您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(30970681)

作品数：14 被引量：37H指数：4
相关作者：龚守良王志成方芳刘扬齐亚莉更多>>
相关机构：吉林大学北华大学长春市人民医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 14篇中文期刊文章

领域

  • 13篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 10篇电离辐射
  • 9篇细胞
  • 5篇凋亡
  • 4篇乳腺
  • 4篇乳腺癌
  • 4篇肿瘤
  • 4篇腺癌
  • 4篇基因
  • 3篇电离辐射诱导
  • 3篇凋亡诱导
  • 3篇乳腺肿
  • 3篇乳腺肿瘤
  • 3篇自噬
  • 3篇腺肿瘤
  • 3篇小鼠睾丸
  • 2篇低剂量电离辐...
  • 2篇凋亡诱导因子
  • 2篇增殖
  • 2篇乳腺癌MCF...
  • 2篇睾丸细胞

机构

  • 12篇吉林大学
  • 5篇北华大学
  • 3篇长春市人民医...
  • 2篇吉林大学中日...
  • 2篇吉林大学第一...
  • 2篇首都医科大学
  • 1篇吉林大学第二...
  • 1篇齐齐哈尔医学...
  • 1篇中国医科大学...
  • 1篇吉林大学白求...
  • 1篇吉林市肿瘤医...
  • 1篇长春航天医院

作者

  • 11篇龚守良
  • 7篇王志成
  • 5篇方芳
  • 5篇齐亚莉
  • 5篇刘扬
  • 3篇刘彦军
  • 2篇李艳博
  • 2篇郭彩霞
  • 2篇龚平生
  • 2篇王剑锋
  • 2篇李岩
  • 1篇胡志宏
  • 1篇刘念
  • 1篇宋祥福
  • 1篇张艳秋
  • 1篇董丽华
  • 1篇赵红光
  • 1篇杨筱茜
  • 1篇吕喆
  • 1篇吴嘉慧

