国家科技重大专项(2013ZX09304101)
- 作品数：14 被引量：29H指数：3
- 相关作者：叶强徐颖华辛晓芳姚昕卞莲莲更多>>
- 相关机构：中国食品药品检定研究院江苏省疾病预防控制中心长春工业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 钩端螺旋体疫苗菌种分子遗传质量控制方法的建立被引量：2
- 2018年
- 目的建立钩端螺旋体(简称钩体)疫苗菌种分子遗传质量的控制方法。方法采用PCR扩增7株钩体的7种管家基因序列,进行多序列位点分析(multilocus sequence typing,MLST),并系统评价不同传代次数菌种的分子遗传稳定性。同时组织协作标定,验证MLST方法用于疫苗菌种分子遗传质控的适用性。结果 7种钩体疫苗株呈现7种不同序列基因型。疫苗菌种在动物增毒前、后及在体外连续传代20代,细菌MSLT序列基因型未发生改变,证明钩体疫苗菌种具有良好的分子遗传稳定性。协作标定研究结果也表明,该方法具有良好的重复性,且结果易于标准化。结论建立了评价钩体疫苗菌种的分子遗传质控方法,疫苗菌株MLST序列基因型可作为一项候选的质量控制标准,完善了当前疫苗质控监管体系。
- 徐颖华李喆张影杜宗利辛晓芳叶强
- 关键词：钩端螺旋体分子遗传稳定性
- 肺炎链球菌分子分型方法研究进展被引量：6
- 2013年
- 肺炎多糖疫苗和结合疫苗的问世，可有效保护一定人群免遭肺炎链球菌的感染侵袭，但目前在世界上很多国家，肺炎链球菌感染仍是一个非常严重的公共卫生问题。按照世界卫生组织（WHO）统计资料估计，全世界每年有160万人死于肺炎链球菌感染，其中包括70～100万5岁以下儿童，尤其是2岁以下儿童的死亡率最高，这些死亡儿童绝大多数生活在不发达国家和发展中国家。即使在欧美等发达国家，肺炎链球菌也是最常见的成年人社区获得性细菌性肺炎的病原体。
- 杨越叶强
- 关键词：肺炎链球菌感染分子分型方法公共卫生问题细菌性肺炎社区获得性
- 2012年江苏省柯萨奇病毒A组14型分离株全基因序列分析被引量：2
- 2015年
- 目的探讨2012年江苏省手足口病(HFMD)病原体CVA14病毒的全基因序列特点。方法采集江苏省邳州市2012年HFMD患儿的咽拭子或肛拭子样本,分离培养得到2株CVA14病毒,利用RT-PCR扩增CVA14全长基因。利用DNAStar软件包的Meg Align进行核苷酸序列分析,构建系统进化树。结果扩增得到覆盖CVA14全基因组的3个片段,拼接后为CVA14全基因组,分别命名为PZ05Y/JS/2012和PZ15G/JS/2012。同源性分析结果显示,这2株分离株之间同源性为99.4%,原型株(G-14)的核苷酸同源性为84.4%。进化树结果显示,所有的CVA14形成A、B和C共3个分支。结论获得了江苏省CVA14的全基因序列,分析了该毒株的进化特点,补充了中国CVA14病毒的基因信息。
- 姚昕卞莲莲毛群颖叶强朱凤才梁争论
- 关键词：基因型
- 我国钩端螺旋体疫苗的发展现状与挑战被引量：1
- 2015年
- 目的:总结分析我国钩端螺旋体的发展现状以及面临的问题与挑战。方法:根据国内外文献材料进行整理、归纳和分析。结果与结论:应解决钩体疫苗发展中面临的一些困境,进一步优化我国钩体疫苗,从而保证国家扩大计划免疫规划成功实施。
- 徐颖华辛晓芳
- 关键词：钩端螺旋体病
- 中国钩端螺旋体疫苗生产用菌种罗株分子遗传特性分析被引量：2
- 2015年
- 目的：分析研究中国钩端螺旋体疫苗生产用菌种罗株的分子遗传特性,为钩体疫苗生产用菌种分子遗传质量控制方法的研究奠定基础。方法：通过对罗株16S rRNA基因片段进行PCR扩增、测序,并运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分析（MLST）等方法,对其进行分子分型。结果：16S rRNA基因序列比对结果显示钩体疫苗生产用菌种罗株基因种为致病性问号型;PFGE分析结果表明该疫苗株全基因组在酶切后共有100～1 000 kb大小不等的片段11个,与我国其他不同血清群代表株酶切片段的数量、大小和分布特征方面明显不同;多位点序列分析得出该罗株序列型为140。结论：本文对钩体疫苗生产用菌种罗株的分子遗传信息分析结果,可为后续的钩体疫苗生产用菌种分子遗传质量控制方法的研究提供参考。
- 张金龙徐颖华王国柱张瑾张影杨英超薄淑英李晓玲辛晓芳
- 关键词：菌种分析脉冲场凝胶电泳
- B群脑膜炎球菌疫苗的研究现状及挑战
- 2017年
