤增殖细胞周期阻滞
- 顺铂诱导人鼻咽癌CNE2细胞衰老及其相关基因表达谱的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨顺铂体外诱导人鼻咽癌CNE2细胞衰老的效应及其分子机制。方法采用MTT比色法观察顺铂对CNE2细胞增殖的抑制作用,衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性评判细胞衰老,流式细胞术分析细胞周期分布,实时定量PCR法检测78个人类细胞衰老相关基因的表达。结果顺铂对CNE2细胞的增殖具有明显抑制作用;1.0 mg/L顺铂处理后第6和第8天检测SA-β-gal染色阳性细胞数分别达到67.63%和89.22%,细胞阻滞于G2期;TP53、TP63、p16Ink4a,p27Kip1、PTEN、RB1、Cdc25C、TBX3、Gadd45a、IGF1R、PIK3CA、BMI-1、B2M、MORC3、MYC和SPARC等16个衰老相关基因的m RNA水平显著升高(P<0.05或0.01),Cyclin A2、Cyclin B1、Cyclin E1、CDK6、ATM、ETS2、MDM2、E2F1、ETS1、FN1、IGFBP3、RBL2、SERPINB2及SIRT1等14个基因表达水平下降(P<0.05或0.01)。结论顺铂能够在体外诱导CNE2细胞衰老,其机制涉及p16和p27介导的p53-p RB和PTEN衰老信号调控网络。
- 杨飞城黄岚珍阳晶黄希仕蒋晓山
- 关键词：顺铂鼻咽癌细胞周期阻滞
- 一种应用流式细胞术快速分选活的衰老细胞的方法被引量：2
- 2015年
- 衰老细胞是细胞老化研究的重要模型,目前还缺乏从混合细胞群中分选活的衰老细胞的有效方法。该研究以1.0μg/m L顺铂诱导的人鼻咽癌CNE 2细胞衰老为研究模型,根据细胞大小和自发荧光(脂褐素积累)两项物理特征,采用FACS Aria III流式细胞仪在Purity模式下设门分选活的衰老细胞(SEN)和增殖细胞(PROL),收集细胞,再分别进行回测分析和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色验证。结果从SEN门控获得分选纯度为74.7%的活的衰老细胞,分选出的细胞可重新贴壁;其中,72.1%的细胞呈SA-β-gal染色阳性,与PROL门控分选获得的细胞(8.01%)相比较有显著差异(P<0.01)。该研究提供了一种基于流式细胞仪快速分选活的衰老细胞的方法。
- 阳晶黄岚珍黄希仕杨飞城沈珂蒋晓山
- 关键词：衰老细胞流式细胞术细胞分选CNE