传媒

  • 8篇吉林大学学报...
  • 2篇中华放射医学...
  • 1篇中国实验诊断...
  • 1篇中华男科学杂...
  • 1篇Biomed...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 3篇2014
  • 2篇2013
  • 3篇2012
  • 1篇2011
  • 2篇2010
共 14 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
Egr1介导的人截短型凋亡诱导因子表达载体的构建及其在乳腺癌MCF-7细胞中的辐射诱导表达规律被引量：3
2012年
目的:克隆人截短型凋亡诱导因子(AIF)cDNA序列,并构建早期生长反应因子1(Egr1)介导的重组表达载体pcDNA3.1-Egr1-AIFΔ1-480(pEgr1-AIFΔ1-480),观察其在人乳腺癌MCF-7细胞中的辐射诱导表达规律。方法:以人白血病Jurkat细胞mRNA为模板,RT-PCR法扩增获得人AIFΔ1-480,与pMD18T载体连接后行全自动测序,限制性内切酶切取pMD19T-Egr1中Egr1片段,并利用基因重组技术构建Egr1启动子介导的人AIFΔ1-480表达质粒pEgr1-AIFΔ1-480。实验分为对照组、pcDNA3.1组、pAIFΔ1-480组和pEgr1-AIFΔ1-480组。各组质粒分别转染MCF-7细胞,Western blotting法检测AIF及AIFΔ1-480蛋白的辐射诱导表达时程-效应(2.0Gy照射后0、2、4、12、24和48h)和剂量-效应(0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0Gy照射后24h)规律。结果:经测序证实,RT-PCR获得的人AIFΔ1-480基因与预期一致,pEgr1-AIFΔ1-480经PCR和酶切鉴定完全正确;各组MCF-7细胞经2.0Gy照射后0～48h,AIF蛋白在各组中均有表达,从4h开始显著增加,4、12、24和48h各组AIF表达与0h组比较差异有统计学意义(P<0.05),48h达到最大;而在pAIFΔ1-480和pEgr1-AIFΔ1-480组,AIFΔ1-480从2h开始表达,4、12、28和48h各组AIFΔ1-480表达与2h比较差异有统计学意义(P<0.05),24h达到峰值;而且24和48h时pEgr1-AIFΔ1-480组AIFΔ1-480表达较pAIFΔ1-480组显著增加(P<0.05)。各组MCF-7细胞经0～5.0Gy照射后24h,各组均有AIF蛋白表达,而AIFΔ1-480只在pAIFΔ1-480和pEgr1-AIFΔ1-480组表达,二者均随着剂量增加而增加,0.2、0.5、1.0、2.0和5.0Gy照射后各组AIF表达与0Gy比较差异有统计学意义(P<0.05),在5.0Gy照射时达到最大,相同照射剂量pEgr1-AIFΔ1-480组AIFΔ1-480表达高于pAIFΔ1-480组。结论:成功构建Egr1介导的人截短型AIF重组表达载体pEgr1-AIFΔ1-480,AIF和AIFΔ1-480蛋白在MCF-7细胞中的表达随照射时间延长和照射剂量增加而增加。
王剑锋方芳刘扬吴嘉慧龚守良王志成
关键词：乳腺肿瘤基因重组
低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸细胞中Caspase-9表达的变化被引量：2
2014年
过去20年，低剂量电离辐射对机体的影响是放射生物学界研究的重要内容，尤其是辐射致癌的有阈和无阈假说之间的争论，使得电离辐射对人类健康的影响需要更加全面和细致的考虑。睾丸是辐射敏感的器官，低剂量辐射可诱导睾丸细胞凋亡协，且具有复杂的网状调控通路。
杨艳明方芳刘念龚守良王志成
关键词：低剂量电离辐射小鼠睾丸细胞电离辐射诱导放射生物学辐射致癌
Mitochondrial Modulation of Apoptosis Induced by Low-dose Radiation in Mouse Testicular Cells被引量：9
2013年
Objective To investigate whether apoptosis induced by low-dose radiation （LDR） is regulated by mitochondrial pathways in testicular cells. Methods Male mice were exposed to whole-body LDR, and changes in mitochondrial function and in expression of apoptotic factors were analyzed in the testicular cells as follows. Total nitric-oxide synthase （T-NOS） and Na＋/K＋ ATPase activities were biochemically assayed. Reactive oxygen species （ROS） and mitochondrial membrane potential （Adjm） were determined by flow cytometry using fluorescent probes. Levels of mRNAs encoding cytochrome c （Cyt c） and apoptosis-inducing factor （AIF） were quantified by real-time reverse-transcription PCR （RT-PCR）. Expression of Cyt c, AIF, caspase-9, and caspase-3 at the protein level was assessed