- 疫苗的免疫接种是预防传染病的最有效方法之一。近年以来随着生物技术迅猛发展,B群脑膜炎球菌疫苗的研究也取得了突破性发展,应用反向疫苗学技术开发的新型B群脑膜炎球菌疫苗已陆续被欧洲医药管理局和美国食品和药品管理局批准上市。尽管目前国内尚未批准相关产品上市,但一些企业和研究院所已在加紧研发。为了进一步了解B群脑膜炎球菌疫苗,推动国内B群脑膜炎球菌疫苗的研发,综述不同类型B群脑膜炎球菌疫苗的研究现状及其面临的挑战。
- 王珊珊叶强
- 关键词：脑脊髓膜炎重组疫苗
- 应用whaF基因序列鉴定20型肺炎链球菌血清型被引量：3
- 2016年
- 目的应用wha F基因测序方法,对20型肺炎链球菌进行血清型鉴定。方法采用血清凝集法和用20型肺炎链球菌型特异性基因(wci L基因)合成的引物进行PCR扩增,对中国医学细菌保藏管理中心所保藏的20型肺炎链球菌进行血清学鉴定;根据Gen Bank上发表的wha F基因设计合成引物,PCR扩增wha F基因,利用测序获得基因序列,分析wha F基因多态性。结果 7株20型肺炎链球菌菌株均能与20型血清产生血清凝集反应,wci L基因PCR扩增产物,可见与预期相符大小500 bp的特异性条带。wha F基因PCR扩增产物,除20-3外,其余6株菌均可见1 000bp大小与预期相符的PCR扩增产物。wha F基因测序和分析显示:20-2、20-4、20-5、20-7与20B亚型(Gen Bank accession No.:CR931679和JQ653093)的wha F基因序列相同;20-6与20A亚型(Gen Bank accession No.:JQ653094)的wha F基因序列相同;20-1与CR931679和JQ653093相比,在898有点突变(A→C)。20-3的wha F基因比20A亚型和20B亚型的wha F基因均少了约600 bp。结论 20-6为20A亚型肺炎链球菌,20-2、20-4、20-5、20-7均为20B亚型肺炎链球菌。
- 陈琼李康徐潇黄洋李红王春娥陈翠萍叶强
- 关键词：血清型F基因基因多态性点突变
- 应用PCR技术和wciP基因测序方法鉴定6群肺炎链球菌血清型被引量：1
- 2014年
- 目的：利用分子生物学方法，包括PCR技术和wciP基因测序鉴别6群肺炎链球菌血清型。方法根据GenBank上发表的wchA基因和wciO基因设计合成6群特异性引物，wciNα基因设计合成6A/B型特异性引物，wciNβ基因设计合成6C/D型特异性引物，做PCR扩增，凝胶电泳确认PCR产物；根据wciP基因设计6群特异性引物，PCR扩增后产物测序确定第584位核苷酸。结果原6A型9株菌株（编号为6A-1至6A-9）和原6B型7株菌株（编号为6B-1至6B-7）用6群特异性引物进行的扩增均有分子量在2.0 kb左右的PCR产物，而1型没有PCR产物；除6A-2、6A-3、6B-3和6B-7外，其余菌株用6A/B型特异性引物进行的扩增有600 bp左右的PCR产物；6A-2、6A-3、6B-3和6B-7用6C/D型特异性引物进行的扩增有750 bp左右的PCR产物；测序结果确认原6A型9株菌株wciP基因第584位为G，原6B型7株菌株wciP基因第584位为A。结论6A-1、6A-4、6A-5、6A-6、6A-7、6A-8、6A-9属于6A型，6A-2、6A-3属于6C型，6B-1、6B-2、6B-4、6B-5、6B-6属于6B型，6B-3和6B-7属于6D型。
- 陈琼陈驰石继春王春娥叶强
- 关键词：肺炎链球菌
- 钩端螺旋体分子进化及分型的研究进展被引量：1
- 2017年
- 钩端螺旋体病（简称钩体病）是由致病性钩端螺旋体（简称钩体）引起的一种急性人兽共患传染病,给当地人民健康和畜牧业生产造成了严重的影响.因此,钩体病越来越引起人们的重视.随着生物技术的发展,研究人员已在钩体的致病性、分子流行趋势及遗传进化机制等方面取得重大突破,本文就近些年国内外致病性钩体分子进化和分型的研究进展作一综述,以期为未来钩体的分子流行病学监测和新疫苗研制等工作提供参考.
- 徐颖华辛晓芳叶强
- 关键词：钩端螺旋体病致病性钩端螺旋体分子分型进化
- 不同处理方法对肺炎链球菌基因组提取的影响被引量：1
- 2017年
- 为了获得简便、高效的提取肺炎链球菌基因组DNA方法,分别采用不同处理方法(溶菌酶法和脱氧胆酸钠(DOC)法)、不同处理时间对8株不同血清型的肺炎链球菌进行破壁,同时菌株采用不同培养时间进行基因组的提取,提取基因组后利用紫外分光光度计测定样品中DNA的浓度和纯度以及琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA的质量。结果表明,菌株培养12~16 h、质量分数1%DOC处理2 h能提取出高质量的肺炎链球菌基因组DNA。该方法提取的肺炎链球菌基因组DNA具有质量高、完整性好的优点,为肺炎链球菌全基因组序列的测定提供了前提条件。
- 黄洋李康杨越陈驰梁丽叶强陈翠萍
- 关键词：肺炎链球菌