by western blotting and immunohistochemistry. Results LDR induced an increase in T-NOS activity and ROS levels, and a decrease in Na＋/K~ ATPase activity and mitochondrial A^m, in the testicular cells. The intensity of these effects increased with time after irradiation and with dose. The cells showed remarkable swelling and vacuolization of mitochondria, and displayed a time- and dose-dependent increase in the expression of Cyt c, AIF, procaspase-9, and procaspase-3. Activation of the two procaspases was confirmed by detection of the cleaved caspases. The changes in expression of the four apoptotic factors were mostly limited to spermatogonia and spermatocytes. Conclusion LDR can induce testicular cell apoptosis through mitochondrial signaling pathways
FANG FangGONG Ping ShengZHAO Hong GuangBI Yu JingZHAO GangGONG Shou LiangWANG Zhi Cheng
关键词：MITOCHONDRIATESTISAPOPTOSIS
有关基因表达及其相关问题
2010年
梁硕李艳博郭彩霞姜波龚守良
关键词：基因表达真核细胞电离辐射癌症
TRAIL和endostatin双基因-放射治疗对人血管内皮细胞增殖、周期和凋亡的影响被引量：3
2012年
目的:观察重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES携带的双基因TRAIL和endostatin联合X射线照射后,对血管内皮细胞ECV304增殖、周期和凋亡的影响。方法:实验分为对照组、空载体pshuttle转染组、TRAIL单基因重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL转染组、endostatin单基因重组质粒pshuttle-Egr1-shES转染组和TRAIL、endostatin双基因重组质粒pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES转染组。细胞转染采用脂质体介导的方法进行,对照组不转染。细胞转染后给予X射线照射(照射剂量分别为0、0.1、0.5、1.0、2.0和5.0Gy),采用ELISA法检测转染细胞中TRAIL和endostatin蛋白的表达,并分别采用MTT及PI单染或/和AnnexinⅤ双染流式细胞术(FCM)检测TRAIL、endostatin单/双基因治疗联合放射治疗对ECV304细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。结果:2.0Gy X射线照射后与0h比较,各时间点转染pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES的ECV304细胞上清中TRAIL和endostatin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),分别于12和24h达峰值;不同剂量X射线照射可诱导TRAIL和endostatin蛋白表达,且蛋白表达水平随照射剂量的增加而明显升高(P<0.05或P<0.01)。MTT结果显示,X射线照射后,pshuttle-Egr1-shTRAIL、pshuttle-Egr1-shES和pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES组ECV304细胞A490值均明显低于对照组和pshuttle组,并显示一定的时间-效应和剂量-效应关系,并伴有细胞凋亡率明显增加、G2+M期细胞百分数明显上升和G0/G1期细胞百分数明显下降。上述细胞效应,尤以pshuttle-Egr1-shTRAIL-shES组变化最为明显,与pshuttle-Egr1-shTRAIL和pshuttle-Egr1-shES组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:TRAIL和endostatin双基因联合放射治疗可抑制ECV304细胞生长,影响细胞周期进程,促进细胞凋亡,且其治疗效果优于单纯放射治疗或TRAIL/endostatin单基因-放射治疗。
李艳博王志成张艳秋董丽华刘扬李金华龚守良龚平生郭彩霞
关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体内皮抑素基因-放射治疗
电离辐射对乳腺癌干细胞活性氧、凋亡和细胞周期的影响被引量：2
2014年
目的：研究电离辐射对乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞活性氧（ROS）、凋亡和周期分布的影响，探讨乳腺癌干细胞辐射抵抗产生的机制。方法：采用含多种生长因子的无血清培养基悬浮培养人乳腺癌 MCF-7细胞系，分为乳腺癌细胞 MCF-7组、乳腺癌干细胞 MCF-7-S组、MCF-7＋8 Gy组和 MCF-7-S＋8 Gy组。8 Gy电离辐射后4～24 h，分别采用2′，7′-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）、AnnexinⅤ-FITC/PI和 PI染色，流式细胞术检测细胞中 ROS水平、凋亡细胞百分比和各细胞周期时相细胞百分比。结果：含多种生长因子无血清悬浮培养7 d后，形成数百个细胞聚集而成的乳腺癌干细胞微球；流式细胞术检测， CD4＋＋CD24－表型的乳腺癌干细胞高达75.20％。随着时间的延长，MCF-7组和 MCF-7-S组细胞中 ROS水平和细胞凋亡均呈增加的趋势，在12和24 h 达到较大值；在4、8、12和24 h时，MCF-7-S组细胞中 ROS水平均低于 MCF-7组（P＜0.05或P＜0.01）， MCF-7-S组凋亡细胞百分比只在8 h显著高于 MCF-7组细胞（P＜0.05）；MCF-7＋8 Gy组细胞中 ROS水平（4、8、12和24 h）和凋亡细胞百分比（12 h）显著增加（P＜0.05），MCF-7-S＋8 Gy组凋亡细胞百分比（4、8、12和24 h）显著降低（P＜0.05或P＜0.01），MCF-7-S＋8 Gy组细胞中 ROS水平无明显变化。在12 h时，与MCF-7组比较， MCF-7-S组细胞 G0/G1期和 G2/M期细胞百分比显著降低（P＜0.05）， S期细胞百分比显著增加（P＜0.05）；MCF-7＋8 Gy组细胞 G2/M期细胞百分比显著增加（P＜0.05），而 MCF-7-S＋8 Gy组无明显变化。结论：电离辐射导致 MCF-7中 ROS水平和凋亡增加， G2/M期阻滞，而对 MCF-7-S则无明显影响，提示MCF-7-S辐射抵抗可能与 ROS水平、细胞凋亡和 G2/M期阻滞有关。
方芳赵雪莲李丹利白杨龚守良刘扬王志成
关键词：电离辐射乳腺肿瘤干细胞活性氧细胞周期
Akt联合电离辐射对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡、自噬和增殖的影响被引量：4
2015年
目的:通过检测Akt联合电离辐射对乳腺癌MCF-7细胞凋亡、自噬和增殖的影响,探讨以Akt为靶点的乳腺癌放射治疗作用。方法:选择人乳腺癌MCF-7细胞、Akt过表达MCF-7(Akt-MCF-7)细胞和Akt低表达(Akt-RNAi-MCF-7)细胞,实验分为MCF-7组、MCF-7+4Gy组、Akt-MCF-7+4Gy组和Akt-RNAi-MCF-7+4Gy组。3种细胞经4Gy照射后,Western blotting法检测Akt蛋白表达,AnnexinⅤ-FITC和PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率,MDC染色荧光显微镜观察细胞自噬百分比,MTT法检测细胞增殖活性。结果:与MCF-7细胞比较,Akt-MCF-7细胞中Akt蛋白表达强度增加,Akt-RNAi-MCF-7细胞中Akt蛋白表达强度降低。与MCF-7组比较,MCF-7+4Gy、Akt-MCF-7+4Gy和Akt-RNAi-MCF-7+4Gy组细胞凋亡率和自噬百分比均明显增加(P<0.05或P<0.01),且以Akt-RNAi-MCF-7+4 Gy组增加最明显;与MCF-7+4 Gy组比较,Akt-MCF-7+4Gy组细胞凋亡率和自噬百分比明显降低(P<0.05或P<0.01),而Akt-RNAi-MCF-7+4Gy组细胞凋亡率和自噬百分比明显增加(P<0.05或P<0.01)。与MCF-7组比较,MCF-7+4Gy组、Akt-MCF-7+4Gy组和Akt-RNAi-MCF-7+4 Gy组细胞增殖活性在不同时间点均明显降低(P<0.05或P<0.01),Akt-RNAi-MCF-7+4Gy组细胞增殖活性降至最低。与MCF-7+4Gy组比较,Akt-MCF-7+4Gy组细胞增殖活性在24h时明显升高(P<0.05),而Akt-RNAi-MCF-7+4Gy组细胞增殖活性在不同时间点均明显降低(P<0.01)。结论:Akt过表达可以显著降低电离辐射诱导的MCF-7细胞凋亡、自噬和增殖,而Akt低表达作用则相反。
齐亚莉赵大力刘彦军龚守良王志成
关键词：自噬细胞凋亡电离辐射乳腺肿瘤
pEgr1-TRAIL重组质粒联合电离辐射对乳腺癌MCF-7细胞死亡受体通路相关基因和蛋白表达的影响
2016年
目的:将Egr1-TRAIL重组质粒转染人乳腺癌MCF-7细胞且加X线照射,探讨MCF-7细胞中死亡受体通路相关基因和蛋白表达的变化。方法:将MCF-7细胞分为对照组、空质粒组、pEgr1-TRAIL质粒组、4.0Gy X射线组、空质粒+4.0Gy X射线组和pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组。Real-time PCR法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平;Western blotting法检测各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白相对表达水平。结果:经4.0Gy X射线照射后4h,与对照组比较,各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平升高(P<0.01),8h达最高值,之后开始降低,到24h恢复到照射前水平;各组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6 mRNA表达由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组>空质粒+4.0Gy X射线组>pEgr1-TRAIL质粒组>空质粒组>4.0Gy X射线组>对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6mRNA表达水平明显高于其他各组(P<0.01)。MCF-7细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白在照射后6h开始表达,12h达高峰,48h后细胞中DR4、caspase-9和caspase-6蛋白表达水平仍高于6h时蛋白表达水平。与对照组比较,其他各组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平由高到低的顺序为pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组>空质粒+4.0Gy X射线组>4.0Gy X射线组>pEgr1-TRAIL质粒组>空质粒组>对照组,其中pEgr1-TRAIL+4.0Gy X射线组MCF-7细胞中蛋白相对表达水平明显高于其他各组。结论:pEgr1-TRAIL重组质粒联合放疗对MCF-7细胞具有杀伤和诱导凋亡的作用,其效果优于单纯质粒或单纯照射。
胡志宏赵大力谢忠伟王梦莹胡景坤龚守良刘扬齐亚莉
关键词：电离辐射MCF-7细胞
低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸细胞内质网应激及PERK-CHOP信号通路的激活被引量：8
2012年
目的:探讨低剂量电离辐射与小鼠睾丸细胞内质网应激的发生以及PERK-CHOP通路激活的相关性。方法:健康雄性昆明小鼠随机分成时程-效应(75 mGy照射后0、3、6、12和24 h)和剂量-效应(0、50、75、100和200 mGy照射后12 h)组,每组动物10只。采用H2O2和MDA试剂盒比色法检测其含量;利用实时定量逆转录PCR(quantitative RT-PCR)检测GRP78、PERK和CHOP mRNA;Western印迹和图像分析技术检测GRP78、PERK、磷酸化PERK(phosphorylated PERK,pho-PERK)和CHOP蛋白表达。结果:小鼠经75 mGy全身照射后,睾丸组织中H2O2含量随时间延长而增加,MDA含量在3和6 h稍有降低,而后随时间延长而增加,二者在12和24 h较0 h时显著增加(P<0.05,P<0.01);除了GRP78 mRNA(3和24 h)和蛋白表达(6 h)分别在照射后有降低趋势外,GRP78(12 h)、PERK(3、6、12和24 h)和CHOP(12和24 h)的mRNA表达较0 h显著增加(P<0.05,P<0.01),GRP78(12和24 h)、pho-PERK(3、12和24 h)和CHOP(3、6、12和24 h)的蛋白表达也都较0 h显著增加(P<0.05,P<0.01),PERK蛋白表达则无明显变化规律。小鼠经50～200 mGy全身照射后12 h,睾丸组织中H2O2含量在50～100 mGy照射后随剂量增加而增加,200 mGy照射后则稍有降低,MDA含量随剂量增加而增加,而且H2O2含量(75和100 mGy)和MDA含量(75、100和200 mGy)显著高于0 mGy组(P<0.05,P<0.01);除了GRP78mRNA表达在50和200 mGy照射后有降低趋势外,GRP78(75和100 mGy)、PERK(75、100和200 mGy)和CHOP(50、75、100和200 mGy)的mRNA表达都显著高于0 mGy组(P<0.05,P<0.01),GRP78(100和200 mGy)、pho-PERK(50、100和200 mGy)和CHOP(50、75、100和200 mGy)的蛋白表达也都显著高于0 mGy组(P<0.05,P<0.01),而PERK蛋白表达则无明显变化规律。结论:低剂量电离辐射能够诱导小鼠睾丸细胞发生内质网应激,并且激活PERK-CHOP信号通路。
方芳龚平生宋祥福龚守良王志成
关键词：低剂量电离辐射内质网应激PERKCHOP睾丸细胞
电离辐射对转染pcDNA3.1-Egr-1-AIF_(△1-480)质粒的MCF-7细胞增殖和侵袭能力的影响
2014年
目的:探讨辐射增强靶向截短型凋亡诱导因子(AIFΔ1-480)对MCF-7细胞增殖和侵袭能力的影响,阐明其提高肿瘤基因-放射治疗的可能性。方法:人乳腺癌MCF-7细胞经质粒转染早期生长反应1(Egr-1)介导的AIFΔ1-480重组表达载体pcDNA3.1-Egr-1-AIFΔ1-480(pE-AIFΔ1-480),2Gy X射线照射后24h,分别采用MTT法和Transwell侵袭实验检测细胞增殖和侵袭能力。实验分为正常对照组、pcDNA3.1组(只转染pcDNA3.1质粒)、pE-AIFΔ1-480组(转染pE-AIFΔ1-480质粒)、2Gy X线照射组和pE-AIFΔ1-480+2Gy X线照射组。结果:质粒转染并经2Gy X线照射后,正常对照组、pcDNA3.1组和pE-AIFΔ1-480质粒组细胞生长较快,且增殖规律基本一致。与正常对照组比较,2Gy X线照射组和pE-AIFΔ1-480+2Gy X线照射组细胞增殖能力显著降低(P<0.05),且以pE-AIFΔ1-480+2Gy X线照射组降低更明显,从12h开始较2Gy X线照射组明显降低(P<0.05)。正常对照组、pcDNA3.1组和pE-AIFΔ1-480组穿过基底膜细胞数基本一致,而2Gy X线照射组和pE-AIFΔ1-480+2Gy照射组穿过基底膜细胞较正常对照组明显减少(P<0.05或P<0.01),并且pE-AIFΔ1-480+2Gy照射组穿过基底膜的细胞数较2Gy照射组减少更明显(P<0.01)。结论:AIFΔ1-480和电离辐射均能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭,二者具有协同作用,并且Egr-1启动子能增强辐射条件下的抑制效果。
齐亚莉刘洪彬谢忠伟刘彦军王剑锋
关键词：细胞增殖电离辐射
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0